骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠慢性胰腺炎及效果评价

目的建立骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植治疗大鼠慢性胰腺炎（CP）的方法,评价其治疗效果。方法体外培养、扩增大鼠BMSCs;应用带有增强型绿色荧光蛋白的35型非增殖型腺病毒（Ad5F35-EGFP）转染大鼠BMSCs;采用胆胰管逆行注射油酸法制备Wistar大鼠CP模型,造模成功后经尾静脉注射进行3次标有GFP荧光的BMSCs移植治疗。治疗结束后取胰腺组织行病理组织学检查;并采用胶原酶消化法制备胰腺组织细胞悬液,采用流式细胞术检测该细胞悬液中标记有GFP荧光的细胞比例;并检测胰腺组织结缔组织生长因子（CTGF）、转化生长因子β（TGF-β）、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原含量及髓过氧化物酶（MPO）活性。结果经标记有GFP荧光蛋白BMSCs治疗的CP大鼠胰腺病变程度、纤维化程度显著减轻;流式细胞术检测结果显示胰腺细胞悬液中GFP阳性细胞比例显著升高;胰腺组织CTGF、TGF-β、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原含量及MPO活性显著降低。结论BMSCs对CP大鼠胰腺损伤有显著的修复作用,其机制可能与其定植于受损胰腺、通过自分泌或旁分泌作用、抑制炎症反应、减少胶原增生有关。     

受强力霉素调控表达的人肝癌HepG2细胞系的建立

目的建立受强力霉素 (doxycycline)调控表达的人肝癌HepG2细胞系。 方法用阳离子脂质体lipofectamine 2 0 0 0 0将pTet on质粒转染人肝癌HepG2细胞 ,通过G4 18筛选得到稳定转染的抗性克隆 ;将抗性克隆细胞分别培养扩增 ,通过 pTRE luc质粒瞬时转染 ,加入终浓度为 1μg/ml的doxycycline诱导剂培养 4 8h后 ,逐一检测每个细胞株的荧光素酶表达活性。 结果第 6号克隆的细胞诱导后荧光素酶的表达活性为 16 76 4 ,而非诱导状态下该细胞株的背景活性为 87,诱导后的活性增加 192倍。结论HepG2 /Tet on细胞株是可调控基因表达的人肝癌细胞株 ,为研究肝癌的发病和基因治疗提供了较为理想的研究工具。     

肝癌组织中乙肝病毒x蛋白与缺氧诱导因子-1α的相关性

目的　探讨乙型肝炎病毒x蛋白 (HBx)与缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)在肝癌组织中表达的相关性及其在肝癌的发生和发展中的作用。方法　采用免疫组织化学染色方法检测 14 1例福马林固定、石蜡包埋的原发性肝癌组织标本HBx和HIF 1α表达 ;用Lipofectamine2 0 0 0将 pHA HBx质粒转染HepG2细胞 ,G418筛选阳性克隆 ,逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测转染后细胞HBx基因和HIF 1α基因转录 ;免疫细胞化学染色检测转染细胞HIF 1α表达。结果　 14 1例肝癌组织标本中 ,HBx和HIF 1α免疫组织化学染色阳性者分别为 98例和 116例 ;转染HBx基因后的HepG2细胞RT PCR结果表明 ,HIF 1α基因呈阳性表达 ,而未转染细胞则为阴性 ;免疫细胞化学染色显示 ,转染后的细胞 75 %HIF 1α表达阳性 ,未转染细胞几乎未见阳性细胞。结论　肝癌组织中HBx与HIF 1α的表达明显相关 (P <0 .0 1) ,HBx可以明显上调肝癌组织中HIF 1α的表达 ,两者的共同表达对原发性肝癌细胞的生物学行为可能有重要影响。     

骨髓间充质干细胞移植修复大鼠慢性胰腺损伤

背景:慢性胰腺炎是以胰腺慢性炎症损伤及纤维化为主要病理特征的慢性进展性疾病,骨髓间充质干细胞可能在其治疗中具有潜在价值,但目前这一领域的研究尚不多见.目的:观察骨髓间充质干细胞对慢性胰腺炎大鼠胰腺损伤的修复作用并探讨其治疗机制.方法:体外培养、扩增大鼠骨髓间充质干细胞并对其进行鉴定;采用胆胰管逆行注射油酸法制备Wistar大鼠慢性胰腺炎模型,随机数字表法分为假手术组、模型组、间充质干细胞治疗组.间充质干细胞治疗组造模后20 d经尾静脉注射间充质干细胞生理盐水细胞悬液1 mL(含细胞3×106),第40天和第60天各重复1次;模型组经尾静脉注射等体积生理盐水;假手术组不进行十二指肠穿刺及胆胰管逆行注射,其余操作同模型组.3组动物均于治疗结束后取胰腺组织行病理组织学检查;并检测胰腺组织内结缔组织生长因子、转化生长因子β、Ⅰ、Ⅲ型胶原水平及髓过氧化物酶活性.结果与结论:经间充质干细胞治疗的慢性胰腺炎大鼠胰腺病变程度及纤维化程度显著减轻;胰腺组织内结缔组织生长因子、转化生长因子β、Ⅰ、Ⅲ型胶原水平及髓过氧化物酶活性显著降低(P < 0.01).提示骨髓间充质干细胞对慢性胰腺炎大鼠胰腺损伤有显著的修复作用,其机制可能和抑制结缔组织生长因子、转化生长因子β产生、抑制炎症反应、减少胶原增生有关.     

非功能胰岛细胞瘤23例临床分析

非功能胰岛细胞瘤临床少见 ,占胰岛细胞瘤的 1 5 %～ 41 % 〔1〕。 1 980～ 1 999年 ,我们收治该病患者 2 3例 ,占同期胰岛细胞瘤患者的2 7%。现分析报告如下。1　临床资料本组 2 3例 ,男性 7例 ,女性 1 6例 ;年龄 8～ 6 0岁 ,平均 2 9.5岁。就诊原因为上腹包块1 4例 ,上腹包块伴腹胀、纳差 7例 ,左上腹疼痛向背部放射 2例。肿块直径 2 .5～ 2 5 cm。3例伴有轻度贫血 ,Hb分别为 93g/L、96 g/L、1 0 0 g/L。 8例查 AFP及 CEA均阴性。全部病例血糖检查均正常。 2 0例行 B超检查 ,其中 8例显示胰腺部位实质性低回声团块 ;1 2例显示肿块内…     

胰腺癌肿瘤干细胞研究进展

胰腺癌是一种预后极差的恶性肿瘤,即使是临床诊断为早期,其术后5年生存率也异常低。据统计,美国2007年共诊断胰腺癌33370例,无论采取了何种治疗措施,大多数患者在发病第1年内死亡。有学者称,胰腺癌的年发病率就等于其年死亡率。因此,胰腺癌一直是医学界的研究重点。近些年来,针对胰腺癌发病机制的研究主要集中在其基因和蛋白表达特征方面,虽取得了一些进展,但并未揭示胰腺癌发生机制的实质,因此对临床治疗没有起到多大的指导作用。     

活血承气合剂对小肠缺血-再灌注家兔血清二胺氧化酶的影响

[目的]以血清二胺氧化酶(DiamineOxidase,DAO)作为判断小肠损伤程度的指标 ,通过制作实验性家兔小肠缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)模型 ,评价血清DAO诊断小肠损伤的可靠性和有效性 ,并依此指导治疗 ,探讨应用中西医结合方法防治小肠缺血再灌注损伤的效果。[方法]采用肠系膜上动脉夹闭方法制作I/R模型 ,将家兔随机分为假手术组 ,生理盐水对照组 ,活血承气合剂中药组 ,乳果糖组 ,每组再分为缺血60min、再灌注60min、再灌注120min3个时间点 ,每组6只动物 ,取血检测血清二胺氧化酶活性。[结果]小肠缺血后血清DAO升高 ,于再灌注120min最高(P<0.05);应用活血承气合剂和乳果糖后血清DAO值升高则不明显 ;应用活血承气合剂组血清DAO水平明显低于生理盐水对照组(P<0.05);再灌注120min时 ,活血承气合剂组血清DAO显著低于乳果糖组(P<0.05)。[结论]小肠缺血再灌注损伤后血清DAO水平明显升高 ;应用中药活血承气合剂治疗可以显著降低血清DAO水平 ,改善缺血再灌注小肠的功能     

大承气汤介导肝脏、胆汁、血浆灭活内毒素的实验研究

以鲎试剂定量测定法进行的体内、外实验证实：去芒硝大承气汤、胆盐对ＬＰＳ有直接灭活效应；正常大鼠经口投予大承气汤（ＤＴ）后，其血浆对外加ＬＰＳ灭活能力增强；经口投予ＤＴ于肠源性内毒素血症（ＥＥＴＭ）模型大鼠后，肝组织血流量（ｍｌ／１００ｇ／ｍｉｎ）和肝胆汁流率增加，其肝胆汁对外加ＬＰＳ的灭活能力增强。     

乳腺导管扩张症的诊治(附18例报告)

乳腺导管扩张症在临床上并非少见,但因其临床表现多样,故易误诊误治。1986～1996年,我院共收治该病患者18例,均经病理证实。现结合文献将其诊治方法介绍如下。1　临床资料本组18例均为女性;年龄25～58岁,平均38.5岁;其中30～39岁9例,占50%。病程10天至5年,平均11个月。17例以乳房肿块为首发表现,肿块直径为1.5～10cm,呈圆形、椭圆形或索条状,均位于乳晕周围;14例肿块部位有触痛;12例肿块与皮肤有粘连伴肿块表面皮肤桔皮样变。1例以血性乳头溢液为首发表现。8例同侧腋窝触及肿大淋巴结。术前诊断为乳腺癌12例,乳腺肿块性质待查5例,导管内乳头…     

糖尿病高渗性非酮症性昏迷的重症监护与治疗

目的 探讨糖尿病高渗性非酮症性昏迷(HONK)的重症监护与治疗措施.方法 总结我科2000年11月～2005年11月收住抢救45例糖尿病非酮症高渗性昏迷患者的治疗措施和疗效,年龄26岁～80岁.结果 存活28例,死亡17例.结论 严密监测血糖及病情变化,提高诊断准确率,及时正确的综合性治疗能有效降低病死率.