家兔子宫毛细淋巴管内皮细胞间连接的电镜观察

家兔子宫毛细淋巴管内皮细胞间连接的电镜观察应用透射电镜观察到家兔子宫毛细淋巴管内皮细胞间的连接，有３种基本方式：（１）端对端连接，即相邻内皮细胞端与端互相对接，在对接处，可见粘着装置和伸向管腔外的锚丝（ａｎｃｈｏｒｉｎｇｆｉｌａｍｅｎｔ），内皮细胞质...     

丙种射线照射后大鼠脾内细胞自噬过程中溶酶体包裹机制(LWM)的初步探讨

本实验用丙种射线照射方法,诱导细胞自噬过程,获得较满意的效果。实验证明,照后大鼠脾细胞自噬过程中,存在着溶酶体包裹机制。见得溶酶体的‘胞饮胞泄’和溶酶体互包现象。照后晚期出现大量的自噬体和极为罕见的双包自噬体。对照组没见到细胞自噬过程。     

铅染色液的一种新的保存法

铅染色液的传统保存方法是采用磨口瓶、注射器及高颈溶量瓶等溶器保存。这种方法保存的铅染色液变质快、浪费大。我们首次采用一种新的保存法(密封分装保存法),既节省了染色液,又延长了保存时间。     

人自噬基因hATG12转染对酿酒酵母自噬过程的作用

目的 探讨人自噬基因ATG12(hATG12)在酵母自噬过程中的作用. 方法 转化重组质粒pESC-URA-EGFP-hATG12(实验组)或pESC-URA-EGFP(对照组)的酵母用不同方法诱导自噬后,以荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(EGFP)和含hAtg12的融合蛋白(EGFP-hATG12)在酵母中的表达与定位;以透射电镜观察前自噬体结构、自噬体和自噬小体的分布及结构特点. 结果 2组酵母细胞质内均见荧光,液泡内未见荧光,实验组荧光呈小点状分布;电镜下见自噬体由双层膜囊结构延伸而来,该双层膜囊结构靠近细胞膜.液泡内自噬小体由单层膜包裹. 结论 hATG12参与酵母自噬体最初的形成过程,定位于自噬体外膜上,在自噬体形成后脱离自噬体.自噬体膜最初可能来源于细胞膜.     

FK506促进异体神经匀浆激活的巨噬细胞凋亡的实验研究

目的研究FK506促进外周血来源的异体神经匀浆激活的巨噬细胞的凋亡。方法取1月龄SD幼鼠，腹腔抽取法培养异体神经匀浆激活的巨噬细胞。按不同浓度的FK506分组：A组空白对照组、B组0．25ng／ml、C组0．5ng／ml、D组1．0ng／ml。将4组处理因素分别加入长有巨噬细胞的96孔板中，用MTT法检测巨噬细胞的活力情况．用倒置显微镜和荧光显微镜及透射电镜对巨噬细胞的凋亡进行形态学上的观察与鉴定。流式细胞仪检测巨噬细胞凋亡情况。结果B组和C组均可见异体神经匀浆激活的巨噬细胞的活性减弱及细胞凋亡发生，D组可见巨噬细胞发生坏死性改变。透射电镜和荧光显微镜可观察到巨噬细胞的凋亡前期和凋亡小体出现。流式细胞仪检测B和C组凋亡率为24．6％和26．5％，均高于对照组，D组发生坏死。结论FK506可以在早期促进异体神经匀浆激活的巨噬细胞的凋亡．从而减少或抑制周围神经异体移植后巨噬细胞所介导的免疫排斥反应。     

人自噬基因hAPG_(12)的克隆及其重组真核表达载体的构建

目的:探讨克隆人自噬基因h APG12 ,构建重组真核表达载体p EGFP- C2 -h APG12 ,为进一步研究h APG12 的功能奠定基础。方法:从正常人外周血单个核细胞中提取总RNA,采用两步法RT- PCR,首先把RNA逆转录为c DNA,而后通过一对h APG12 的特异性引物扩增出目的基因,PCR产物与测序载体p UC18连接后转化到大肠杆菌DH5 α,而后对单菌落进行菌落PCR、酶切和测序鉴定。将测序正确的h APG12 亚克隆入真核表达载体p EGFP-C2 ,该重组载体转化到大肠杆菌DH5 α后进行菌落PCR和酶切鉴定。结果:测序结果表明从正常人外周血单个核细胞中所获得的h APG12 c DNAs含有2 2 5个碱基,与Genbank( BC0 1 1 0 33)序列完全一致。构建的重组真核表达载体经鉴定证实h APG12 基因已完全正确亚克隆到p EGFP- C2 。结论:成功克隆了人自噬基因h APG12 并构建了具有报告基因-增强绿色荧光蛋白( EGFP)基因的重组真核表达载体p EGFP- C2 - h APG12 ,为以后研究h APG12 的功能奠定基础     

长春新碱诱导的自噬性细胞凋亡对线粒体膜电位的影响

目的：了解长春新碱（VCR）诱导的自噬性细胞凋亡是否与线粒体跨膜电位（△Ψm）改变有关及其可能的机制。材料与方法：以正常人的肝细胞系为体外模型,应用碘化丙啶（PI）／Rhodamine123(Rh123)双重染色检测△Ψm,通过亚GI期细胞和透射电镜鉴定细胞凋亡。结果与结论：VCR可明显诱导线粒体△Ψm下降,也可以诱导L－02细胞自噬性凋亡。线粒体△Ψm下降可能是VCR诱导自噬性细胞凋亡的关键环节。     

大鼠坐骨神经再生过程中的施万细胞自噬作用

目的 探讨大鼠坐骨神经再生过程中的细胞自噬作用。方法 横切大鼠坐骨神经制作wallerian变性模型．分别于造模后0、0．5、1．0、1．5、2．0、3．0、4、5、7、10、15d取远断端组织行电镜结构观察。结果 轴突在第0．5天时从髓鞘脱离，溃变呈空泡状。第2天开始髓鞘皱褶、断裂形成碎片，神经膜细胞(Schwann cell，施万细胞)内见大的膜结合髓鞘碎片和许多散在小碎片，并与溶酶体融合形成自噬泡，呈酸性磷酸酶(AcPase)阳性。第4天时内膜区偶见幼稚细胞，1周后见大量幼稚细胞。第7天后施万细胞内自噬泡数量开始减少。实验全程偶见巨噬细胞，内有吞噬泡。结论大鼠坐骨神经再生过程中溃变髓鞘主要经施万细胞自噬清除。施万细胞脱分化为施万细胞祖细胞后大量增殖分化参与神经再生过程。     

强灵片增加骨密度值的药理研究

通过对骨质疏松模型大鼠的实验观察，证实了强灵片具有增加骨密度值及磷钙含量的作用。