EB病毒LMP1-CTAR2结构域的原核表达及蛋白质纯化

目的:构建LMP1-CTAR2原核表达载体,纯化LMP1羧基端活化区2(CTAR2)蛋白。方法:通过RT-PCR技术从B95-8细胞中扩增EBVLMP1 CTAR2 cDNA,克隆至PGEM-T载体后测序。运用亚克隆技术构建PGEX-6P-3-CTAR2重组表达载体。用SDS-PAGE与western blot对表达产物进行鉴定,利用Sepharose 4B亲和层析柱对表达产物进行分离和纯化。结果:PCR扩增出225 bp的基因片段,测序结果与已知的LMP1 CTAR2序列吻合。成功构建PGEX-6P-3-CTAR2原核表达载体,western blot分析表明表达产物能与抗LMP1单克隆抗体特异结合。成功分离出Mr约37000的PGEX-6P-3-CTAR2融合蛋白,纯化出Mr约15000的LMP1 CTAR2蛋白。结论:成功获得EBV LMP1 CTAR2蛋白,可用于噬菌体筛库和CTAR2致瘤机制研究。     

92例大学生耐卡那霉素肠球菌的分离鉴定及其相关因素

目的 分离鉴定健康大学生粪便中的耐卡那霉素肠球菌,并调查相关因素.方法 用卡那霉素ELB选择培养基分离培养92份健康大学生粪便中的肠球菌,调查他们的健康状况及生活习惯等.结果 共鉴定出21例携带卡那霉素抗性肠球菌,71例阴性.耐卡那霉素肠球菌的分离率与饮食辛辣的相关性具有统计学意义(X2=5.75,P＜0.05);而与消化不良、胃肠不适和便秘的相关性无统计学意义(X2＜3.84,P＞0.05).结论 耐卡那霉素肠球菌的分离率与饮食辛辣相关,与消化不良、胃肠不适和便秘等无相关性,其机制及其临床意义有待进一步的研究和随访.     

原发性肾小球肾炎的循证治疗现状

原发性肾小球肾炎的发病机理尚不明确,其病情复杂多样,因此学术界对于如何治疗原发性肾小球肾炎一直存在着争议。本文介绍了原发性肾小球肾炎的循证治疗现状。     

肝细胞生长因子对转化生长因子诱导肾小管上皮细胞转分化的影响

目的应用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肾小管上皮细胞肌纤维母细胞转分化,研究肝细胞生长因子(HGF)对肾小管上皮细胞的表型重塑的作用和机制。方法在正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E细胞株)培养液中分别加入TGF-β1及HGF,应用倒置相差显微镜、扫描电镜观察细胞形态变化;免疫组织化学方法检测肌纤维母细胞特异性标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;ELISA法分析测定培养细胞上清液中纤维连结蛋白(FN)的含量;RT-PCR检测结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达。结果1TGF-β1诱导肾小管上皮细胞从原有典型的上皮细胞形态转变为长梭形肌成纤维细胞样形态;α-SMA的表达、上清液FN含量、细胞CTGFmRNA表达明显增加(P<0.05)。2单纯HGF对细胞形态学、α-SMA的表达及FN含量与空白对照组无明显影响;不同浓度HGF组的CTGFmRNA表达较空白对照组均增加(P<0.05)。3HGF能抑制TGF-β1诱导的NRK52E细胞形态学改变;α-SMA的表达、FN水平均比诱导组TGF-β1明显下降(P<0.05);HGF抑制了TGF-β1诱导的CT-GFmRNA表达(P<0.05)。结论HGF能够负性调控TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞肌纤维母细胞转分化作用,减少FN分泌;HGF对TEMT的负性调节作用可能是通过减少CTGF表达来实现的。     

广州市天河区流动人口生殖健康现状调查

目的了解广州市天河区流动人口的生殖健康现状。方法采用匿名问卷的形式对广州市天河区1244例15～45岁流动人口的生殖健康知识、态度、行为以及主要生殖健康问题进行横断面调查。结果获取有效问卷1206份。受调查的流动人口平均年龄为29.82岁;文化程度主要是初中及以下(58.1%);职业以工人、商贸餐饮业和社会服务业为主(80.6%);流动人口对受孕知识知晓率不高,正确率仅占44.9%,已婚人群正确率远高于未婚人群(P<0.05);流动人口对艾滋病3种传播途径回答正确率为56.4%,非传播途径回答正确率为33.5%;已婚人群和未婚人群对计划生育服务政策知晓率分别为69.0%和42.6%(P<0.05);已婚人群进行生殖健康咨询的比例高于未婚人群(P<0.05);未婚女性和男性在避孕措施上主要选择使用避孕套(分别占75.2%和89.1%);绝大多数已婚女性(94.0%)和已婚男性(93.9%)采取的前三位避孕措施为宫内节育器、输卵管结扎、避孕套。结论流动妇女对生殖健康相关知识及政策了解不足,自我保健意识薄弱。积极采取有效措施提高流动已婚妇女的生殖健康认知水平是迫切需要解决的问题。     

腹腔镜下手术及常规开腹手术行腹透置管的相关研究进展

畅通和持久的腹透管路是腹膜透析得以顺利进行的前提和保障,管路的机械性故障是除腹膜炎之外造成腹膜透析技术失败的另一重要原因,尤其是在透析初始的第1年[1].腹透管的功能和寿命与腹膜透析置管技术密切相关,当前普遍采用的置管技术仍然是传统的开腹手术.腹腔镜引导下腹膜透析置管技术并不是一项新兴的技术,但随着腹腔镜技术的进展,此项技术已被越来越多的医生采纳,其优点已经在很多研究中彰显出来.腹膜透析置管的最佳方式目前仍存在广泛的争议,2010年《国际腹膜透析杂志》发表了腹膜透析通路指南[ 2],也仅仅指出采用何种置管技术可根据各腹透中心的专业人士来决定.本文将对腹腔镜下腹膜透析置管操作技术以及其与常规开腹手术的对比做一综述.     

提高透析液钙浓度对透析中低血压患者血流动力学的影响

目的 对反复出现透析中低血压的维持性血液透析患者,提高透析液钙浓度,观察透析过程的血流动力学稳定性.方法 本研究采用前瞻性、单中心、前后交叉自身对照研究方式,将四川大学华西医院透析中心符合纳入标准的透析中低血压(intra-dialysis hypotension,IDH)患者随机分为2组.A组患者分别予以低钙、中钙、高钙的透析液各进行2周透析,B组患者分别予以高钙、中钙、低钙的透析液各进行2周透析.2组患者均每周透析3次,每次4h.记录透析前与透析过程中的收缩压、舒张压与心率、透析前血压与透析中最低血压差值(△P);记录透析过程中症状性低血压、提前停止透析事件的发生率.结果 共有16例IDH患者符合纳入标准,其中2例因发生感染退出,其余14例患者均完成研究.与中钙透析液相比,高钙透析液提高透析过程中的平均收缩压,差别具有显著性差异 (F =3.302,P=0.013),而收缩压差值无显著性差异( F=3.047,P=0.098).与低钙透析液相比,高钙透析液降低透析前与透析中最低血压的收缩压差值有显著性差异( F=3.047,P=0.016),平均收缩压无显著性差异( F=3.302,P=0.073).而中钙透析液与低钙透析液之间透析中平均收缩压、收缩压差值无显著性差异(分别为F=3.302,P=0.457和F =3.047,P=0.479),但对于舒张压、心率的变化以及减少透析不良事件的发生率无显著作用.结论 通过3种钙浓度的比较,高钙透析液对提高透析中低血压患者血流动力学稳定性有一定改善,但不能减少透析中症状性低血压的发生,改善透析充分性.高钙透析液对顽固透析中低血压患者血流动力学方面的作用,尚需要多中心、大样本的临床研究来明确.     

腹膜透析相关性腹膜炎单中心8年变化趋势回顾分析

目的分析8年间腹膜透析相关腹膜炎的人口学特点、细菌谱、耐药率及转归的变化趋势。方法对北京大学第一医院腹膜透析中心2003年1月至2005年12月及2008年1月至2011年8月腹膜炎进行回顾分析。结果 2008年至2011年腹膜炎人群的透析龄(34.8月比11.7月)和糖尿病患病率(41.8%比28.4%)高于2003年至2005年。两阶段分别发生121例次和258例次腹膜炎,腹膜炎发生率呈下降趋势(1次/44.8患者月比1次/58.9患者月),其中36例次和177例次培养阳性(培养阳性率分别为57.1%和73.4%),革兰氏阳性菌分别为22例次和111例次,革兰氏阴性菌为13例次和49例次。革兰氏阳性菌均以表皮葡萄球菌最多见,革兰氏阴性菌均以大肠埃希菌最多见。对多种药物耐药率均呈现不同程度的上升趋势,但对于头孢哌酮/舒巴坦、万古霉素、亚胺培南、美洛培南始终保持100%敏感。2008年至2011年的腹膜炎退出率高于2003年至2005年(20.5%比14.9%)。结论随着透析中心人群透析龄的延长,以及糖尿病患者比例的显著增加,虽然腹膜炎发生率呈下降趋势,细菌谱也无明显变化,但耐药率和腹膜炎退出率有升高趋势。     

自身抗体检测在系统性红斑狼疮诊断中的临床分析

目的 评价抗双链DNA (dsDNA)抗体、抗Sm 抗体、抗核小体抗体(anti-nucleosome antibody,AnuA)联合检测对系统性红斑狼疮(SLE)诊断的意义.方法 测定68例SLE患者,60例其他结缔组织病患者及50例健康体检人群血清中的自身抗体,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定抗dsDNA抗体、AnuA;以免疫印迹法测定抗Sm抗体.结果 抗dsDNA抗体、抗Sm抗体和AnuA在SLE患者中的阳性检出率明显高于疾病对照组和正常对照组;AnuA检测对SLE诊断的敏感性为69.1%,高于其他两种自身抗体,三者检测的特异性均在95%以上;AnuA与抗dsDNA抗体或AnuA与抗Sm抗体的二联检测及三者同时联合检测的敏感性分别为80.9%、82.4%、85.3%,显著高于单个检测的敏感性(P<0.05).结论 血清抗dsDNA抗体、抗Sm抗体和AnuA检测对SLE诊断的特异性较高、敏感性不高,而三项联合检测明显提高了诊断SLE的敏感性,对SLE患者的早期正确诊断有重要意义.     

广州、深圳市流动人口生殖健康服务利用影响因素分析

目的:了解广州市8个城区和深圳市6个城区流动人口生殖健康服务利用的影响因素,为制定促进流动人口生殖健康服务利用的干预措施提供依据。方法:采用完全随机和整群抽样相结合的方法对外来务工人员进行问卷调查,利用SPSS 12.0统计软件对数据进行描述性分析和对应分析。结果:获取有效问卷4 332份,深圳市1 859人,广州市2 473人。流动人口平均年龄为28.81岁,56%为30岁以下。暂住城市、人群类别、对生殖健康检查场所及计生政策的知晓度是流动人口获得生殖健康检查的主要影响因素;暂住城市、人群类别、务工时间、文化程度、受孕知识是流动人口获得避孕方法指导的主要影响因素;暂住城市、文化程度、对免费避孕药具场所的知晓度是流动人口获得免费避孕药具的影响因素;暂住城市、年龄、务工时间、文化程度及对计划生育服务政策的了解程度是流动人口查孕、查环的影响因素。结论:流动人口对生殖健康服务利用不高,各级计划生育服务机构需加强生殖健康知识宣传及提供全方位的服务,激发流动人口对自身生殖健康服务的需求。