鸦胆子油乳剂对食管鳞状细胞癌TE-1细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其可能的机制

目的：探讨鸦胆子油乳剂（BJOE）对食管鳞状细胞癌TE-1细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其可能的机制。方法：按干预措施的不同,将TE-1细胞分为对照组、RAPA（自噬激动剂）组、740Y-P（PI3K激活剂）组、BJOE 组、BJOE+RAPA组和BJOE+740Y-P 组。采用FCM、克隆形成、Transwell 实验检测细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭能力,qPCR 法检测细胞中PI3K、Akt、mTOR、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、p62、Beclin 1、caspase-3的mRNA表达,WB法检测PI3K、Akt、mTOR及其磷酸化、LC3Ⅱ/Ⅰ、p62、Beclin 1、caspase-3的蛋白表达。结果: 与对照组比较,RAPA组和BJOE 组细胞凋亡率均显著升高（均P<0.01）,细胞克隆形成率、迁移和侵袭能力均显著降低（均P<0.01）,细胞中PI3K、Akt、mTOR 的mRNA 和蛋白磷酸化水平均显著降低（均P<0.05）,p62的mRNA 和蛋白水平显著降低（均P<0.01）,LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1和caspase-3的mRNA和蛋白水平显著升高（均P<0.05）,740Y-P 组的结果则相反（均P<0.05）;与RAPA组或740Y-P 组比较,BJOE+RAPA组或BJOE+740Y-P 组细胞凋亡率显著升高（均P<0.01）,克隆形成率、细胞侵袭和迁移能力显著降低（均P<0.01）,PI3K、Akt、mTOR的mRNA和蛋白磷酸化水平均显著降低（均P<0.05）,p62 的mRNA和蛋白水平均显著降低（均P<0.05）,LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1 和caspase-3 mRNA和蛋白水平显著升高（均P<0.05）。结论: BJOE显著抑制TE-1细胞增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡与自噬,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活有关。     

上肢手术消毒支架的制作与应用

上肢手术皮肤消毒一般采用输液架悬吊绷带固定腕关节或直接由医生提拉患肢进行皮肤消毒。上述方法存在消毒不完全、悬吊或牵拉不稳定易滑脱、耗费人力等问题。为解决这些问题,我们自行设计并制作了上肢消毒支架用于上肢手术的皮肤消毒。经过多年临床应用,消毒效果满意,现将制作及使用方法介绍如下。1材料及制作方法1.1材料准备长宽各为25cm×10cm、10.5cm×12cm,厚1cm的木板各2块、另备三合板、铁钉、乳胶、棉垫、防水塑料布。1.2制作方法支架顶部采用三合板,需要在一定的湿度和温度下折弯出弧度,弧底下陷1cm。其他部位均采用1cm厚度的木板…     

氧化苦参碱对TGF-β1诱导的PANC-1细胞Smad3/Gli1通路相关因子表达的影响

目的研究氧化苦参碱(OM)对接受转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激的人胰腺导管癌PANC-1细胞中Smad3/Gli1通路相关因子表达的影响。方法以TGF-β1刺激PANC-1细胞模拟胰腺纤维化模型,并观察给予OM干预对Smad3/Gli1通路相关因子表达的影响。通过细胞转染技术将Gli1及Smad3的RNA干扰质粒转染入PANC-1细胞;通过Western blotting技术检测Smad3、Gli1和α-SMA的蛋白表达,ELISA技术检测纤连蛋白(FN)和I型胶原(Co L-I)在细胞培养上清中的表达。结果与对照组相比,PANC-1细胞接受TGF-β1刺激后Smad3、Gli1和α-SMA的蛋白表达显著升高;与TGF-β1组相比,OM和TGF-β1共同处理组Smad3、Gli1和α-SMA的蛋白表达显著降低。转染Smad3干扰质粒后,Gli1、α-SMA、FN和Co L-I表达显著下降。与TGF-β1组比较,转染Gli1干扰质粒后加TGF-β1组α-SMA、FN和Co L-I表达显著降低。结论 OM可能通过调节PANC-1细胞TGF-β1/Smad3/Gli1通路发挥抗胰腺纤维化作用。     

脑出血后神经细胞线粒体DNA缺失的实验研究

目的观察大鼠脑出血后神经细胞线粒体DNA(mtDNA)缺失突变与氧化应激水平的相关性。方法 SD大鼠110只,随机分为正常组10只,脑出血组和假手术组各50只,Rosenherg法建立大鼠脑出血模型,后2组术后12h、1、2、4和7 d时观察,每个时间点10只,巢氏PCR技术检测大鼠神经细胞mtDNA缺失突变率,荧光实时定量PCR技术定量分析mtDN~(4834 bp)缺失含量,硫代巴比妥酸比色法和黄嘌呤氧化法检测脑组织丙二醛含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果脑出血组大鼠神经细胞mtDNA~(4834 bp)片断缺失总发生率54%,明显高于假手术组(P<0.0)5);与假手术组相应时间点比较,脑出血组神经细胞mtDNA~(4834 bp)平均缺失率明显升高(P<0.05);与假手术组和正常组比较,脑出血组SOD活性明显降低,丙二醛含量明显升高(P<0.05)。结论大鼠脑出血后,mtDNA~(4834 bp)缺失与氧化应激水平相关,mtDNA~(4834 bp)缺失突变可能是脑出血后迟发性神经细胞损伤机制之一。     

不同时间窗电针治疗对脑梗死大鼠Bcl-2和BDNF表达的影响

目的 研究大鼠脑缺血-再灌注后不同时间窗开始电针(electroacupuncture)治疗对其康复的影响.方法 将100只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、电针组和模型组,制备左侧大脑中动脉栓塞/再灌注模型.电针组于动物再灌注后不同时间窗给予电针治疗,于治疗14d后取脑,采用RT-PCR检测梗死侧Bcl-2 mRNA、BDNFmRNA的表达.结果 各组均检测到BDNF mRNA和Bcl-2 mRNA阳性表达,在电针12h亚组可以检测到BDNFmRNA的表达明显高于其它各组,有显著性差异(P<0.05);在电针24h组可以检测到Bcl-2 mRNA的表达明显高于其它各组,有显著性差异(P<0.05).结论 在12h～24h时间窗给予电针治疗能促进大鼠脑梗死后梗死侧BD-NF mRNA和Bcl-2 mRNA的表达达到峰值,从而发挥其脑保护及康复治疗的最大效应.     

丹参酮IIA磺酸钠注射液对心肌缺血再灌注大鼠心功能和免疫反应的调节作用

目的　本文研究丹参酮IIA磺酸钠注射液（Sodium tanshinone IIA sulfonate,TIIA）对心肌缺血再灌注（ischemia-reperfusion,I/R）大鼠心功能和免疫反应的调节作用及其机制。 方法　采用冠状动脉结扎法建立心肌缺血再灌注大鼠模型;随机分成5组：Ctrl组、I/R组、I/R+TIIA（0.5 mL）组、I/R+TIIA（1 mL）组和I/R+TIIA（2 mL）组;测定平均动脉压（mean ventricular systolic pressure,MAP）、左室收缩压（left ventricular systolic pressure,LVSP）和心率（heart rate,HR）;采集血清Elisa检测心损标记物表达水平和氧化应激指标含量;HE染色和TUNEL染色观察心肌损伤情况;流式分选外周血CD4+iNOS+,CD4+IL-10+凋亡变化;蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白和P65、IL-8及TNF-α表达情况。 结果　丹参酮ⅡA磺酸钠注射液能上调MAP、HR和LVSP水平以改善I/R模型大鼠心功能(P＜0.01);降低血清中CK-MB、cTnΙ和Mb的表达上调;减少MDA、LDH表达,增加SOD水平;改善心肌组织的病理改变,抑制心肌细胞凋亡,上调Bcl-2、下调Bax蛋白表达(P＜0.01);减少iNOS+和增加IL-10+细胞凋亡而改善Th1/Th2平衡(P＜0.01);抑制P-P65、IL-8和TNF-α的表达下调(P＜0.01)。 结论 丹参酮IIA磺酸钠注射液对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制与改善心功能,调节免疫反应有关。     

Over-expression of VEGF in marrow stromal cells promotes angiogenesis in rats with cerebral infarction via the synergistic effects of VEGF and Ang-2

This study explored whether the transplantation of modified marrow stromal cells (MSCs) has angiogenic effects in a left middle cerebral artery occlusion infarction/reperfusion (MCAO I/R) rat model and preliminarily examined the mechanism of angiogenesis following cerebral infarction.MSCs were isolated by using a direct adherent method and cultured.Vascular endothelial growth factor (VEGF) was transfected into MSCs by employing the liposome transfection.The transfection efficiency was measured by the optical density method.The protein expression of VEGF gene before and after transfection was measured by Western blotting.SD rat model of transient occlusion of the left middle cerebral artery was established by using an approach of intra-luminal occlusion.Tetrazolium (TTC) and HE staining were performed to observe the cerebral infarction.ELISAs were used to measure the levels of VEGF in the rat cerebral tissues.The expression patterns of angiopoietin-2 (Ang-2) and CD34 in cells surrounding the area of infarction were immunohistochemistrically oserved.Ang-2 protein expression in the tissue surrounding the area of infarction was measured by Western blotting.VEGF expression in the MSCs increased after transfection at a rate of approximately 28%±3.4%.ELISA showed that the expression of VEGF in the cerebral tissue was significantly increased after induction of infarction,peaking on the 4th day and decreasing to the levels of the sham surgery group (normal) within 7 to 10 days.The VEGF level was significantly higher at each time point in the VEGF-MSC and MSC groups compared to the model group.Moreover,the VEGF level was higher in the VEGF-MSC group than in the MSC group and stayed relatively high until the 10th day.The immunohistochemical results showed that 10 days after the infarction,the number of Ang-2 and CD34-expressing cells in the area surrounding the infarction was significantly higher in the VEGF-MSC group and the MSC group compared to the model group.Moreover,the VEGF level was higher in the VEGF-MSC group th     

过表达脾酪氨酸激酶降低氧化应激诱导的小鼠成骨细胞凋亡

目的探究脾酪氨酸激酶(SYK)对氧化应激(OS)诱导的小鼠成骨细胞MC3T3-1凋亡的影响及其机制。方法过氧化氢(H_2O_2)孵育MC3T3-1细胞,建立OS模型;实时荧光定量PCR检测SYK的mRNA表达量;Western blot检测SYK、AKT、p-AKT和UCP2蛋白表达量;构建重组质粒pcDNA.3.1-SYK或pcDNA.3.1-UCP2,分别转染MC3T3-1;AKT抑制剂HIMO抑制AKT磷酸化;annexin-V FITC/PI法检测细胞凋亡;caspase-3荧光检测等试剂盒检测caspase-3活性和ROS水平。结果 OS降低MC3T3-1中SYK的表达(P0.01);过表达SYK降低OS诱导的细胞凋亡(P0.05)、caspase-3活性(P0.01)和ROS水平(P0.01);过表达SYK提高AKT的磷酸化水平(P0.05)和UCP2的表达量(P0.01);抑制AKT磷酸化后可消除过表达SYK对细胞凋亡和UCP2的表达的影响(P0.01)。在过表达SYK、抑制AKT的MC3T3-1细胞中,过表达UCP2,细胞凋亡(P0.05)和ROS水平(P0.01)均显著降低。结论过表达SYK可通过调控AKT/UCP2降低OS对小鼠成骨细胞的伤害。     

彩超在原发性肝癌介入治疗前后的应用研究

目的　探讨彩超在原发性肝癌介入治疗前后的临床应用价值 ,评价TACE、TACE PLI的治疗效果。方法　所有病例于治疗前1天、治疗后 1周、2周以及治疗后每月行一次超声检查 ,同时定期行血清AFP测定 ,再手术病例及治疗后穿刺取活检病例可用病理结果来判断治疗效果。结果　两组治疗前后AFP、肿瘤直径、肿瘤血供、肝固有动脉峰值速度、RI均有显著变化 (P <0 0 5 ) ,TACE PLI组较TACE组AFP转阴率升高 (P <0 0 5 )、肿瘤直径缩小、肿瘤血供减少、肝固有动脉内径减小、峰值速度减慢 (P <0 0 5 ) ,RI升高 (P <0 0 5 )。结论　彩超为判断肝癌的治疗效果提供了一种简便、及时、准确的方法 ,对治疗方法的选择、治疗方案的确定和预后评估亦具有重要意义。TACE、TACE PLI在肝癌的治疗中有较好的疗效 ,TACE PLI的疗效又较TACE为优