细胞膜生物色谱法在中药研究中的应用

中药的效应—物质基础研究一直是中药研究重点和难点,细胞膜生物色谱技术近年来在中药中应用逐渐受到关注,本文对细胞膜生物色谱法的原理、特点、应用现状进行了阐述,对其在中药研究的优势、存在的问题及对策、应用前景进行了分析和展望。通过该方法在中药效应成分分析中的不断应用,以及在实验过程的对该方法不断的完善和优化,细胞膜生物色谱法一定会在中药效应成分的研究中发挥重要的作用。     

巨噬细胞高糖培养液促进肾小球系膜细胞增殖

目的 分析高糖环境下巨噬细胞释放的因子在糖尿病肾病病理环节中的意义.方法 Criess法检测高糖作用下的巨噬细胞上清中NO的含量;ELISA法检测条件培养液中TNF-α的含量;NTT法检测肾小球系膜细胞的增殖.结果 12.5-50 moL/L高浓度的葡萄糖体外作用24 h、48 h均能刺激大鼠腹腔巨噬细胞产生NO;TNF-α量显著增加(P＜0.01).大鼠巨噬细胞在含12.5 moL/L葡萄糖的DMEM培养液中培养24 h,其上清明显促进系膜细胞增殖的(P＜0.01).结论 高糖环境中巨噬细胞释放NO,其上清液中NF-α量显著增加(P＜0.01)等细胞因子,含有这些因子的细胞培养液明显促进系膜细胞增殖,提示高糖环境下的巨噬细胞是糖尿病肾病的发病的主要病理环节.      

去甲肾上腺素与异丙肾上腺素对大鼠心室肌细胞L型钙通道电流作用的比较

目的比较去甲肾上腺素与异丙肾上腺素对大鼠心室肌细胞L型钙电流的作用强度,分析其可能的机制。方法采用膜片钳全细胞式的记录方法,观察去甲肾上腺素与异丙肾上腺素对L型钙电流幅度及电流-电压关系曲线的影响。结果异丙肾上腺素对L型钙电流的增加作用能部分地被去甲肾上腺素所抑制。结论（1）α1肾上腺素受体具有对抗p肾上腺素受体过度兴奋的作用,或／和（2）异丙肾上腺素对心脏晶肾上腺素受体的作用强于去甲肾上腺素。      

苯肾上腺素对糖尿病大鼠室性心律失常的诱导作用

目的比较α1肾上腺素受体(α1-AR)激动剂苯肾上腺素对正常及链脲霉素(STZ)诱导的糖尿病大鼠室性心律失常的差异作用,及对两组大鼠左心室肌细胞早期后除极(EAD)的差异作用;并分析两组大鼠左心室α1-AR各亚型的差异表达,解析其可能的物质基础。方法采用离体心脏心电图及电流钳法,分析α1-AR激动剂(苯肾上腺素,PE)诱导正常和糖尿病大鼠离体心脏心律失常发生率及左心室肌细胞EAD发生率的差异作用。采用Westernblot法,比较两组大鼠左心室α1-AR各亚型的蛋白表达。结果与正常大鼠相比,PE(100μmol.L-1)诱导糖尿病大鼠离体心脏产生室性心律失常的机率明显增加,PE(1000μmol.L-1)诱导左心室肌细胞产生EAD的机率明显增加;α1A-AR在糖尿病大鼠左心室的表达明显增加。结论α1-AR激动剂使糖尿病大鼠左心室肌细胞产生高机率的EAD是其诱导高机率室性心律失常的基础。而糖尿病大鼠左心室α1A-AR表达明显增加是其物质基础。     

运脾方药治疗小儿厌食症的临床与实验研究

治疗小儿厌食症488例,辨证中药(运脾、补运兼施两法)组疗效显著优于浓复 B 液对照组(P<0.001)。实验研究结果:运脾方药儿宝冲剂能提高患儿尿 D-木糖排泄率和头发锌、铁、钴、锶等8种元素含量,增加血 T 淋巴细胞比值和唾液 SIgA 含量,调节实验家兔异常肠蠕动,增进家兔离体十二指肠对氨基酸和葡萄糖的吸收。补运兼施方药健儿糖浆能提高患儿头发锌、铁、铜、锰等14种元素含量,增加血T淋巴细胞比值,提高实验小鼠的胸腺指数及脾指数,增进小鼠溶血素生成。提出运脾法为主治疗小儿厌食症的作用机理,主要在于增进食欲,促进机体对各种营养物质,包括必需微量元素的吸收和利用。     

茵陈蒿汤合煎与分煎的成分比较研究

为比较茵陈蒿汤合煎与分煎的成分,利用反相高效液相法分析茵陈蒿汤与茵陈蒿、栀子、大黄的指纹图谱,考察中药复方中其化学成分的来源,并进行方法学论证。结果显示,茵陈蒿汤出峰共47个,其中19个峰来源于茵陈蒿,31个峰来源于大黄,6个峰来源于栀子。提示：茵陈蒿汤95％醇提物所含化学成分可能是茵陈蒿、大黄、栀子三味药材所含成分的加合,尚未发现原成分的缺失和新成分的形成。故认为茵陈蒿汤合煎与分煎,两者无明显成分变化。     

茵陈蒿汤保肝作用的机理—对小鼠腹腔巨噬细胞释放TNF的影响

目的：探讨茵陈蒿汤醇提物的保肝作用与肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的关系。方法：ＴＮＦ以ＭＴＴ法检测。结果：茵陈蒿汤醇提物０２～２０μｇ直接加入小鼠腹腔巨噬细胞培养液可抑制ＴＮＦ的释放;血清药理学表明含茵陈蒿汤醇提物小鼠血清１００、１５０、２００、２５０ｍｉｎ对ＴＮＦ也有抑制作用,且有时效关系,效应高峰在２００ｍｉｎ。结论：茵陈蒿汤醇提物保肝途径之一是调节巨噬细胞释放ＴＮＦ的功能     

桑枝、桑白皮体外降糖作用研究

目的:研究桑枝、桑白皮体外降糖作用,初步探讨其降糖作用机理.方法:采用与人肝细胞表型相似的HepG2细胞,检测24h后培养液中葡萄糖的消耗量,用MTT法监测细胞增殖的情况.结果:桑枝、桑白皮在高糖状态下可使HepG2细胞的葡萄糖消耗量增加,对胰岛素刺激的HepG2细胞的葡萄糖消耗量增加有协同作用.结论:促进外周组织的葡萄糖代谢、提高肝细胞对胰岛素的敏感性可能是桑枝、桑白皮防治2型糖尿病作用的机理之一.     

茵陈蒿汤醇提物的氯仿萃取部位对离体大鼠肝细胞的影响

目的：观察茵陈蒿汤醇提物中氯仿萃取部位的五个薄层区带对D－GalN诱导的离体大鼠肝细胞损伤的影响。方法：用苯：甲酸乙酯：甲酸：甲醇：水－3：1：0．2：0．5：0．5作为展开剂，在硅胶薄层板上点样分离茵陈蒿汤醇提物的氯仿萃取部位，得到5个薄层区带，Rf0.90,0.82,0.48,0.41,0.20，观察其对D－GalN诱导的离体大鼠肝细胞损伤的影响。结果：薄层层析区带4（Rf0.4)和5（Rf0.2)有降低ALT活性的作用，未观察到区带1（Rf0.9),2(Rf0.82)和3（Rf0.48)有抗离体肝细胞的化学损伤作用。结论：茵陈蒿汤保肝作用的效应薄层层析区带Rf值分别为0．41及0．20，提示该两个区带属于茵陈蒿汤保肝作用的成分及成分群。