体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成及结缔组织生长因子的表达

目的　探讨结缔组织生长因子在人增生性瘢痕发病机制中的作用。方法　体外培养人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞 ,通过H3 脯氨酸掺入法检测细胞胶原合成 ,通过免疫细胞化学染色和逆转录聚合酶链反应检测细胞结缔组织生长因子蛋白质和mRNA的表达。结果　和正常皮肤成纤维细胞相比 ,增生性瘢痕成纤维细胞的胶原合成和结缔组织生长因子蛋白质及mRNA的表达均显著增高 (P <0 0 1)。结论　结缔组织生长因子可能在增生性瘢痕纤维化过程中发挥重要促进作用。     

SFRP2基因重组腺病毒载体的构建与鉴定

目的:成功构建携带SFRP2基因的腺病毒载体。方法:从pGBKT-SFRP2质粒中扩增SFRP2基因,将SFRP2基因亚克隆至质粒穿梭载体pAd-Track-CMV。用脂质体转染法将重组腺病毒pAd-Track-PPARγ2-CMV和pAdEasy-1共转染293细胞,成功构建的重组腺病毒Ad-SFRP2,确定转染效率。原代培养增生性瘢痕成纤维细胞,利用Ad-SFRP2感染该细胞。通过RT-PCR和Western Blot分别检测感染后人瘢痕成纤维细胞及对照组细胞中SFRP2基因mRNA和蛋白表达水平。结果:RT-PCR检测结果显示腺病毒Ad-SFRP2的PCR产物约为904bp,SFRP2 mRNA表达水平明显增高;用抗SFRP2多克隆抗体进行Westernblot检测为阳性,感染的重组腺病毒载体在人瘢痕成纤维细胞中SFRP2蛋白有较高的稳定表达。结论:成功构建含有人SFRP2基因的重组腺病毒Ad-SFRP2;它可有效提高人增生性瘢痕成纤维细胞中SFRP2基因的表达水平。     

会阴部瘢痕挛缩畸形45例整复治疗

目的　讨论、总结会阴部瘢痕挛缩畸形整复治疗的经验。方法　我科自 1989年以来对 4 5例会阴部瘢痕挛缩畸形患者进行了整复治疗。术前强调肠道清洁和局部瘢痕清洗 ;术中根据瘢痕挛缩畸形的具体情况 ,联合采用局部皮瓣及中厚皮片移植 31例 ,全厚皮片移植 8例 ,单纯用局部皮瓣移植 6例 ;术后注意保持创面的清洁干燥和进行及时有效的功能锻炼。结果　患者在接受整复治疗后形态、功能均获得良好恢复 ,总优良率达 95 .5 %。结论　根据会阴部瘢痕挛缩畸形的特殊性 ,重视术前准备及术后处理 ,合理设计、选择手术方法 ,才能够获得满意的治疗效果     

同种异体大鼠外耳郭移植组织学改变的实验研究

目的　研究同种异体大鼠外耳郭移植后组织形态学改变及免疫细胞的浸润情况。方法　将动物分为自体、异体移植组。自体移植组以SD大鼠兼职供体与受体 ,进行自体移植 ;异体移植组以SD大鼠为供体 ,WISTAR大鼠为受体 (SD→WISTAR) ,然后观察外耳郭的生存情况与组织学变化。结果　异体外耳郭移植后可能存在快速排斥反应 ,组织中不但有T淋巴细胞的浸润而且也发现大量单核细胞的浸润。结论　血管化的皮肤复合组织移植物的排斥反应机制与皮肤移植可能有着明显差异 ,进一步了解其排斥反应机制是解决移植物长期生存的理论基础。     

P物质及其受体对成纤维细胞的作用

成纤维细胞是创伤修复过程中重要的功能细胞 ,也是瘢痕组织中的主要细胞成分 ,能合成细胞外基质中的多种成分。而细胞外基质的过多沉积将导致创伤的过度愈合 ,从而形成病理性瘢痕 ,如增生性瘢痕和瘢痕疙瘩。过度增生的瘢痕不仅影响形体美观及肢体功能 ,而且痛痒难忍。关于其发生机理 ,虽然国内外学者做了大量的基础研究工作 ,但至今仍众说纷纭 ,无明确的结论。近十几年来 ,随着蛋白质化学和基因工程技术的发展 ,神经肽在创伤愈合中的作用越来越被重视。Ｐ物质 (ＳｕｂｓｔａｎｃｅＰ ,简称ＳＰ)、血管活性肠肽(ＶＩＰ)、降钙素基因相关肽 (…     

超声波技术治疗皮肤老化临床效果的初步观察

目的观察超声波技术治疗颜面部皮肤老化的临床疗效。方法采用超声波治疗仪的特定声波强度,对60例颜面部皮肤老化者进行治疗。颜面部皮肤老化的治疗10次为一个疗程,每隔一天治疗一次,观察临床效果。针对每例患者治疗前后的对比照片,并做好记录,进行临床疗效的评估。结果本组患者60例,其中额部皱纹:显效12例,有效36例,无效12例;鱼尾纹:显效15例,有效36例,无效9例;眉间皱纹:显效6例,有效42例,无效12例。无一例出现面部红斑及损伤等不良反应。结论使用超声波皮肤治疗仪能改善面部皮肤松弛与老化,操作简单,安全可靠,患者无痛苦,易于接受,是目前具有临床推广价值的方法。     

积雪草甙预防隆乳术后包膜挛缩的细胞及分子机制初探

目的 初步探讨积雪草甙抑制隆乳术后包膜挛缩的细胞及分子机制.方法 将人体来源挛缩包膜组织进行体外分离培养,获得成纤维细胞,将含不同浓度积雪草甙的条件培养基作用于细胞后,采用3H-胸腺嘧啶核苷掺人法、3H-脯氨酸掺入法、Western-blot法分别检测细胞增殖、胶原合成及α-SMA蛋白表达的变化,结果采用SPSS11.0统计学软件分析,并进行t检验.结果 当积雪草甙浓度达到50 mg/L即对细胞DNA合成及胶原合成产生显著的抑制,抑制率分别为34.7%和30.1%,与空白组比较差异具有统计学意义(P＜0.05),随着药物浓度的增加,抑制作用逐渐增强;积雪草甙浓度达到25 mg/L时,α-SMA蛋白表达显著受到抑制,蛋白活化指数为1.673,与空白组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).抑制作用与药物浓度正相关.结论 积雪草甙能有效抑制包膜来源成纤维细胞的增殖、胶原合成及向肌成纤维细胞的转分化.

Abstract：

Objective To explore the cellular and molecular mechanism of the inhibitory effect of asciaticoside on capsular contracture following breast augmentation. Methods Contractured capsule derived fibroblasts were cultured in medium with different concentration of asciaticoside. The cell proliferation, collage synthesis and α-SMA expression were detected by means of 3H-thymidine incorporation, 3H-proline incorporation, and Western-blot. The results were analyzed by SPSS 11.0 with t test. Results DNA and collagen synthesis of fibroblasts were dramatically inhibited when the asciaticoside reached the concentration of 50 mg/L. The inhibitory rate was 34.7% and 30.1%respectively, showing a significant difference from that in control group( P＜0.05 ). The inhibitory effect increased with the rise of the asciaticoside concentration in a dose-dependent manner. When the concentration of asciaticoside reached 25 mg/L, the expression of α-SMA was down-regulated with an activation index of 1. 673, showing a significant difference when compared with that in control group(P＜0.05). Conclusions Asciaticoside can effectively inhibit the DNA and collagen synthesis of capsulederived fibroblasts. The trans-differentiation of fibroblast to myo-fibroblasts is also prevented by it.     

感觉神经肽及其受体拮抗剂作用下增生性瘢痕细胞凋亡相关基因的变化

目的 探讨感觉神经肽(substance P,SP)及其受体拮抗剂对增生性瘢痕(hypertrophic scar,HS)中成纤维细胞(fibroblast,FB)凋亡相关基因表达的影响.方法 体外培养Hs及正常皮肤(normalskin,NS)的FB,免疫组化检测在SP及SP受体拮抗剂作用下FB的增殖细胞核抗原(proliferating cell nu-clear,PCNA)、bax、bcl-2的表达变化.结果 SP可以促进FB的PCNA、bcl-2表达,抑制bax表达,在HS中SP作用强于NS,且主要由NK1受体介导起作用.结论 SP参与FB凋亡相关基因的表达.     

活体顺序性荧光标记技术在实验性骨折愈合研究中的应用

目的介绍实验性骨折愈合研究中活体顺序性荧光标记的技术与方法。方法以成年兔胫骨骨折外固定为模型，术后分别以Tetracydin(TC，黄色，25mg／kg)、Calcein(CG，绿色，10mg／kg)、Xylenal(XO，桔色，90mg／kg)、Alizarin—complen(AE，红色，30mg／kg)四种荧光染料于兔颈部皮下定期注射；并于术后第3、6、12及24周活杀动物，解剖出胫骨，梯度乙醇脱水、脱脂，甲基丙烯酸甲脂包埋，切片厚度40～100μm，打磨，荧光显微镜下观察、摄像；同时通过组织学观察、X线摄片了解骨愈合速度与质量。结果顺序性荧光标记显示，加压组中钙化的内、外骨痴均于术后第2周出现于截骨处的远、近断端，但尚未形成骨性连接。亦无骨皮质的改建。外骨痴增生停止于术后12周，且骨皮质的改建至12周已渐减少．至术后24周已基本完成；对照组：内骨痴于术后第3周出现于截骨处远、近断端，无钙化的外骨痴形成，亦无骨皮质的改建；外骨痂增生停止于术后12周，骨皮质改建至24周尚未完成，其结果与组织学观察、X线摄片具有一致性。结论活体顺序性荧光标记技术可以从细胞水平判断新骨的开始时间、骨生长速度及生长方向，并能节约实验动物数量，是实验性骨折愈合研究中较为理想的研究手段。     

三七总甙对人增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β1和细胞周期的作用

目的 观察三七总甙对人增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β1和细胞周期的作用。方法体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞，并应用三七总甙进行干预，用免疫细胞化学染色法结合图像分析观察TGF-β1的表达变化，用流式细胞仪测定细胞周期的变化。结果与对照组相比，三七总甙能够显著抑制细胞TGF-β1的表达，并使细胞停滞于S期，而G0-G1期、G2-M期细胞明显减少（P〈0．01）。结论三七总甙改变细胞周期和抑制增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β1的表达，可能成为防治增生性瘢痕的药物。