肝癌病人血清中类P21蛋白的检测

P21蛋白是ras基因的产物,含188～189个氨基酸。N-ras、Ha-ras及Ki-ras的P21在氨基酸序列上有很大同源性,一般氨基酸的差异小于18％,鉴于在人原发性肝癌中,N-ras是转化基因之一。为此,应用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、Western转移和~(125)I标记抗P21单抗Y_(13)-259对肝癌、肝炎     

肝癌组织中异常乙肝病毒核心抗原

乙肝病毒感染与肝癌发生的密切关系,已有大量流行病学证据,但是迄今为止尚无实验证据说明乙肝病毒可引起肝组织癌变。乙肝病毒DNA的整合,仅在肝癌中占50～60％,而且整合位点无规律性,整合位点附近没有找到已知的癌基因,因此不能认为整合HBV是诱发肝癌的主要途径。本工作,企图     

肝细胞肝癌相关新基因FP248的功能研究

目的FP248基因是本实验室通过高通量基因功能筛选得到的一个与细胞生长相关的新基因,本研究旨在研究其在肝癌发生发展中的作用.方法用Northern blot,Southern blot方法检测FP248在肝癌及其癌旁组织中mRNA表达差异和DNA的变化.通过体外细胞转染和体内裸小鼠成瘤实验观察FP248对肝癌细胞SMMC-7721生长的作用,并用Atlas Hu-man cDNA Expression Array探讨FP248影响肝癌细胞SMMC-7721的作用机理.结果FP248的mRNA在57%(4/7)的肝癌中表达高于其相应的癌旁组织,而且肝癌组织中DNA有扩增.FP248的过表达在体内外均可明显促进SMMG-7721细胞的生长.Atlas结果显示FP248过量表达后可上调许多与细胞生长密切相关的基因,同时还参与调节细胞粘附分子.结论基因FP248与肝癌的发生发展有密切关系,是一个与人肝癌发生发展相关的新基因.     

用~(125)Ⅰ标记单抗检测非吸烟女性肺癌血浆中ras癌基因产物p21蛋白

目的　探讨肺癌发生与癌基因表达产物之间的相互关系。方法　用 (SDS PAGE)WesternBlotting方法结合单克隆抗体的同位素标记技术 ,检测上海市非吸烟女性肺癌患者和非吸烟健康女性对照人群血浆中ras癌基因表达产物p2 1蛋白。结果　肺癌人群 3 8例中 3 5例p2 1蛋白为阳性 ,对照人群59例中 1 7例为阳性。两者相对危险度估计值 (OR)为 2 8.8(χ2 MH=3 6.85)。 3 5例阳性中 2 3例为“ +” ,8例为“ ” ,4例为“ ”。它们的OR分别为 2 1 .5、1 1 2 .0、56.0 (χ2 MH分别是 2 7.45、3 0 .58、1 9.70 )。肺癌人群p2 1表达阳性率明显高于健康人群 ,有非常显著意义 (P <0 .0 0 1 )。结论　本方法有可能作为分子流行病学调查的一个生物学标志 ,并可能有助于临床诊断 ,以及用于环境、职业性高暴露人群及高危个体的健康监护。     

高血压病线粒体基因突变的研究

高血压病线粒体基因突变的研究Ｍｕｔａｔｉｏｎｏｆｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｇｅｎｅｓｉｎｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ周林张国元万大方李宏年＊＊＊张萍萍＊＊＊赵新泰＊＊＊顾健人＊＊＊（第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所第四研究室）重庆，４０...     

过氧化物酶体增殖激活性受体γ(PPARγ)在肝癌组织中的差异性表达

目的检测过氧化物酶体增殖激活性受体γ(PPARγ)在肝癌组织中有无差异性表达且有无突变.方法用半定量RT-PCR,Western blot,FISH,PCR-SSCP等方法进行鉴定.结果用半定量RT-PCR检测,有8/14为癌中高表达;Western blot方法检测,9/15为癌中高表达.免疫组化显示PPARγ在所有的癌旁组织中定位于细胞浆中;而在5个癌组织中定位于细胞核中;突变热点PPARγ外显子3和5在34对肝癌标本中没有突变.结论过氧化物酶体增殖激活性受体γ在肝癌组织中有差异性表达并且在肝癌标本中没有突变.提示PPARγ可能与肝癌的发展有一定的相关性.     

尿道拖入术治疗外伤性陈旧性后尿道闭锁5例

尿道拖入术1932年为Solovov首创治疗后尿道狭窄或闭锁,经多年改进成功率由50％提高到94.5％,该术具有操作简便、创伤小、不需特殊器械、疗效可靠、术后不易发生再狭窄,从而避免了术后长期尿道扩张等优点。1986年1月以来,我们对5     

产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位基因克隆及表达

目的研究克隆并表达产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素Ｂ亚单位。方法合成２条引物用ＰＣＲ法扩增包括产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素（ＥＴＥＣ，ＬＴ）Ｂ亚单位基因编码区及起始密码子上游７９３ｂｐ的ＤＮＡ片段。ＰＣＲ产物克隆入ｐＢｌｕｅＳｃｒｉｐｔＳＫ（－）并转化进入ＸＬ－Ｂｌｕｅ工程菌中。结果经ＥＬＩＳＡ，Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ测定共获得２２株菌表达ＬＴ－Ｂ，表达水平比Ｈ１０４０７高２～３倍。克隆的基因经测序证实有一个碱基置换，但无氨基酸序列改变。结论本工作成功表达了产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素Ｂ亚单位。     

女性肺癌组织中癌基因产物的表达

人肿瘤的发生与某些原癌基因的活化有密切关系,ras族和myc族基因是人类肿瘤常见的癌基因。许多人曾报道在人的肺癌组织或细胞株中有Ki-ras或/和C-myc基因的放大、突变活化或异常表达。癌基因是通过其产物而起生物学作用的,为了探索癌基因产物在癌变过程中的作用及其应用价值,首先必须得到大量的基因产物,我室曾构建了V-Ki-ras和V-myc的表达质粒。本文主要报道抗V-Ki-ras、V-myc基因产物多克隆抗体的制备及应用多克隆抗体以免疫印迹法检测女性肺癌组织中Ki-ras和C-myc的产物。     

DELETION AND INACTIVATION OF RETINOBLASTOMA SUSCEPTIBILITY GENE IN PRIMARY RETINOBLASTOMA

The status and expression of Rb gene was detected and analyzed in 19 surgical retinoblastoma specimens using Rb cDNA 3. 8 kb and 0. 9 kb fragment as probe and antibodies specific for synthetic Rb peptide or expressive product of Rb gene expression plasmld. DNA from those tumors had the hemlzygous deletion in 3 cases, the homozygous internal deletion In 2 cases and alterated restriction fragment involving In one copy of Rb gene In 1 case. The quantity of Rb protein demonstrated either absence of reduction in all the 16 cases examined In comparison with that in normal adult retina. It suggested that there were structural or/ and functional defects of Rb gene In retinoblastoma cells and provided evidence to support Knudson' s two hit hypothesis.