MALDI-TOF-MS技术对HBV耐药基因突变检测的价值

目的:探讨MALDI-TOF-MS技术对乙型肝炎病毒(HBV)耐药基因突变检测的价值.方法:依据HBV、HCV基因组多态性及基因突变现有研究结果,选择靶区域,筛选突变位点,MassARRAY Assay Design软件设计iPLEX引物,按iPLEX反应的操作说明进行PCR扩增、SAP反应、引物延伸、脱盐、点样,MALDI-TOF-MS采集、分析iPLEX反应物的数据,判读基因变异位点.收集本院抗病毒药物单药或多药耐药患者血清30份,将MALDI-TOF-MS技术判读基因变异位点进行DNA测序,将结果与MALDI-TOF-MS检测结果进行对比.结果:利用MALDI-TOF-MS技术一次性可检测30份血清样本的HBV基因突变,在30份样本中,5份检测结果不一致,其中2份是MALDI-TOF-MS技术未检测到的基因突变点,1份是2个检测位点不一致.结论:MALDI-TOF-MS技术具有灵敏度高、准确度高及分辨率高等特点,为生命科学等领域提供了一种强有力的分析测试手段.     

国内首株克雷米尤沙门菌的分离鉴定

2006年6月在江苏省海安县腹泻患者送检的粪便中，分离到一株血清型（6，8：e，h：1，6）克雷米尤沙门菌，该菌型在国内未见报道。现将鉴定结果报告如下。     

乙型肝炎病毒(HBV)耐药基因突变检测研究

目的 建立HBV基因分型、耐药变异以及前C区/BC P区突变检测技术,为乙型病毒性肝炎诊断及监测提供依据.方法 选取某院2010年1月～2011年1月收治的54例乙型病毒性肝炎患者的血清样本,利用MassARRAY Assay 和PCR技术对样本进行耐药基因检测.结果 ① 54例患者中B基因型28例(51.85％);C基因型22例(40.74％);B,C混合基因型2例(3.70％);无D基因型;B,C,D以外的其他基因型1例(1.85％).②54例患者中,37例对拉米夫定耐药,37例患者对拉米夫定耐药的患者中,突变基因型均为B和C基因型.突变基因型主要是180M型(56.76％),无207I型,而且突变基因多见于C基因型,比例为72.97％,高于B基因型(27.03％),比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 对拉米夫定耐药的患者中,HBV-DNA突变基因型主要是180M型,而且多见于C基因型,MassARRAYAssay技术可以准确检测HBV基因型及耐药基因突变位点,可以为临床诊断治疗提供依据.     

早期气管切开救治重症颅脑损伤患者的临床分析

目的探讨早期气管切开对救治重症颅脑损伤的临床意义。方法回顾性分析入院后和手术后共67例有适应症的病人早期施行气管切开术的临床效果。结果 67例重症颅脑损伤患者出院时按GCS分级评定：良好23例（40.3%）,中残6例（10.5%）,重残5例（8.8%）,植物生存3例（5.3%）,死亡20例（35.1%）。结论对重型颅脑损伤患者早期常规采用气管切开,保持呼吸道通畅,改善其呼吸功能,改善脑缺氧,减轻脑水肿,能降低患者致残率及死亡率。     

疏血通注射液对急性期脑出血的疗效观察

目的 观察疏血通注射液对急性期脑出血患者的临床疗效.方法 选取60例符合条件的急性期脑出血患者并按随机数字表法分为治疗组(30例)和对照组(30例).对照组采用常规治疗,治疗组在常规治疗基础上给予疏血通注射液6mL 1次/d静滴,连用15 d.入院第1天,治疗第7、15天行头颅CT检查测量血肿体积、血肿周围低密度容积的大小,应用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)进行神经功能缺损评分,同时监测两组患者血浆纤维蛋白原水平.结果 入院第1天,两组神经功能缺损评分、血肿体积、血肿周围低密度容积的大小、血浆纤维蛋白原水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).治疗第7、15天,治疗组神经功能缺损评分、血肿体积、血肿周围低密度容积的大小均明显低于对照组,比较差异有统计学意义(P＜0.05).治疗第7、15天,两组血浆纤维蛋白原水平比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 疏血通注射液能促进脑出血时的血肿吸收、血肿周围低密度区缩小和神经功能改善,不会引起血浆纤维蛋白原水平下降和血肿的扩大.     

盐酸伊立替康脂质体的制备及体外释药特性研究

目的:制备盐酸伊立替康脂质体并考察其体外释药特性。方法:采用硫酸铵梯度法,通过正交试验进行盐酸伊立替康脂质体处方筛选和制备工艺研究;采用透析法考察体外释放度。结果:制备的盐酸伊立替康脂质体包封率较高,达到75·4%;通过正交设计确定最佳处方为磷脂与胆固醇质量比为2:1,硫酸铵溶液浓度为0·20mol·mL-1,孵育温度为50℃,药脂比为1:10;脂质体中药物1h释放8·09%,9h释放64·2%。结论:制备的盐酸伊立替康脂质体具有较高包封率和缓释特性。     

miRNA-130a与乙型肝炎后肝癌患者临床特征的相关性及对HepG2细胞凋亡的影响

目的:研究miRNA-130a与乙型肝炎相关性肝癌(HBV-HCC)患者临床特征的相关性以及对HepG2细胞凋亡的影响。方法:选择60例HBV-HCC患者、30例对照者的miRNAs血清样品。应用RNA试剂盒对血清中的RNA进行提取和逆转录,应用实时定量PCR法对miRNA-130a进行定量。应用p-Genesil-NC和p-Genesil-miRNA-130a试剂对HepG2细胞进行转染,应用MTT法对各组细胞的增殖力进行检测;应用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡情况;应用Western blot法检测细胞凋亡蛋白Bcl-2的表达。结果:相对于对照者,HBV-HCC患者血清miRNA-130a的表达量升高(P<0.05);单用miRNA-130a时的曲线下面积(AUC)为0.858(95%CI:0.812～0.903),敏感性为83.5%,特异性为83.2%;单用AFP时的AUC为0.852(95%CI:0.801～0.902),敏感性为72.1%,特异性为93.6%;联合两个指标时的AUC为0.899(95%CI:0.846～0.952),敏感性为89.6%,特异性为96.4%。...     

硫酸铵梯度法制备伊立替康脂质体及稳定性研究

目的：制备盐酸伊立替康脂质体并考察提高脂质体稳定性的方法。方法：采用硫酸铵梯度法制备盐酸伊立替康脂质体。以粒径、外观、颜色、渗漏率作为指标，考察盐酸伊立替康脂质体的物理和化学稳定性。结果：硫酸铵梯度法制备的盐酸伊立替康脂质体呈圆球形，平均粒径为600nm，稳定性较好。结论：盐酸伊立替康脂质体不耐高温，将其制成冻干粉剂可显著提高药物稳定性。     

数字化成型钛网在颅骨修补中的应用

目的探讨应用数字化成型钛网进行颅骨修补的临床推广价值。方法通过薄层CT扫描,采用数字化三维成像技术,制作符合颅骨缺损形态的个体化钛网修补材料,对30例(31侧)颅骨缺损患者施行颅骨修补术。另一组20例,采用传统术中手工塑型修补。对比两组的手术时间、术中塑型时间、术后患者对外观的满意度及术后并发症等。结果应用数字化成型钛网进行颅骨修补与传统手工塑型颅骨修补相比平均手术时间明显缩短,平均手术塑型时间减少,患者满意度明显提高。结论应用数字化成型钛网进行颅骨修补具有操作简单、手术时间短、感染机会少等优点,具有很好的临床应用价值,值得在基层医院广泛开展。