α_2-巨球蛋白对黑色素瘤细胞作用的体外实验研究

研究α２－巨球蛋白（α２Ｍ）对体外培养黑色素瘤细胞增殖、侵袭能力和组织蛋白酶Ｄ活力的影响。采用镜下计数，检测侵袭粘附在内皮细胞上３Ｈ－ＴｄＲ标记瘤细胞的放射性和比色测定组织蛋白酶Ｄ活性。结果：α２Ｍ可抑制瘤细胞生长、集落形成、侵袭能力和组织蛋白酶Ｄ活力。结论：α２Ｍ具有明显的抗肿瘤细胞增殖及转移能力，值得进一步研究以期应用于临床。     

睡眠剥夺引起大鼠海马神经元凋亡与丝裂素活化蛋白激酶表达的变化

背景：丝裂素活化蛋白激酶是一组与神经元的存活凋亡有关的蛋白激酶，睡眠剥夺可以引起神经元凋亡。 目的：观察睡眠剥夺大鼠丝裂素活化蛋白激酶表达的变化并分析其可能的意义。 设计：完全随机分组的前瞻性研究。 单位：郑州大学生理学教研室神经研究室。 材料：实验于2000—06／2002—10在郑州大学完成。选取成年健康SD大鼠24只。方法：24只大鼠随机分为快眼动睡眠剥夺组、快眼动睡眠剥夺对照组和正常对照组3组，每组8只。睡眠剥夺组从早晨8点始，连续剥夺睡眠72h。正常对照组则置饲养笼中饲养，维持正常的睡眠-觉醒周期。观察其形态学变化。另取24只大鼠分组同上用于丝裂素活化蛋白激酶的检测。采用TUNEL染色法观察睡眠剥夺大鼠的海马神经元形态学变化，观察细胞外信号调节激酶活性的变化和c-Jun氨基末端激酶蛋白表达量的变化。 主要观察指标：①观察睡眠剥夺大鼠海马神经元的形态学变化。②观察海马神经元细胞外信号调节激酶和c-Jun氨基末端激酶表达的变化。 结果：①海马神经元形态学变化：快眼动睡眠剥夺组大鼠CA1和CA3区可见较多的凋亡阳性细胞，主要分布在海马的锥体细胞层。CA2区仅见极少量凋亡细胞，CA4区偶见凋亡细胞。正常对照组和快眼动睡眠剥夺对照组海马组织切片中未见明显阳性细胞。②细胞外信号调节激酶活性的变化：快眼动睡眠剥夺组明显低于快眼动睡眠剥夺对照组和对照组（1764．00&;#177;941．56，6139．67&;#177;2863．62，56昏700&;#177;2763．41，t=3．2111，0．9863，P〈0．05）。③c-Jun氨基末端激酶的阳性表达：快眼动睡眠剥夺组明显高于快眼动睡眠剥夺对照组和对照组（87．5％，25％，75％，t=3．4121．P〈0．05）。 结论：睡眠剥夺可引起大鼠海马神经元丝裂素活化蛋白激酶活性的变化，可能与神经元的凋亡有关。     

硝苯地平控释片治疗老年高血压患者85例

原发性高血压是老年人常见的心血管疾病,以收缩压升高为主要表现,易引起心脑血管损害,甚至致死。由于老年患者器官功能衰退、血管老化,血压缓冲、调节能力降低,若用药选择不当,不仅难以达到预期效果,而且还容易因较多的不良反应诱发或加剧病情。因此,选择安全、有效的药物至关重要。     

hEST2逆转录功能区片段与端粒酶活性相关性

目的：端粒酶是近年来发现的肿瘤重要的标志物，寻求端粒酶活性表达必需序列是研究端粒酶调控机制方法之一。方法：本文通过ＲＴ－ＰＣＲ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ方法检测ｈＥＳＴ２逆转录功能区片段表达。并以端粒酶活性检测ｈＥＳＴ２逆转录功能区片段表达与端粒酶活性之间相关 ，并以端粒酶活性ＴＲＡＰ法为对照。结果：ｈＥＳＴα逆转录功能区片段与端粒酶活性相关性。结论：含有包括端粒酶特异性Ｔ功能区片段在内的７个逆录功能区区域表达与端粒酶活性密切相关，这为端粒酶调控机制及其诊断和抑制研究提供帮助。     

基于多组学的老年衰弱人群生物标志物研究

衰弱是指老年人以肌少症为基本特征的全身多系统的稳态受损，导致生理储备下降、抗疾病能力减退及应激后恢复能力下降的非特异性状态，衰弱的早期诊断对于帮助老年人恢复健康具有重要价值。近年来，随着组学研究的技术进步，为发现早期衰弱潜在的特异性强及稳定可靠的相关生物标志物提供了新的途径。本文整理分析相关研究后，从基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学的角度整理衰弱生物标志物的研究进展，有助于评估衰弱风险，探索衰弱的潜在机制，制订针对性的干预措施，助力老年人健康。     

β-淀粉样蛋白致大鼠Alzheimer病模型的研究

目的 :模拟人类Alzheimer病 (AD)的大鼠病理模型 ,观察其学习记忆及病理性改变。方法 :大鼠双侧海马微量注射聚合态Aβ1 40 制备AD动物模型 ,Y 型迷宫测定大鼠学习记忆能力 ,HE染色、刚果红染色和银染检测病理变化。结果 :海马内注射Aβ1 40 可引起大鼠学习记忆能力下降 ,注射区Aβ沉积 ,神经元丢失及胶质细胞增生 ,神经原纤维缠结。结论 :Aβ1 40 海马内注射能较好的模拟AD的学习记忆障碍、神经元损伤等行为学和病理学等方面的特征 ,作为AD研究较好的动物模型。     

发育大鼠颈脊髓的放射耐受性和分次照射的敏感性

通过对鼠龄为1周和15～18周(成年)大鼠颈脊髓照射,研究鼠龄对单次照射后放射耐受性和分次照射敏感性的影响。材料和方法:实验用1周和15～18周龄的雌性和雄性Wistar大鼠(CPB/WU),用4 MeV光子直线加速器照射,距离100cm,剂量率2.1Gy/min照射1周龄大鼠颈和上胸脊髓8mm段(T_4～T_5),以剂量率为2.2Gy/min照射成年大鼠颈18mm段(T_1～T_2),     

RyR2-shRNA重组慢病毒载体的构建及其对离体心肌细胞RyR2基因表达的影响

目的构建携带RyR2-shRNA的慢病毒载体,并检测其对小鼠离体心肌细胞中RyR2的基因沉默效果。方法设计并合成针对小鼠RyR2基因的shDNA,克隆入含U6启动子和EGFP报告基因的慢病毒载体psiHIV-U6-eGFP,构建表达RyR2-shRNA的慢病毒载体,通过将慢病毒转移质粒和包装质粒共转染293T细胞,得到重组慢病毒载体颗粒,然后离体感染小鼠心肌细胞,采用Real-timePCR检测RyR2在mRNA水平的沉默效应。结果经测序证实RNAi慢病毒载体构建成功并成功包装。流式细胞仪测得重组慢病毒感染小鼠心肌细胞的阳性率达80%以上。Real-timePCR证实,重组慢病毒Lenti-siRyR2感染的小鼠心肌细胞中RyR2在mRNA水平基因抑制率达90%以上。结论成功构建了表达RyR2-shRNA的重组慢病毒表达载体,并在小鼠心肌细胞中实现有效的基因沉默效应。     

生理学实验设计课的创新性探索

该文简要介绍了生理学实验设计课教学的目的、实施方法、教学效果和不足。实验设计可使学生初步掌握医学科学研究的基本程序和方法,激发学生的科研兴趣,培养学生的自学能力、动手能力、科学的创造性思维能力,提高学生的综合素质。     

人β-神经生长因子前体基因的克隆及序列分析

目的 对人β-NGF前体基因的克隆及序列分析，为其在真核细胞中表达并获得具有神经生长因子活性的蛋白及临床应用打下基础。方法 从人血白细胞中提取基因组DNA，采用PCR技术，扩增出含前导肽及信号肽的β-NGF前体基因并与PUC18载体连接，经筛选得到重组质粒PUC18-β-NGF，经酶切及序列分析进行鉴定。结果 经序列测定与Genebank中已知序列(V01511)相比较，完全一致。结论 从人白细胞DNA中获得了人β-NGF前体基因，为神经生长因子的基因治疗提供了条件。