实时荧光定量PCR检测耐药结核分枝杆菌中耐药相关基因whiB7的表达

目的探讨结核分枝杆菌耐药性与whiB7基因表达水平之间的关系。方法以耐受利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇和氟喹诺酮的结核分枝杆菌临床分离株为研究对象,利用实时定量PCR的方法,检测药物刺激结核分枝杆菌后whiB7基因表达水平的变化。结果除利福平刺激相应的菌株后,whiB7基因的表达水平变化不明显外,其余药物的刺激均会引起结核分枝杆菌耐药株的whiB7基因表达水平发生显著变化。结论结核分枝杆菌的whiB7基因是对多种抗生素刺激发生反应的基因,推测whiB7的表达参与结核分枝杆菌的耐药过程。     

DNA固定技术对结核分枝杆菌PCR产物杂交结果影响的研究

目的 比较各种DNA 固定方法对结核分枝杆菌PCR 产物杂交结果的影响?方法 选取结核分枝杆菌PCR 扩增产物并点于尼龙膜上,用紫外线?加热和碱液三种方法固定DNA,然后以PCR 产物作探针用增强化学发光标记试剂进行标记,并对三种不同方法固定的PCR 产物杂交分析?结果 结核分枝杆菌DNA固定方法对PCR 扩增产物的检测结果具有较大的影响,碱液固定具有较好的敏感性和重复性?结论 各地结核分枝杆菌PCR 实验室可考虑用碱液法对PCR 产物固定进而进行杂交分析。     

翼点入路显微手术切除巨大复杂颅咽管瘤8例

目的探讨鞍区5个间隙在巨大复杂颅咽管瘤全切手术中的意义。方法在手术显微镜下经翼点人路鞍区5个解剖间隙切除鞍区肿瘤8例,术中注意保护肿瘤周围的视神经、颈内动脉及发出的垂体上动脉。结果8例鞍区肿瘤,全切除7例(87.5%),大部切除1例,复发1例(12.5%)。结论翼点人路行鞍区肿瘤的显微手术中,熟练掌握鞍区5个解剖间隙及垂体血供的显微解剖,是提高全切率、降低死亡及复发率的关键。     

北京基因型结核分枝杆菌中心菌株的筛选

背景结核分枝杆菌北京基因型(Beijing Genotype)是结核分枝杆菌中一个遗传关系接近的分支(clade)。在中国北京基因型的流行程度为64．9%。在全球广为流行且与耐药存在一定的联系。一些文献报道,北京基因型结核分枝杆菌有较     

不同温度下应用荧光染色法检测抗酸杆菌的研究

荧光染色法检测抗酸杆菌是结核病实验室诊断的重要方法之一，我们对此进行了改进。本研究应用双盲法比较３７℃和室温下荧光染色法对抗酸杆菌检出率的影响，选取１１７例住院结核病人痰标本涂片染色镜检并培养，结果发现３７℃染色时涂片阳性率为６２．４％，而室温染阳性率分别为３９．３％，３７℃染色明显提高了是性检出率，实验同时发现培养阳性率仅为１６．２％，明显低于涂片镜检，特别是３７℃染色镜检的阳性率，涂（＋）培（     

分枝杆菌中原核类泛素蛋白化靶蛋白的功能分析

分枝杆菌中存在一种类似真核生物泛素的小分子蛋白,称为原核类泛素蛋白（prokaryotic ubiquitinlike protein,Pup）,蛋白被Pup共价标记后,或被蛋白酶体降解或参与修饰后的调节作用,可影响细菌活动的各个环节.结核分枝杆菌中目前发现可被Pup标记的共有58种蛋白;耻垢分枝杆菌被标记了41种蛋白,其中38种都可以在结核分枝杆菌中找到同源蛋白.这些标记后的靶蛋白涉及了至少6种机制和功能,包括分枝杆菌的毒力、信号通路、脂类的合成、细胞壁和（或）膜的合成、中间代谢,等等.其中大部分蛋白被标记后经由蛋白酶体降解,也有被Pup标记的蛋白参与信号传导和调控作用;通过对这些靶蛋白的比较分析,能够对结核分枝杆菌的耐药和致病机制提供进一步的解释,同时这些Pup标记的蛋白也可以作为潜在的药物靶点,对其的分析研究可为结核病的治疗和控制提供理论基础.     

卡介菌多糖核酸免疫治疗结核病小鼠的实验研究

目的 观察卡介菌多糖核酸（BCG-PSN）对结核分枝杆菌感染小鼠的免疫保护作用及其免疫学机制。方法 将BALB／c小鼠48只随机分成BCG—PSN免疫治疗组和结核菌感染对照组,每组24只。两组小鼠制成结核分枝杆菌感染模型。感染后1周,每天分别腹腔内注射BCG—PSN（10mg／kg）或生理盐水（10mL／kg）,连续7d。感染后3周和4周每组处死12只小鼠,检测小鼠体重以及肺、脾脏湿重,观察肺脏病理改变,取肺、脾组织进行结核菌培养和菌落计数,用real—time PCR法测定肺、脾组织IFN-γmRNA、IL-10mRNA和IL-4mRNA的表达。结果 感染后4周,治疗组小鼠体重和脾脏重量高于对照组,肺脏重量低于对照组,且肺部病变较轻。感染后3周和4周,治疗组小鼠肺、脾组织结核菌落均低于对照组,小鼠肺组织IFN-γmRNA表达与对照组无差别,IL-10mRNA和IL-4mRNA的表达低于对照组。感染后3周,治疗组小鼠脾组织IFN-γmRNA表达与对照组相似;感染后4周,脾组织治疗组脾组织IFN-γmRNA的表达高于对照组。感染后3周和4周,IL-10mRNA和IL-4mRNA的表达低于对照组。结论 BCG—PSN可减轻结核病小鼠体重下降,减少结核病小鼠肺和脾脏结核菌数量,并增强Th1型免疫反应。     

应用硝酸盐还原试验快速检测结核分支杆菌耐药性的研究

目的 建立一种快速结核分支杆菌耐药性试验方法。方法 以绝对浓度法为“金标准”，对已知耐药的结核分支杆菌菌株及敏感株采用硝酸盐还原试验(NRA)检测其耐药性。结果 两种方法可比性好，与绝对浓度法比较，硝酸盐还原试验敏感性为96.5％以上，特异性100％；NRA法比绝对浓度法平均提前3周出结果。结论 硝酸盐还原试验可作为一种快速结核分支杆菌耐药性试验方法。     

结核分支杆菌感染巨噬细胞后氮氧化物的产生及细胞因子表达的研究

目的 探讨巨噬细胞在感染结核分支杆菌后氮氧化物（NO）的产生和细胞因子表达的差异，了解结核感染的免疫应答过程，探讨死菌苗作为新的结核候选苗的可行性。方法 用ELISA和RT－PCR方法比较研究巨噬细胞在感染结核分支杆菌后NO的产生和细胞因子表达的差异。结果 （1）活的结核分支杆菌H37Rv能显著诱导巨噬细胞产生NO，IL－1，IL－12，IL－18，TNF－α以及iNOS的表达。（2）细菌数对NO的产生和细胞因子的表达也有很大的影响。结论 活的结核分支杆菌H37Rv能显著诱导巨噬细胞产生NO和细胞因子，而产生有利于宿主的免疫应答。同样量的死结核分支杆菌H37Rv不能显著诱导巨噬细胞产生NO和细胞因子，不宜作为新的结核候选疫苗。     

实时荧光定量PCR检测耐药结核分枝杆菌中耐药相关基因whiB7的表达

目的探讨结核分枝杆菌耐药性与whiB7基因表达水平之间的关系。方法以耐受利福平、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇和氟喹诺酮的结核分枝杆菌临床分离株为研究对象。利用实时定量PCR的方法．检测药物刺激结核分枝杆菌后whiB7基因表达水平的变化。结果除利福平刺激相应的菌株后。whiB7基因的表达水平变化不明显外．其余药物的刺激均会引起结核分枝杆菌耐约株的whiB7基因表达水平发生显著变化。结论结核分枝杆菌的whiB7基因是对多种抗生素刺激发生反应的基因。推测whiB7的表达参与结核分枝杆菌的耐药过程。