母血浆中游离胎儿DNA:无创伤性产前诊断的靶标

孕妇血浆中游离胎儿DNA的发现,对无创伤性产前诊断产生了巨大的影响。近几年来,随着分子生物学技术的完善,使得从母血中检测胎儿DNA并应用于临床成为可能,对游离胎儿DNA的生物化学性质的进一步研究为无创伤性产前基因诊断在临床的广泛应用奠定了基础。     

miRNA-34a靶向Bcl-2对肝癌细胞HepG2的生长和迁移能力的影响

通过过表达miRNA-34a检测Bcl-2的表达及对肝癌细胞的生长和迁移能力的影响，为肝癌的治疗提供新靶点。方法 通过生物信息学方法预测miRNA-34a的潜在作用靶点；采用双荧光素酶报告实验检测miRNA-34a与Bcl-2的靶向调控关系；体外培养肝癌细胞，将肝癌细胞分为对照组（转染miRNA-34a阴性对照物mimic NC）及miRNA-34a转染组（转染miRNA-34a模拟物）。分别转染miR-34a模拟物和阴性对照，转染36 h后，CCK8检测细胞增殖，Trans-well检测细胞迁移能力，q-PCR和Western blot方法检测miRNA-34a对肝癌细胞中Bcl-2表达量的影响。结果 miRNA-34a对肝癌HepG2细胞的活力和迁移能力具有抑制作用（P＜0.01）；miRNA-34a可以直接靶向下调Bcl-2（P＜0.01）的表达。结论 miRNA-34a可靶向并负向调控Bcl-2,降低肝癌细胞HepG2的活力和迁移能力。     

北京汉族群体21号染色体上4个STR位点的遗传多态性

目的研究人类21号染色体上唐氏综合症关键区域内或附近的4个短串联重复序列(D21S1432、D21S2039、D21S1414、D21S1270)在中国汉族人群中的遗传多态性。方法应用Chelex法提取北京地区无血缘关系汉族253份个体血样DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增,非变性聚丙酰胺凝胶电泳或ABI鄄310电泳分型结合测序进行STR分型。结果得到4个STR基因座等位基因频率、各基因座的杂合度、个体识别率、多态信息含量等群体遗传学数据。4个位点基因型分布均符合Hardy鄄Weinberg平衡定律。结论21号染色体上4个STR位点多态性较好,基因型分布符合Hardy鄄Weinberg平衡定律,具有较高的个体识别率,在法医学及唐氏综合征的基因诊断和产前基因诊断研究中具有较高的应用价值。     

PCR-LDR-核酸试纸条检测法在结核分枝杆菌katG基因315位密码子突变检测中的应用

目的将一项新的分子生物学方法PCR-LDR-核酸检测试纸条法应用于katG基因315位密码子单碱基突变的检测。方法设计与合成用于检测katG基因315位密码子单碱基突变的引物和探针,通过LDR反应,使用核酸检测试纸条检测结果,并与PCR-RFLP法及直接测序法相比较。结果成功区分各突变类型及野生型,与PCR-RFLP法及直接测序法的检测结果呈高度一致性,符合率分别为97.5%和100%。结论将为katG基因315位密码子单碱基突变的检测提供一种快速廉价的分子诊断方法。     

DNMT3B基因SNP (-149C/T)与佳木斯地区肺癌发病风险的关系

目的 探讨DNMT3B基因启动子-149C/T(C46359T)单核苷酸多态性与佳木斯地区人群肺癌易感性的相关性.方法 提取50例肺癌患者及60例健康体检人员外周血基因组DNA,采用PCR-RFLP结合DNA测序技术检测DNMT3B基因启动子单核苷酸多态性-149C/T( C46359T).结果 正常对照组DNMT3B-149C/T等位基因TT/CT/CC基因型颇为97％／3％／0,病例组分别为96％／2％／2％.携带有SNP(-149C/T) C→T转换的个体患肺癌的易感性未见明显升高(x2 =0.11,P＞0.05,OR=0.83,95％CI:0.27～2.50).结论 DNMT3B基因C46359T多态性可能不适合作为佳木斯地区人群肺癌易感性的一个独立风险因素.     

P27基因在宫颈癌中表达的临床病理意义

P27基因是一个新的细胞周期调节基因，是细胞周期依赖性激酶癌基因，P27基因及其表达产物在人体多种恶性肿瘤细胞增殖和分化的调控中起重要作用，我们采用免疫组化S-P法，检测宫颈癌中P27蛋白表达，来探讨其在宫颈癌发病中的意义。 1 材料和方法 1.1 材料 48例宫颈癌来自哈尔滨医科大学病理科存栏蜡块，其中鳞癌43例，腺癌4例，鳞腺癌1例，分化程度：Ⅰ级10例，Ⅱ级24例，Ⅲ级14例。 1.2 免疫组化S-P法 鼠抗人P27单克隆抗体，S-P试剂盒及DAB显色剂均购自福州迈新生物技术开发公司，5μm切片脱蜡水化，加一抗之前，切片放入pH6.0的0…     

初发和复发性脑梗死患者血清同型半胱氨酸水平的临床研究

目的：探讨血清同型半胱氨酸（HCY）水平与初发和复发性脑梗死的关系,为脑梗死的诊断、预防提供循证医学依据.方法：选取48例初发性脑梗死和40例复发性脑梗死患者为研究对象,进行HCY水平检测,并与40例健康志愿者进行对比分析.结果：患病组血清HCY水平较对照组明显升高,且复发脑梗死患者HCY水平增高更显著.结论：血清HCY升高水平与脑梗死疾病发生密切相关,对初发和复发性脑梗死的诊断及疗效观察有重要临床意义.     

105例胚胎停育绒毛细胞遗传学分析

目的探寻胚胎停育与绒毛细胞染色体异常的关系。方法收集2012年2014年2月佳木斯医学院105例胚胎停育患者,对其绒毛细胞进行培养和染色体核型分析。结果 105例胚胎停育患者,绒毛细胞培养失败6例,检出异常核型43例,染色体数目异常39例,染色体结构异常4例。结论胚胎绒毛细胞染色体异常是导致胚胎停育的重要原因。     

葛瑞林对心肌梗死致心力衰竭大鼠保护作用及生长分化因子-15的影响

目的 制作葛瑞林（Ghrelin）早期干预心肌梗死致心力衰竭(HF)大鼠模型,探讨生长分化因子-15(GDF-15)表达水平与HF程度相关性,为HF临床治疗奠定理论学基础。方法 80只Wistar大鼠于造模成活6h后被随机分为假手术（A）组（n =18)、HF模型(B)组（n =27)和HF模型干预(C)组（n =27),通过酶联免疫吸附（ELISA）及实时定量 PCR,于造模后3d、1周、2周、4周、8周分别检测各组血中GDF-15表达变化及2周、4周、8周末3组HF大鼠心肌组织中GDF-15 mRNA表达水平的改变;电镜下观察各组大鼠心肌组织超微结构,并均于处死前行B型超声检测心功能。结果 B组大鼠血GDF-15及心肌组织GDF-15 mRNA表达水平明显高于C组,低于A组,差异具有统计学意义（P ＜0.001）;8周末超声检测结果显示,B组大鼠较A、C两组大鼠心脏增大明显,左室舒张及收缩末期内径均明显增加,差异具有统计学意义（P ＜0.001）;B组大鼠左室舒张末期室间隔厚度、左室后壁厚度及射血分数值均较A、C两组大鼠显著降低,差异具有统计学意义（P ＜0.001）;此外,心肌超微结构显示C组较B组改变明显。结论 Ghrelin早期干预HF大鼠能改善心功能,降低死亡率;GDF-15表达水平能反映HF病变程度,并可作为辅助检测HF新的标记物。     

非酒精性脂肪肝形成过程中肝型脂肪酸结合蛋白的表达

目的：通过检测非酒精性脂肪肝形成过程中肝型脂肪酸结合蛋白的表达变化探讨其发病机制。方法：雄性大鼠60只，体重（180±10）g，随机分为饮食基础饲料的正常对照组和饮食高脂饲料（基础饲料87．8％、猪油10％、胆固醇2％、胆盐0．2％）的实验组；各组又随机分为2、4、8、12用4个时相纽。用Western-blot方法进行L—FABP蛋白质的动态检测并探讨其发病机制。结果：L—FABP在高脂饮食后的第2周开始升高，与正常饮食组相比升高有显著性（1．31±0．02vs0．67±0．03，P〈0．01）。第8周时升至最高（1．67±0．07vs0．67±0．03，P〈0．01），第12周有所降低，但与第8周相比没有统计学意义。结论：随着高脂饮食时间的延长．L-FABP的表达逐渐上升，一定程度上说明其和脂肪肝的进展有密切关系，有望成为脂肪肝治疗药物的靶点。