犬全髋关节置换模型的构建

背景：在众多全髋关节置换动物模型中,犬因其与人类的高度相似性及易于管理、饲养的特点而倍受青睐。 目的：在德国牧羊犬上建立并评价金属对金属全髋关节置换模型。 方法：德国牧羊犬随机分为空白对照组,骨水泥固定组,生物固定组。空白对照组仅行手术入路操作,后两组分别行骨水泥固定与生物固定全髋关节置换。分别于术后即刻、3,6,12个月X射线观察植入物形态。 结果与结论：空白对照组动物术后恢复好。骨水泥固定组中2只动物发生股骨骨折,继发伤口感染;2只动物置换后假体周围感染;1只动物骨水泥由臼底渗入盆腔。生物固定组中3只动物发生伤口及假体周围感染;1只术后反复发生脱位。其余实验组动物术后恢复好,步态基本正常,术后即刻、3,6,9及12个月X射线片示假体位置良好。实验组手术并发症发生率9%(2/22),总感染率32%(7/22)。说明犬全髋关节置换模型是一个稳定的,成功率较高,可重复的动物模型。     

13位数药品编码的形成与应用

目的：建立适用于医院的药品编码体系。方法：采用C／S模式，应用SQL Server数据库管理系统和VB等开发工具。结果：开发和应用了13位数的药品编码信息系统。结论：该系统为医院药品管理发挥了重要作用，并且需要进一步完善。     

强直性脊柱炎髋关节韧带组织培养模型的建立及腺病毒转染的实验研究

背景:强直性脊柱炎(AS)是一种与炎症紧密相关但病因尚未完全阐明的慢性进行性结缔组织疾病。目的:本研究拟通过构建和比较AS韧带组织体外原位(in situ)、2D细胞贴壁体外(in vitro)及3D水凝胶体外培养模型,旨在探索更适合模拟AS韧带体外的培养模型。方法:AS髋关节韧带组织取自我科4例重度AS拟行髋关节置换的患者,平均年龄(44.0±4.1)岁。髋关节组织块常规消化获得单细胞,并行倒置相差显微镜观察和抗vimentin免疫荧光染色(IFC)鉴定检查。对上述髋关节韧带组织与成纤维细胞分别行组织块原位、体外2D贴壁和3D海藻酸盐水凝胶法培养,重组腺病毒(rAd)5-lacZ转染上述标本14 d后,分别采用大体观察、HE染色、Hoechst 33258实验、X-gal染色、抗β-gal免疫组织化学染色和酶联免疫吸附实验(ELISA)等对细胞形态与增殖能力、病毒转染效率和致炎性细胞因子表达等进行检测。结果:第2代AS髋关节韧带细胞抗vimentin IFC检测均出现明显的红色荧光,结果阳性,表明分离培养的细胞为成纤维细胞。rAd5-lacZ转染上述3种模型14 d后,倒置相差显微镜下观察HE染色后的细胞形态并计数单位面积下的细胞数、Hoechst 33258检测细胞DNA含量和ELISA法检测细胞分泌功能提示,3种模型中以2D平面的细胞增殖效率和致炎性细胞因子分泌能力最强(F=12.21、14.91、282.67、350.18,P<0.05或0.01)、但细胞"去分化"现象亦最明显,而AS韧带组织原位培养和成纤维细胞3D海藻酸盐水凝胶培养条件下的细胞增殖效率和致炎性细胞因子表达能力相似(t=1.37、0.71、1.44、1.83,P>0.05),细胞形态前后无明显变化。抗β-gal免疫组织化学染色并计数阳性细胞数/光镜下的总细胞数得出rAd-lacZ转染3种模型效率相似,分别为65.84%、72.26%和75.39%(F=0.873,P>0.05)。结论:韧带组织原位培养和成纤维细胞3D水凝胶培养能更好地模拟AS韧带成纤维细胞体内生存环境,且rAd5-lacZ能在一定时间内有效转染以上模型。本实验结果为建立有效的AS韧带体外培养及基因修饰模型提供实验基础。     

过表达CKLF1基因对强直性脊柱炎滑膜成纤维细胞增殖及成骨转化影响的实验研究

目的探索趋化素样因子1 (chemokine-like factor1,CKLF1)对强直性脊柱炎(ankylosingspondyliti,AS)髋关节滑膜成纤维细胞增殖和成骨转化的影响。方法对照组和AS髋关节滑膜组织分别取自我科4例股骨颈骨折和3例重度AS拟行髋关节置换患者。滑膜组织经常规消化后获得单个细胞,并在倒置相差显微镜下进行观察和抗vimentin免疫荧光染色(immunofluorescence,IFC)检测。对上述髋关节滑膜组织及成纤维细胞分别行原位和体外培养,重组腺相关病毒(rAAV)-lacZ、rAAV-hCKLF1转染后21天收集标本。分别采用ELISA、IFC和荧光定量RT-PCR检测细胞增殖、致炎性细胞因子分泌、成骨分化的关键靶基因CKLF1及CCR4的表达。结果第3代正常和AS细胞抗vimentin IFC检测均为阳性,表明分离培养的细胞为成纤维细胞。rAAV-hCKLF1转染后21天,HE染色并计数单位面积下的细胞数、水溶性四氮唑法(WST-1)检测细胞增殖能力和Hoechst 33258检测细胞DNA含量均显示,CKLF1转染促进细胞增殖,且与无病毒转染组、lacZ组相比,差异有统计学意义(P=0.0000,P=0.0260,P=0.0020);正常和AS髋关节滑膜组织及成纤维细胞分泌的致炎性细胞因子(IL-6和TNF-α),均明显升高,且与无病毒转染组、lacZ组相比,差异有统计学意义(P=0.0060、P=0.0020);CKLF1尚能促进AS成纤维细胞表达特异性骨细胞外基质蛋白(OCN和OPN)表达;荧光定量RT-PCR与上述检测结果一致。结论过表达CKLF1促进AS髋关节滑膜成纤维细胞增殖和致炎性细胞因子分泌,增强成骨转化相关靶基因的转录,CKLF1可能在AS关节病理性骨化过程中发挥重要作用。     

股四头肌V-Y成形技术在僵直或强直膝TKA术中的应用

目的 探讨僵直或强直膝全膝关节置换术(TKA)中采用股四头肌V-Y成形技术改善膝关节活动度的可行性及有效性.方法 回顾性分析自2014年4月至2018年4月宁德师范学院附属宁德市医院采用TKA治疗11例(13膝)僵直或强直膝患者资料,术中采用股四头肌V-Y成形技术,比较分析手术前后膝关节HSS评分和关节活动度变化.结果...     

髋膝关节置换术病人围手术期标准化操作流程探讨

参考相关文献资料,结合关节病诊疗临床经验,针对围手术期安全管理薄弱环节,制定髋膝关节置换病人围手术期安全管理标准化操作流程。包括术前检查流程,规范的手术情况告知,避免手术部位错误,植入性器材的临床使用,感染控制,术后康复治疗流程,术后诊疗及出院复查流程,合理安全用药等。     

骨关节炎流行病学的研究进展

骨关节炎(osteoarthritis,OA)又称退行性骨关节病,是最常见的关节疾病,尤其危害老年人健康,并给社会带来沉重负担.65岁以上人群中放射学OA的患病率可达50%以上,而在75岁以上人群中,这一数值可达到80%左右.美国的调查数据显示,OA是导致50岁以上男性丧失工作能力的第2号杀手--仅次于心血管疾病[1].随着世界及我国社会人口老龄化的加速,OA已越来越成为医患乃至社会关注的焦点话题.本文将对骨关节炎的定义、患病率情况及导致骨关节炎发生和进展的危险因素进行综述.     

关节退变情况及其与膝关节疼痛的相关性研究

目的探讨中老年膝关节疼痛患者膝关节内的病变特点及其临床意义。方法2012年1月至2012年12月间年龄〉40岁患者膝关节镜检查证实具有Ⅳ度软骨退变性损伤的病例纳入前瞻性序贯研究,剔除重度滑膜炎需做滑膜切除的病例;术前记录性别、年龄、侧别、体质量指数（BMI）和Lysholm评分;术中记录Ⅳ度软骨退变性损伤累及的关节面部位,是否存在内外侧半月板退变性损伤、是否存在游离体、是否存在陈旧性前后交叉韧带断裂。对全部数据进行统计学分析,P〈0．05为差异有统计学意义。结果共161例纳入研究,男31例,女130例;年龄（62．98±7．93）岁,BMI（26．39±3．41）kg／m。,术前Lysholm评分（45．34±15．65）分。关节间室至少一侧关节面有Ⅳ度软骨退变性损伤：髌股间室88．8％、内侧间室57．8％、外侧间室24．8％;内侧半月板退变性损伤70．8％;外侧半月板退变性损伤25．5％;关节游离体47．8％;陈旧性前交叉韧带断裂3．7％;陈旧性后交叉韧带断裂0．6％。术前Lysholm评分与性别（P=0．006）、年龄（P=0．040）、股骨内髁Ⅳ度软骨退变性损伤（P=0．032）统计学相关;BMI与内侧半月板退变性损伤（P=0．002,r=0．246）、股骨内髁Ⅳ度软骨退变性损伤（P=0．004,r=0．223）存在统计学相关性。结论在与退变有关的膝关节疼痛病例中,髌股间室软骨退变性损伤是较多见的病变,陈旧性前后交叉韧带断裂是较少见的病变。除了软骨退变性损伤之外,内侧半月板退变性损伤可能是疼痛显著的另一重要因素。女性、年龄较高者和股骨内髁发生Ⅳ度软骨退变性损伤者术前评分较低,症状更显著。BMI较高者内侧半月板和股骨内髁Ⅳ度软骨退变性损伤发生率较高。     

固醇调节元件结合蛋白-2在软骨细胞退变过程中的表达及意义

目的 比较固醇调节元件结合蛋白-2(SREBP-2)在正常软骨、骨关节炎(OA)软骨中表达,探讨SREBP-2在软骨退变过程中的表达变化.方法 正常软骨、OA膝关节软骨组织行番红素O染色、Mankin评分和抗SREBP-2免疫组化染色;正常软骨细胞随机分为对照组和白细胞介素(IL)-1β刺激组,四氮唑法(WST-1)法检测其增殖活力,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测目的基因SREBP-2、SREBPs裂解激活蛋白(SCAP)、蛋白聚糖(aggrecan)和Ⅱ型胶原(collagenⅡ)mRNA表达.结果 番红素O染色显示OA软骨组织表层粗糙,层次紊乱,染色变淡.OA组Mankin评分高于正常组(P＜0.01).正常软骨抗SREBP-2免疫组化染色为阴性,而OA组为阳性.正常P2代软骨细胞collagenⅡ染色阳性、抗SREBP-2染色阴性;而经IL-1β刺激后X型胶原和SREBP-2染色阳性.WST-1检测IL-1β刺激组吸光度A值较对照组明显降低(P＜0.05).PCR结果表明,各IL-1β组SREBP-2与SCAP mRNA的表达量均高于空白对照组,且随时间延长而升高,其中24 h组为(2.115±0.671)、(1.767 ±0.711);48 h组为(2.367±0.530)、(2.910±0.398);72 h组为(3.184 ±0.224)、(2.830±0.512) (P ＜0.05),差异均有统计学意义.相反,各组中aggrecan、collagenⅡmRNA表达量随时间延长而降低,24 h组为(0.812±0.467)、(0.784±0.774);48 h组为(0.529±0.439)、(0.626±1.100);72 h组为(0.336±0.563)、(0.175±0.834) (P ＜0.05),差异均具有统计学意义.结论 IL-1β能抑制正常软骨细胞增殖和软骨细胞基质成分的表达,并诱导其出现退行性改变.在诱导退变的过程中,SREBP-2的表达与软骨关键基因的表达呈负向变化关系.