丙型肝炎病毒样颗粒疫苗的研究现状

丙型肝炎病毒(HCV)的高度变异性与缺乏合适的体外细胞培养系统这两大因素制约了HCV疫苗的研发.近年来在昆虫细胞内合成的病毒样颗粒(VLP)受到了较大关注.本文从VLP的形成及其理化特性、抗原性与免疫原性、表面结构、与细胞相互作用等方面进行综述,分析VLP的免疫特点和免疫应答效果.       

HCV核心和截短的包膜蛋白E2基因在昆虫细胞中的表达及其抗原性

目的:构建含HCV全长核心基因和截短的包膜蛋白E2基因的重组杆状病毒表达载体,研究其表达和抗原性.方法:以含HCV全长cDNA克隆的pGEM-HCJ4质粒为模板,PCR扩增全长的HCV核心抗原基因和截短的E2基因片段,插入转座载体pFastBacHTa构建重组转座质粒pFB-CE2t,转化DH10Bac大肠杆菌,获得重组杆状病毒穿梭质粒Bacmid-CE2t,以之转染昆虫Sf 9细胞进行外源基因的表达,并对其抗原性进行ELISA检测.结果:SDS-PAGE和Western blot分析表明Bacmid-CE2t在Sf 9细胞表达了HCV C-E2蛋白,并能利用细胞内蛋白酶将其裂解为单独的C蛋白和截短的E2蛋白.纯化后的蛋白能分别与HCV C蛋白、E2蛋白单抗以及慢性丙型肝炎患者血清反应.结论:HCV核心蛋白和截短的E2蛋白在昆虫细胞中成功表达并具有抗原性.     

汶川县映秀镇抗震救灾部队营地苍蝇密度、分布及其控制

目的:明确驻汶川映秀镇部队营区的苍蝇密度及其分布规律,为有针对性杀虫以降低消化道传染病隐患提供依据.方法:以汶川映秀镇铁军、武警和红军部队营区为研究对象,以空间代表性和均匀性为原则在各营区内选择检测点,以粘蝇板为材料,在不同天气及干预条件下计数白天8 h(上午8:00到下午16:00)粘蝇板上的苍蝇个数,并通过非参数检验和配对t检验进行统计分析.结果:映秀镇各个部队营区苍蝇密度分布显著不同.苍蝇主要集中在厨房、临时厕所和垃圾场的附近区域.气温较高的晴天比气温较低的阴天苍蝇多.针对重点区域采用溴氰菊酯灭蝇有显著效果,短期内未发现苍蝇耐药现象.结论:救灾部队营地周围环境是导致帐篷内苍蝇密度增加的根本原因,营地厨房的卫生环境差也吸引苍蝇,针对临时厕所和垃圾处理点进行杀虫措施能显著降低帐篷内苍蝇密度,但必须注意避免过度杀虫造成生态恶化.     

核酸探针在结核病实验室诊断中的应用进展

核酸探针杂交技术在结核分枝杆菌的分子生物学研究、细菌分类与鉴定、流行病学调查等方面具有十分重要的作用。本文综述了同位素标记核酸探针（包括全染色体探针、克隆重ＤＮＡ片段探针、ｃＤＮＡ探针）和非同位素标记核酸探针（包括ＡＰ－ＤＮＡ探针、ＡＡＦ－ＤＮＡ探针、ＡＥ－ＤＮＡ探针、Ｄｉｇ－ＤＮＡ探针）在结核病实验室诊断中的应用进展。     

PIWI蛋白在人类结肠癌组织中的表达及临床意义

目的 分析PIWIL1、PIWIL3和PIWIL4三种蛋白在结肠癌组织和癌旁组织中的表达与临床意义.方法 选用106例结肠癌患者的癌组织和癌旁组织标本,分别制成62点和150点2份组织芯片,采用免疫组织化学方法检测结肠组织芯片中PIWIL1、PIWIL3和PIWIL4的表达.采用SPSS 17.0统计学软件,不同组织间PIWI蛋白表达差异采用配对t检验或配对Wilcoxon检验,相关性采用Pearson或Spearman等级相关分析.结果 PIWIL1、PIWIL3、PIWIL4在结肠癌组织中的表达均显著高于癌旁组织(P＜0.01).PIWIL1、PIWIL3、PIWIL4在结肠癌和癌旁组织中的表达均呈现两两显著正相关(均P＜0.01).癌组织PIWIL1在低分化组的表达显著高于高分化组(t=-2.840,P＜0.01).癌组织PIWIL3表达随着临床分期的升级呈现显著升高(F=3.112,P＜0.05).癌组织PIWIL3和PIWIL4在有远处转移组的表达显著高于无远处转移组(t=-3.349,P＜0.01;t=-2.168,P＜0.05).癌组织PIWIL3和PIWIL4的表达均与结肠癌的发生显著相关(P值均＜0.01).结论 PIWIL1、PIWIL3、PIWIL4在结肠癌组织中的表达与结肠癌的分化、临床分期、有无远处转移等临床指标显著相关,且PIWIL3和PIWIL4的表达是结肠癌发生的独立相关因素,有望进一步研究探讨其是否能作为结肠癌早期诊断的分子标志物及分子治疗靶点.

Abstract：

Objective To study the expression of PIWIL1, PIWIL3 and PIWIL4 in human colon cancer and its clinical significance. Methods We collected cancerous tissues and its adjacent tissues of 106 patients with colon cancer, two tissue microarrays were constructed, with 62 and 150 points respectively. We studied the expression of PIWIL1, PIWIL3 and PIWIL4 through immunohistochemistry. Results The expression of PIWIL1, PIWIL3 and PIWIL4 were significantly higher in cancerous tissues than those in adjacent tissues (P＜0. 01). In cancerous tissues and its adjacent tissues, postive correlation were seen among PIWIL1, PIWIL3 and PIWIL4 expression (P＜0. 01). PIWIL1 expression was significant higher in low differentiation group than that in high differentiation group (t =- 2. 840, P＜0.01 ). PIWIL3 expression was higher in high clinical stage than that in low clinical stage (F= 3. 112, P＜0.05). The expression of PIWIL3 and PIWIL4 were significantly higher in patients with colon cancer with distant metastasis than those without distant metastasis (t= -3. 349, P＜0.01 ; t = - 2. 168, P＜0. 05). PIWIL3 and PIWIL4 expression were correlated with occurring of colon cancer (P＜0. 01). Conclusions The expressions of PIWIL1,PIWIL3 and PIWIL4 in colon cancer were correlated with the differentiation, clinical stage and distant metastasis of colon cancer. PIWIL3 and PIWIL4 expression were two independent related factors of occurring of colon cancer, which would be furtherly investigated to be served as novel markers for early diagnosis and promising molecular targets for colon cancer therapy.     

蔡宛如教授“脏腑同治法”辨治慢性阻塞性肺疾病经验拾掇

[目的]总结蔡宛如教授"脏腑同治"辨治慢性阻塞性肺疾病的经验。[方法]分析蔡宛如教授对脏腑同治理论辨治慢性阻塞性肺疾病的认识,阐述其独到的临证思维及用药经验,并附经典案例以验证。[结果]蔡宛如教授认为"五脏六腑皆令人咳,非独肺也",指出五脏六腑受累均可致肺系疾病发生,而慢性阻塞性肺疾病病程长,病因病机错杂,常非肺系一脉所为病,更需有五脏六腑相为病的整体观念。脏腑同治法主要体现在肺胃同治、肺与大肠同治、肺与三焦同治,如治上焦咳嗽,不单治肺,而应治在心肺;治疗缓解期患者,不可一味过补,还应清泄余邪。认为"治气"与"治痰饮"是治疗慢性阻塞性肺疾病两个关键点等,并将此验之以临床。所述医案从肺、心、肾、大肠等脏腑论治,气血水饮同治,获得佳效。[结论]蔡宛如教授"脏腑同治"理论治疗慢性阻塞性肺疾病,对指导临床治疗有实用价值,值得继承推广。     

HCV核心蛋白DNA疫苗诱导的小鼠体液免疫应答

目的：观察丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白ＤＮＡ疫苗诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠体液免疫应答的效力，为研制应用于人类的ＨＣＶ ＤＮＡ疫苗提供实验依据。方法：将全长ＨＣＶ核心蛋白基因插入真核表达质粒载体ｐｃＤＮＡ３．１，构建ＨＣＶ核心蛋白重组表达质粒ｐｃＤＮＡ３．１ＨＣＶｃｏｒｅ，肌注ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，以ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血清ＨＣＶ抗体。以此重组质粒转染小鼠ＮＩＨ３Ｔ３细胞，以ＨＣＶ抗体阳性小鼠血清为捕获抗     

抗震救灾部队官兵皮肤病发病率及其影响因素分析

目的:调查汶川映秀镇抗震救灾部队官兵皮肤病的发病情况,分析其影响因素,并对营区内杀虫措施效果进行评价.方法:2008年6月15日至6月20日,以映秀镇的两支抗震救灾部队为研究对象,回顾性调查部队官兵在震后1个月内的皮肤病发病情况、帐篷卫生条件和杀虫措施实施情况等内容,采用χ2检验确定差异显著性.结果:映秀镇抗震救灾部队官兵在震后1个月的皮肤病发病率为42.20%,其中虫咬性皮炎和毛囊炎的构成比分别为82.05% 和15.38%;震后1、2、4周的皮肤病发病率水平明显高于震前水平(P<0.05),震后4周发病率的升高与在山上过夜相关;采用2.5%溴氰菊酯等杀虫剂对帐篷内外环境进行杀虫,皮肤病发病率由震后2周的26.61%降低至震后3周的0.92%(P<0.05).结论:抗震救灾部队官兵在震后皮肤病的发病率明显升高,震后恶劣的卫生环境、蚊虫叮咬是官兵皮肤病的主要因素,定期杀虫能有效降低皮肤病的发病率.