三七总皂甙对人肝癌细胞缝隙连接细胞间通讯的调节机制

目的：观察三七总皂甙对人肝癌细胞SMMC-7721缝隙连接细胞间通讯、以及缝隙连接蛋白32mRNA和磷酸化细胞外信号调节激酶1，2表达的影响。方法：实验于2005—08／2006—03在江西省分子医学重点实验室完成。①实验操作：SMMC-7721细胞用含100mg／L，200mg／L，400mg／L三七总皂甙的培养液预处理，对照组SMMC-7721细胞不加三七总皂甙。②实验评估：采用划痕标记，染料示踪技术检测缝隙连接细胞间通讯的变化；采用反转录-聚合酶链反应检测缝隙连接蛋白32mRNA水平；采用流式细胞仪检测磷酸化细胞外信号调节激酶1／2的表达。结果：①对照组染料局限于划痕两侧的细胞内，无明显的荧光染料传输，GJIC阴性；三七总皂甙可上调染料传输范围，且随三七总皂甙剂量增高，染料传输范围逐渐增大，最远可达三四层细胞。②反转录-聚合酶链反应结果显示，各组细胞缝隙连接蛋白32mRNA水平差异无显著性意义（P〉0．05）。③流式细胞仪结果显示，对照组SMMC-7721细胞磷酸化细胞外信号调节激酶1／2表达的阳性率较高，伴随三七总皂甙剂量增加磷酸化细胞外信号调节激酶1／2表达的阳性率逐渐下降，呈一定的剂量依赖效应。结论：三七总皂甙可能通过抑制SMMC-7721细胞磷酸化细胞外信号调节激酶1／2的活化减少缝隙连接蛋白32的磷酸化，进而上调SMMC-7721细胞的缝隙连接细胞间通讯功能。     

逆行胫后动脉皮瓣修复足部严重皮肤软组织缺损

目的探讨胫后动脉逆行皮瓣修复足踝部皮肤软组织严重缺损的临床应用效果。方法应用胫后动脉逆行皮瓣修复足踝部皮肤软组织严重缺损,移植皮瓣大小5cm×9cm～8cm×20cm。结果本组中的24例患者术后皮瓣全部成活,创面一期愈合,1例患者皮瓣远端小部分坏死,换药治疗后愈合。术后随访6～24个月,均取得满意效果。结论胫后动脉逆行皮瓣血供充分,皮瓣切取面积大,是修复足踝部皮肤软组织严重缺损的理想皮瓣。     

β-神经生长因子缓释系统对原代培养鸡胚背根神经节轴突生长的影响

目的 制备β神经生长因子(nerve growth factor,NGF)缓释系统,评价其及其组份对体外培养鸡胚背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)轴突生长的生物学效应.方法 构建含β-NGF 50、100、250μL的缓释系统分别与DRG共同培养,DRG常规培养作为对照组,了解各浓度组DRG的轴突生长;分别利用缓释系统各组份与DRG培养,观察各组轴突生长情况.实验分成6组:对照组(DRG+纤维蛋白原),A组(DRG+纤维蛋白原+肝素结合肽+肝素钠+100 μg/Lβ-NGF),B组(DRG+纤维蛋白原+肝素钠+100μg/Lβ-NCF),C组(DRG+纤维蛋白原+肝素结合肽+100μg/Lβ-NGF),D组(DRG+纤维蛋白原+100μg/Lβ-NGF),E组(DRG+纤维蛋白原+肝素结合肽十肝素钠).结果 50、100和250μg/Lβ-NGF缓释系统轴突生长是对照组的1.31(P>0.05)、3.78(P<0.01)和3.05(P<0.01)倍;100μg/L组较2.50μg/L组DRG轴突生长明显(P<0.05).实验组A、B、C、D和E组的DRG轴突生长分别是对照组的3.75、1.15、1.12、1.10和1.09倍,与对照组比较仅A组差异有统计学意义(P<0.01).结论 β-NGF缓释系统中释放的β-NGF具有生物活性,可明显促进DRG轴突生长.     

缝隙连接蛋白43在骨骼发育和塑形中的作用

骨骼的发育和塑形过程要求成骨细胞、骨细胞及破骨细胞在接受胞外刺激时能发挥高度协调统一的生物学功能.相邻细胞间缝隙连接蛋白(Cx)构成的缝隙连接介导细胞间信号通路,使骨骼细胞在接受胞外刺激后产生的信号分子在相关细胞中迅速传递,从而使调节骨骼发育、塑形的相关细胞群形成一功能整体.Cx43是骨骼组织中最重要的连接蛋白,与骨骼发育、塑形和再塑形密切相关,它的基因突变、表达异常可导致眼-牙-指(趾)综合征或其他骨骼发育畸形.Cx43在各种理化因素对骨骼细胞发挥生物学效应过程中均扮演重要角色,这与相关信号通路活化密切相关.     

三七总皂甙通过细胞外信号调节蛋白激酶1/2信号通路促进大鼠

背景：三七总皂甙对骨髓基质细胞向神经样细胞分化的效应及相关信号通路目前尚不明确。 目的：探讨细胞外信号调节蛋白激酶1/2信号通路对三七总皂甙调节大鼠骨髓基质细胞向神经细胞增殖、分化的作用。 设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2008-05/10在汕头大学医学院分子生物学实验室完成。 材料：4~6周龄雄性SD大鼠9只,由汕头大学医学院实验动物中心提供。三七总皂甙为广西梧州制药集团股份有限公司产品,细胞外信号调节蛋白激酶的抑制剂PD98059为Cell Signaling Tech 公司产品。 方法：全骨髓法体外分离纯化大鼠骨髓基质细胞,取传至第3代细胞进行诱导分化,设立3组：单纯诱导组向培养液中加入10 μg/L碱性成纤维细胞生长因子,预诱导24 h后全量换为正式诱导液(含10 μg/L碱性成纤维细胞生长因子、2% DMSO、200 μmol/L丁羟回醚的α-MEM培养基),每24 h半量换诱导液1次;三七总皂甙组向预诱导液和正式诱导液内加入终浓度100 mg/L三七总皂甙;PD98059组在三七总皂甙组培养液基础上加入10 μmol/L PD98059。 主要观察指标：细胞形态学观察,MTT法检测细胞增殖情况,免疫组织化学方法鉴定细胞Nestin的表达。 结果：诱导6 h后,少数细胞呈锥形,细胞突起增多伸长,类似神经元,继续诱导培养后细胞突起增多,突起相互连接成网状。与单纯诱导组、PD98059组比较,诱导6,12,24 h三七总皂甙组细胞均明显增殖(P < 0.05),且随诱导时间延长呈递增趋势(P < 0.05);单纯诱导组、PD98059组间比较无明显差异(P > 0.05)。与单纯诱导组比较,诱导24 h后三七总皂甙组Nestin阳性率明显升高(P < 0.05),PD98059组Nestin阳性率明显降低(P < 0.05)。 结论：三七总皂甙可以促进骨髓基质细胞的神经分化和分化后增殖,细胞外信号调节蛋白激酶1/2的特异性抑制剂PD98059能够拮抗三七总皂甙促增殖分化作用,提示细胞外信号调节蛋白激酶1/2信号通路是三七总皂甙促进骨髓基质细胞向神经细胞分化和增殖的重要环节。     

多层螺旋CT血管成像在烟雾病诊断中的应用

目的 探讨多层螺旋CT血管成像(MSCTA)在烟雾病诊断中的价值以及应用前景.方法 回顾性分析10例烟雾病患者的MSCTA及数字减影血管造影(DSA)的影像学资料.结果 MSCTA可清晰显示狭窄、闭塞以及异常增多的脑血管.容积重建有利于显示病变血管与周围结构的空间关系,综合最大密度投影法重建和多曲面重建图像分析可清晰显示异常增多的脑血管,即烟雾状血管.MSCTA对狭窄及闭塞血管的检出率为66.2%(53/80);DSA对狭窄及闭塞血管的检出率为67.5%(54/80).两者比较差异无统计学意义(P>0.05).MSCTA对颅底异常血管网的显示及分布情况与DSA大致相似.结论 MSCTA诊断烟雾病的灵敏度高,是早期诊断烟雾病的重要依据,早期诊断、及时治疗是改善烟雾病患者预后的有效方法.     

三七总皂甙对大鼠骨髓基质细胞向神经样细胞增生、分化的影响

目的 研究三七总皂甙对大鼠骨髓基质细胞增生及向神经细胞分化的影响.方法 实验将分离、纯化的大鼠骨髓基质细胞(bone marrow strowal cells, BMSCs)分为3组--对照组、诱导组和PNS组,分别采用常规培养液、常规培养液加入二甲亚砜(DMSO)和丁羟回醚(BHA) 的诱导分化液以及含100mg/L PNS的诱导分化液进行培养,然后对各组细胞分别进行形态学观察,应用MTT法检测BMSCs增生及免疫组织化学方法检测BMSCs的Nestin表达.结果 诱导6h后,少数BMSCs呈锥形, 细胞突起增多伸长, 类似神经元.继续诱导培养后细胞突起增多,突起相互连接成网状.诱导分化后细胞Nestin免疫染色阳性,PNS组阳性率>诱导组>对照组(P＜0.05).诱导组、对照组细胞增生良好,二者比较无显著差异(P＞0.05),PNS组细胞增生明显,与对照组比较有显著性差异(P＜0.05).结论 三七总皂甙可明显促进骨髓基质细胞向神经细胞的分化和增生.     

上消化道出血诱发急性前壁心肌梗死伴室间隔穿孔一例

1临床资料 患者,女性,66岁,因黑便1天,心前区疼痛3 h于2003年7月15日急诊入院.1天来,共解黑便4次,量约1 500ml,既往有高血压病史9年,长期服用复方降压平,有胃窦炎病史3年,无冠心病史.体检:血压125/80mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),轻度贫血貌,心界不大,律齐,心率81次/min,各瓣膜听诊区未闻及杂音.上腹部压之不适,肝脾肋下未及.大便常规示:柏油样便,潜血 ,血红蛋白69g/L,心电图示:V1～V5导联ST段呈弓背形抬高0.2～0.3 mV.急查肌钙蛋白T 2.0μg/L.临床诊断(1)上消化道出血(2)急性广泛前壁心肌梗死,即给予止血、保护胃黏膜及扩冠等治疗.     

超声血管成形术用于下肢动脉阻塞性疾病的初步报告

目的：总结应用Acolysis血栓超声消融仪治疗下肢动脉硬化闭塞症的初步体会。方法：先行Seldinger法动脉造影，再小切口暴露股浅、股深动脉分叉处，直视穿刺，引入超声消融导管，数字减影血管造影术（DSA）监视下消融，至血管再通。消融时间458s-1112s，平均702s。最长消融段35cm。结果：全部病例术中造影证实血流通畅。同侧胫后、足背动脉立即恢复搏动8例，其余3例ABI和动脉多普勒血流图较术前明显改善。结论：超声消融治疗下肢动脉硬化闭塞症，近期效果较好，远期效果有待观察。     

下肢动脉硬化闭塞症患者围手术期死亡原因分析

目的 探讨下肢动脉硬化闭塞症围手术期死亡原因及影响因素,降低其围手术期死亡率.方法 回顾性分析2005年7月至2010年7月15例下肢动脉硬化闭塞症围手术期死亡的临床资料.结果 本组15例围手术期死亡患者中,术前死亡9例,包括多器官功能衰竭5例、心功能衰竭2例、心源性猝死和呼吸衰竭各1例;术后死亡6例,包括急性肾功能衰竭2例、心功能衰竭2例、脑梗死和失血性休克各1例.与心脏、肾脏及肺脏相关的死亡分别是10例、6例、2例;直接死于心功能衰竭、心源性猝死、肾功能衰竭、呼吸衰竭、脑梗死和失血性休克分别是4例、1例、2例、1例、1例、1例.多器官功能衰竭、心功能衰竭、急性肾功能衰竭是围手术期死亡的主要原因,共占73.33％(11/15).围手术期总病死率是3.11％ (15/483),手术死亡率是1.47％( 6/407).结论 死亡原因与影响因素、器官功能密切相关,有效干预影响因素,加强围手术期器官功能的监测与治疗,有利于降低围手术期死亡率.