蟾蜍毒素的部分分离纯化及其抗白血病作用

目的:研究蟾酥不同成分对白血病的抑制作用。方法:应用硅胶层析法部分纯化蟾蜍皮脂腺分泌物的提取物;应用反向高效液相色谱检测部分纯化物的组分;苔盼蓝拒染法检测细胞增殖;流式细胞仪分析细胞周期。结果:硅胶层析部分纯化,制备了4种混合物,其中乙醇提取物中含有6种组分,可能含有蟾蜍灵。4种混合物均可抑制人白血病HL60细胞增殖,其中3种的抑制作用明显强于单用蟾蜍灵。流式细胞仪分析显示4种混合物均可诱导细胞凋亡,并且不引起细胞周期阻滞。结论:蟾蜍皮脂腺分泌物的部分纯化物可能通过诱导不伴有细胞周期阻滞的凋亡抑制白血病细胞增殖。     

吉非替尼维持治疗老年晚期肺腺癌的 疗效研究

 摘要：目的评价老年晚期肺腺癌患者诱导化疗后给予吉非替尼单药维持治疗的临床价值。方法2006年1月 —2008年6月, 老年晚期肺腺癌患者最后一次化疗结束后疗效为部分缓解(PR)或稳定(SD)的为吉非替尼维 持治疗组,疾病复发后为吉非替尼二线治疗组。入组后给予口服吉非替尼250mg/d,持续服用到疾病进展或 死亡。结果共有40例患者入组,其中吉非替尼维持治疗组为21例,二线治疗组为19例。维持治疗组总有效率 (RR)52.38% (11/21),其中1例CR,二线治疗组RR为21.05% (4/19),两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。 吉非替尼维持治疗组的中位总生存时间(OS)为16.19月,显著长于二线治疗组的7.90月(P<0.05)。结论吉非 替尼维持治疗老年晚期肺腺癌患者有较好的近期疗效和生存益处。     

MEK/ERK抑制剂影响胃癌细胞对5-FU敏感性及其机制的探讨

目的:探讨MEK/ERK特异性抑制剂PD98059在5-氟尿嘧啶(5-FU)抗胃癌细胞增殖中的作用。方法:应用5-FU与MEK/ERK抑制剂(PD98059)处理胃癌细胞,MTT法检测细胞增殖状态,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测ERK和p-ERK的表达。结果:随着5-FU浓度的增加,5-FU对3种胃癌细胞系的增殖抑制率逐渐增大。5-FU作用MGC803细胞72 h的抑制率显著高于48和24 h,t值分别为16.477和25.349,P值分别为0.002和0.001。与对照相比,5-FU作用MGC803细胞48和72 h可引起显著的凋亡,t值分别为-20.576和-40.389,P值分别为0.015和0.001。5-FU处理胃癌MGC803细胞48 h,与对照相比pERK表达一过性下降然后升高。20μmol/L的PD98059联合5-FU作用48 h,可明显抑制pERK的表达,抑制率为22%;同时可明显增加细胞凋亡,增加率为20%。结论:MEK/ERK信号传导通路在5-FU作用胃癌细胞的过程中被激活,联合应用MEK/ERK信号通路抑制剂可部分逆转ERK的活化,增加胃癌细胞凋亡,从而增加胃癌细胞对5-FU的敏感性。     

蟾蜍灵对食管癌ECA109细胞凋亡的影响及机制探讨

目的 观察蟾蜍灵对食管癌ECA109细胞凋亡的影响并探讨其机制.方法 MTT法检测蟾蜍灵对细胞的增殖抑制作用;流式细胞术分析细胞凋亡情况;Western-Blot法检测凋亡抑制蛋白survivin,caspeas-3蛋白的表达.结果 随着蟾蜍灵浓度及作用时间的增加,细胞存活率逐渐降低(P＜0.05),细胞凋亡率明显增高(P＜0.05);随着药物浓度增加,survivin蛋白表达逐渐下降,同时活化caspase-3.结论 蟾蜍灵可诱导食管癌ECA109细胞凋亡,其机制可能与抑制survivin蛋白和活化caspase-3有关.     

地塞米松诱导CEM细胞凋亡过程中Survivin和Caspase-3基因表达的研究

目的探讨地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导CEM细胞凋亡过程中生存素(Sur-vivin)和半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)基因表达。方法台盼蓝拒染法测定细胞活力,绘制增殖曲线;流式细胞仪解析DEX诱导CEM细胞凋亡;Westernblot检测Survivin和Caspase-3蛋白表达;RT-PCR检测Survivin基因表达。结果1)DEX以时间、剂量依赖方式抑制CEM细胞增殖。0.1~10μmol/LDEX于48h开始明显抑制CEM细胞的生长。24、48、72h抑制细胞增殖50%的药物浓度分别为9.8、0.9和0.4μmol/L。2)随DEX剂量增大亚二倍体细胞百分数逐渐增加。5μmol/LDEX处理12~48h,亚二倍体细胞从14.9%升至46.2%;3)5μmol/LDEX处理12~72h,Survivin蛋白从54.6%下调至9.7%;SurvivinmRNA从76.4%(6h)降至18.3%(72h);4)DEX作用12h之内只能检测到非激活状态的procaspase-3,处理24h后出现17×103活性亚基,直至72h。结论DEX诱导CEM细胞凋亡时下调Survivin基因表达,活化Caspase-3。