粘附式细胞仪快速分析细胞膜脂质流动的方法

用荧光探针ＮＢＤ－Ｃ６－ＨＰＣ标记体外培养４８ｈ的小鼠肝细胞，细胞膜磷脂用５７０型粘附式细胞仪激光漂白局部细胞膜，然后测定荧光的重新分布。结果显示，荧光恢复牢为７６／，膜流动性为（１．４９±０．０５７）×１０￣（－9）ｃｍ￣２／ｓ。     

外源重组基因表达产物亚细胞定位的研究现状

目的：将外源基因通过重组然后在宿主细胞中表达，以研究其功能。 资料来源：应用计算机检索Medline 1997-01／2004-12与外源基因重组表达产物亚细胞定位的相关文献，检索词“foreign recombined gene，subcellure location”等分别进行检索提炼，限定文献语种为English。 资料选择：就检索到的500余篇资料进行初审，纳入标准：①有关外源基因重组策略。②与表达产物定位检测方法相关。排除标准：文献中重复研究、综述、Meta分析类文章。未排除文章中资料是否应用了随机、对照和盲法。 资料提炼：共收集到80余篇关于外源基因重组表达后定位相关的文章。其中研究内容相似的，以近5年内发表在较权威杂志者优先。对符合标准的38篇文献进行分析。 资料综合：外源重组基因在宿主细胞中表达后，可以通过多种方法进行亚细胞定位，如报告基因，免疫电镜，免疫荧光技术等，且大规模的外源重组基因亚细胞定位具有重要的意义。 结论：因为外源重组基因表达产物的功能与其在宿主细胞中的定位有重要的关系，所以研究其在宿主细胞中的亚细胞定位，对研究外源重组基因表达产物的功能或未知新基因的功能来说有很重要的意义。     

大蒜乳剂对艾氏腹水癌细胞的ConA-HRP受体的影响

本实验用刀豆蛋白A(ConA)-辣根过氧化物酶(HRP)标记法研究了对照组和大蒜乳剂处理组小白鼠艾氏腹水癌细胞膜表面ConA受体的分布及其与(ConA-HRP复合物结合的能力。电镜观察到对照组艾氏腹水癌细胞膜表面呈密集而均匀的ConA-HRP标记,经大蒜乳剂处理的癌细胞膜表面微绒毛末端膨大或者脱落,几乎全部癌细胞膜表面无ConA-HRP标记或标记不完整,这可能是大蒜乳剂对癌细胞膜表面直接作用的结果。     

Study of nennatolysosomes in mouse hepatocytes and pancreatic exocrine acinar cells

Acid phosphatase(ACPase)-positive nematolysosomes in mouse hepatocytes and thepancreatic exocrine acinar cells were studied with ultracytoehemical method.The nematolyso-somes were 2～8μm in length,0.1～0.3μm in diameter.Some branched and some did notbranch,and most of them winded through the organelles.     

小鼠腹腔吞噬细胞的内吞及其相关酶的关系

小鼠腹腔吞噬细胞的内吞及其相关酶的关系采用了激光细胞仪（ＡＣＡＳ－５７０）和电镜酶细胞化学方法观察了两种不同的吞噬细胞（中性粒细胞和巨噬细胞）配体内吞过程中，Ｃａ￣（２＋）、酸性磷酸酶（ＡｃＰ酶）、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶（ＮＡＤＰＨ氧化酶）、...     

酸性磷酸酶在组织化学中的铈法显示法

介绍铈法在酸性磷酸酶活怀电镜检查中的应用。     

人发角蛋白神经导管诱导兔胫神经修复时NGF和p75的表达及分布

目的研究人发角蛋白(HHK)神经导管诱导兔胫神经缺损再生修复时神经生长因子(NGF)及其低亲和受体p75的表达及分布。方法取正常胫神经、缝线连接的胫神经和HHK导管桥接的胫神经术后不同时期的切口部位及相邻组织制作石蜡切片,用免疫组化法对切片进行染色。结果正常胫神经组织中无NGF阳性染色。术后76 d,HHK周围的新生组织中NGF免疫组化染色表现为强阳性,而缝线周围的组织中无阳性着色。术后100 d,与正常胫神经组织无显著差异。正常胫神经组织中无p75阳性染色。术后76 d,导管组HHK周围较成熟的神经组织中p75免疫组化染色为弱阳性,而新生组织中为强阳性。术后100 d,导管组的p75免疫组化染色与正常神经组织无显著差别。结论HHK及其降解产物能诱导NGF和p75的产生,为神经再生创造良好的微环境;而缝线无此诱导作用。在新生神经组织中NGF和p75含量多,较成熟的神经组织中含量少。     

电镜细胞化学半薄切片的制作及观察

在电镜半薄切片标本上可以观察到细胞各部分的整体结构,也是电镜细胞化学研究手段之一。现将我们在制做及观察半薄切片的体会简介如下:     

人发角蛋白神经导管诱导兔胫神经缺损部分再生时泛素的表达及分布

目的：应用人发角蛋白神经导管植入兔胫神经缺损部分，诱导神经再生过程中不同时期泛素（ubiquitin）的表达和分布。方法：免疫组织化学法。结果：术后48d，缝合线之间变性组织及其周围神经组织的雪旺细胞胞质和胞核中泛素免疫组化染色呈棕黄色阳性反应。术后99d，泛素在人发角蛋白周围的组织中免疫组化染色呈深棕色强阳性反应，在 生神经组织分布稀疏，免疫组化染色呈浅黄色弱阳性。术后99d较成熟的神经组织中无泛素阳性着色，而新生的神经组织呈棕黄色阳性反应。结论：人发角蛋白及缝合线之间变性组织的异常蛋白的降解主要由泛素承担。在新生神经组织中大量泛素参与蛋白质和变性神经组织的降解，而在趋于成熟的神经组织中因降解的蛋白质量的减少，参与降解的泛素量也减少。     

人骨形态发生蛋白12前体蛋白cDNA的克隆及序列分析

目的 克隆人骨形态发生蛋白12前体蛋白的基因。方法 根据Genbank人骨形态发生蛋白12的基因序列合成两条引物，从人胎盘组织中提取总RNA，用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增出长920bp编码人骨形态发生蛋白12(BMP12)前体蛋白的基因序列。将所得的基因片段插人载体pTARCET^TM质粒中并转化大肠杆菌JM109，提取重组质粒进行鉴定并测序。结果 RT-PCR产物琼脂糖凝胶电泳显示一长约920bp的条带．阳性克隆质粒经PCR扩增出约920bp的片段，全自动DNA测序结果表明和Genbank中的序列完全相符。结论 通过RT-PCR可从人胎盘组织中成功地克隆出人pMP12前体蛋白基因，基因序列完全正确。