骨髓间充质干细胞抑制再生障碍性贫血患者外周血T细胞增殖的实验研究

背景:既往研究发现骨髓间充质干细胞具有免疫抑制作用,而再生障碍性贫血患者存在T淋巴细胞异常活化及增殖。目的:体外分析骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者外周血T淋巴细胞增殖的抑制作用。方法:分离再生障碍性贫血患者外周血T淋巴细胞,行羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFDASE)荧光染色,与体外培养扩增的骨髓间充质干细胞按3︰1比例直接接触法及Transwell法共培养,加入植物血凝素(PHA)刺激T淋巴细胞增殖,并设阴性及阳性对照。流式细胞术检测各组T细胞增殖情况,评价骨髓间充质干细胞对T淋巴细胞增殖的影响。结果与结论:CFDASE染色分析显示,直接接触组T细胞增殖较阳性对照组明显减低(P<0.01);Transwell组T细胞增殖亦较阳性对照组减低(P<0.05);直接接触组T细胞增殖较Transwell组明显减低(P<0.01)。骨髓间充质干细胞可能通过直接接触及分泌某些细胞因子方式抑制再生障碍性贫血患者异常增殖的T细胞,以直接接触方式发挥主要作用。     

足三里穴位注射异丙嗪治疗血液系统肿瘤化疗后顽固性呕吐的疗效观察

目的 评估足三里穴位注射异丙嗪在血液系统肿瘤化疗后顽固性呃逆和(或)呕吐患者中的疗效.方法 血液系统肿瘤化疗期间常规甲氧氯普胺静脉注射预防呕吐的基础上仍发生顽固性呃逆和(或)呕吐的患者51例,按入组顺序随机分为两组,其中足三里注射组26例,出现顽固性呃逆和(或)呕吐后加用异丙嗪足三里穴位注射;对照组25例,出现顽固性恶...     

消臌汤治疗乙肝肝硬化腹水疗效观察

目的观察在常规西医治疗基础上加用验方消臌汤治疗乙肝肝硬化腹水的疗效。方法将乙肝肝硬化腹水患者43例随机分为2组:对照组21例采用常规西医治疗,治疗组22例在此基础上加用消臌汤,观察治疗前后2组腹水量和证候积分变化,比较2组疗效。结果治疗组腹水消退率为91%,总有效率为91%;对照组腹水消退率为67%,总有效率为62%,治疗组疗效优于对照组。结论在常规西医治疗的基础上加用验方消臌汤治疗乙肝肝硬化腹水疗效较佳。     

冉雪峰学术传承浅探

文章探讨了三峡名医冉雪峰的学术传承脉络,主要介绍了冉老的行医经历及其弟子的情况,并对收集到的学徒传承冉老学术经验的文献进行了初步整理。     

冉雪峰治疗眩晕的学术经验

著名中医冉雪峰（1879--1963）,重庆市巫山县黛溪乡人,曾行医于汉口、万县、重庆和北京,一生学验俱丰,与“近代中医第一人”张锡纯并称“南冉北张”。现从《冉雪峰医著全集》中所记载冉老治疗眩晕的医案来探讨其诊治眩晕的学术经验。     

钟益生治"血"验案

钟益生(1910-1995),早年毕业于四川万县中医学校,曾于重庆市中医训练所及国医内科讲习所学习,一面发奋读书,熟读中医经典及各家学说,一面拜陈逊斋、张简斋、吴棹仙、李复光、沈仲圭等近代名医为师,学业大进。1935年开业行医,为不少疑难重症患者解除疾苦。钟老曾参加了成都中     

心血瘀阻证微环境对骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的影响

目的 现察心血瘀阻证微环境(Heart-Blood Stagnation Svndrome Microenvirment)对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向心肌样细胞分化的影响.方法 采用全骨髓细胞体外培养技术分离大鼠MSCs,以流式细胞仪检测细胞表面标志;细胞培养基中加入心血瘀阻证大鼠坏死心肌组织和血清的方法 模拟心血瘀阻证微环境;四甲基偶氮唑盐(MTF)法观察心血瘀阻证微环境对MSCs增值率从而选择最大有效浓度;第4代MSCs进行体外心肌细胞诱导分化;相差显微镜、免疫组化及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)结果 鉴定心肌细胞.结果 大鼠MSCs细胞表面抗原CD11b和CD45阳性细胞率小于2%,CD90阳性率达到98%以上;疫细胞化学染色显示心血瘀阻证微环境组、5-aza组和健康大鼠微环境组中Desmin和MHC呈阳性,其中心血瘀阻证微环境组表达高于其他两组,差异有统计学意义(P＜0.05),空白对照组未见表达;RT-PCR结果 显示心血瘀阻证微环境组、5-aza组和健康大鼠微环境组细胞肌钙蛋白(cTnI)和心脏早发育基因GATA-4 mRNA表达水平高于空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),心血瘀阻证微环境组显著高于5-aza组和健康大鼠微环境组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 体外模拟大鼠心血瘀阻证微环境能诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞.     

氯甲基苯甲酰氨标记骨髓间充质干细胞在免疫介导骨髓衰竭小鼠模型体内的归巢

背景：再生障碍性贫血是T淋巴细胞免疫亢进破坏造血干祖细胞的一种异常免疫反应性疾病。骨髓间充质干细胞具有支持造血功能同时具有免疫调控作用。 目的：观察骨髓间充质干细胞移植骨髓衰竭模型小鼠体内的归巢情况。 方法：将BALB/c小鼠随机分成正常对照组、骨髓衰竭模型组和骨髓间充质干细胞移植组,于第6天将已标记氯甲基苯甲酰氨的BALB/c小鼠骨髓间充质干细胞经尾静脉注射途径移植给骨髓衰竭模型小鼠,采用流式细胞术和组织学荧光显微镜观察标记细胞在不同组织的动态分布。造模第14 天,观察各组小鼠的平均生存时间、外周血血象和骨髓形态学特征。 结果与结论：骨髓间充质干细胞经尾静脉输注后24 h在受体小鼠骨髓中可发现氯甲基苯甲酰氨阳性标记细胞,72 h时阳性标记细胞数量增多(P < 0.05)。骨髓间充质干细胞移植组小鼠濒死或处死前的白细胞、血红蛋白、血小板、骨髓单个核细胞数与模型组小鼠濒死时相比显著升高(P < 0.01)。骨髓衰竭模型组比骨髓间充质干细胞移植组平均生存时间短(P < 0.05)。结果证实,骨髓间充质干细胞输入骨髓衰竭模型体内能归巢至骨髓,促进造血恢复,减轻骨髓衰竭程度,显著延长生存时间。       

荧光定量聚合酶链反应检测GATA-1、GATA-2、过氧化物酶体增殖物激活受体γ和干细胞因子基因在再生障碍性贫血患者及正常人骨髓间充质干细胞中的表达

背景：GATA-1、GATA-2、过氧化物酶体增殖物激活受体γ和干细胞因子基因在骨髓造血及成脂调控机制中起重要作用。 目的：观察GATA-1、GATA-2、过氧化物酶体增殖物激活受体γ和干细胞因子基因在再生障碍性贫血患者及正常人间充质干细胞中的表达。 方法：收集6例再生障碍性贫血患者及6位正常人骨髓液各10 mL,Ficoll贴壁法分离培养骨髓单个核细胞,达70%~80%融合后扩增传代。取传至第3代的间充质干细胞,应用流式细胞仪进行鉴定。提取总RNA,比较各组基因与内参基因之间的差别。荧光定量聚合酶链反应检测GATA-1、GATA-2、过氧化物酶体增殖物激活受体γ和干细胞因子基因在再生障碍性贫血患者及正常人间充质干细胞中的表达量。 结果与结论：与正常人间充质干细胞相比,再生障碍性贫血患者间充质干细胞的GATA-2和干细胞因子基因表达量降低(P=0.012,0.039),过氧化物酶体增殖物激活受体γ基因表达量升高(P=0.035);两组GATA-1基因表达量差异无显著性意义。提示GATA-2、干细胞因子基因的异常表达可能影响AA患者骨髓微环境的造血调控作用;过氧化物酶体增殖物激活受体γ基因的异常表达可能解释再生障碍性贫血患者骨髓易成脂的原因。     

从"微环境"的角度谈微观辨证

微观辨证正式提出已20余年,但至今尚未找到证的特异性指标,认为应当从"微环境"的角度出发,借鉴"黑箱"理论,用循证医学的方法 ,加强证候的病理生理学及中药复方(治则治法)物质基础与作用机制的研究.这样才能动态联系地研究微观物质的变化,更符合中医整体观念、辨证论治的特点.