简易组织芯片技术的建立及其在肝细胞癌研究中的意义

目的探讨石蜡包埋组织芯片手工制作技术简易方法学及其在肝细胞癌（HCC）研究中的意义。方法选取病理科档案材料中182份HCC组织、23份癌旁肝组织和20份正常肝组织蜡块,采用自制打孔器、采样器,手工制作组织芯片,并进行HE染色和谷氨酰胺合成酶（GS）抗体免疫组化染色,光镜观察并计数GS阳性细胞在各组的分布。结果手工制作组织芯片排列整齐有序,无移位,芯点基本完整。GS阳性表达在HCC组织（77．5％）明显高于癌旁肝组织（4．3％）和正常肝组织（5．0％）,差异有统计学意义（P〈0．05）。且GS表达与TNM分期、转移和术后复发有关。结论手工制作组织芯片能高效率检测GS抗体在肝细胞癌样本中的表达,具有快速、方便、经济、准确等优点。     

肝细胞癌组织中TTF-1胞质表达及意义

研究表明,甲状腺转录因子-1（thyroid tranacription factor-1,TTF-1）以细胞核染色摸式表达于肺、甲状腺及其肿瘤中,而在胞质中表达的报道较少。我们采用免疫组化方法观察肝细胞癌中TTF-1在胞质表达的情况,并与肝转移性、肾细胞癌、胆管细胞癌、胃结肠腺癌及卵巢腺癌进行比较,探讨TTF-1胞质染色对肝细胞癌的特异性和敏感性。[第一段]     

病理大切片制作及其诊断价值

浙江省丽水市中心医院病理科自2003年开展对大切片制作进行了系列性、探索性技术研究,现将有关大组织块取材、描述记录、制片及缩小方格器的设计和应用,介绍如下。1材料与方法1.1缩小方格器的制作①缩小方格器(简称缩小器)是一种定位性测量器,选用厚0.3cm的长方形透明有机玻璃2     

葡萄糖转运蛋白1、缺氧诱导因子-1α和Ki-67在肝细胞癌中的表达及其相关性研究

目的探讨葡萄糖转运蛋白1（Glutl）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和Ki-67在肝细胞癌中的表达及其相关性。方法运用组织芯片技术,通过免疫组织化学Envision法检测171例肝细胞癌组织、55例癌旁组织、22例正常肝组织中Glutl、HIF-1α和Ki-67的表达情况,并结合临床病理因素进行分析。结果Glutl、HIF-1α和Ki-67在171例肝细胞癌组织中的阳性表达率分别为15．2％、19．9％和66．1％,明显高于其在癌旁肝组织（1．8％、1．8％和5．5％）和正常肝组织（均阴性）中的表达率（P〈0．05）。Glutl和HIF-1α表达与肝细胞癌分化程度和TNM分期有关（P〈0．01,P〈0．05）;Ki-67表达与肝细胞癌分化程度有关（P〈0．01）。肝细胞癌组织中Glutl与HIF-1α的表达呈正相关（r1=0．553,P〈0．05）;Glutl、HIF-1α与Ki-67均呈正相关（r2=0．560,r3=0．613,P〈0．05）。结论Glutl、HIF-1α和Ki-67在肝细胞癌的发生发展中起着不同程度的作用,联合检测Glutl、HIF-1α和Ki-67可能有助于判断肝细胞癌的恶性程度、转移潜能及预后分析。     

原位杂交法研究表皮生长因子在胃癌中的表达及临床意义

目的:研究表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)在胃癌中的表达及临床意义.方法:用原位杂交的方法检测68例胃癌和20例癌旁胃粘膜组织中EGF的表达.结果:胃癌和癌旁胃黏膜组织EGF阳性表达率分别为41.1%(28/68)和5%(1/20),EGF的表达与胃癌的Lauren's分型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、血管内瘤栓、远处转移及病理分期相关.结论:EGF检测可作为判定胃癌生物学行为的一项重要指标.     

早期胃癌56例临床病理分析

早期胃癌是指癌组织浸润仅限于黏膜固有层或穿透黏膜肌层而达黏膜下层者,不论肿瘤体积大小,是否有胃周围淋巴结转移[1].诊断和治疗早期胃癌是提高胃癌生存率的关键,总结早期胃癌临床和病理特点有助于提高胃癌的早期诊断水平.现将本院1997至2002年经手术和病理证实的早期胃癌56例进行临床病理分析.     

P70S6K在Xp11.2易位/TFE3基因融合相关性肾癌中的表达及临床意义

目的检测P70S6K在Xp11.2易位/TFE3基因融合相关性肾癌(renal cell carcinoma associated with Xp11.2 translocation/TFE3 gene fusion,TFE3 RCC)中的表达,探讨其在TFE3 RCC发生、发展中的作用及临床意义。方法采用免疫组化法检测23例确诊的TFE3 RCC、14例肾透明细胞癌(clear cell RCC,CCRCC)和6例乳头状肾细胞癌(papillary RCC,PRCC)组织中P70S6K的表达,观察其表达与三种RCC的关系,同时观察P70S6K表达与TFE3 RCC发生、发展和相关临床病理参数的关系。结果 P70S6K在TFE3 RCC组织中的表达(91.3%)明显高于其在CCRCC组织(64.2%)和PRCC组织中的表达(66.6%),差异有显著性(P0.05)。P70S6K在TFE3 RCC组织中阳性表达水平的H-score评分值(88.2±9.8)亦显著高于其在CCRCC组织(54.4±7.6)和PRCC组织(43.7±6.2)中阳性表达水平的H-score评分值,差异具有显著性(P0.05)。P70S6K表达与TFE3 RCC患者年龄、有无淋巴结转移和脉管瘤栓有关,与患者性别、肿瘤直径等临床病理参数无关。结论与CCRCC和PRCC组织相比,TFE3 RCC组织中P70S6K表达显著增高,有助于TFE3 RCC的鉴别诊断。P70S6K在TFE3 RCC组织中高表达,同时提示mTOR信号通道在TFE3 RCC的发生、发展中可能起重要作用。为TFE3 RCC的靶向治疗寻找潜在药物靶点提供一定的理论基础。     

乳腺癌ER、PR和CerbB-2免疫组化对照芯片制作及其应用

目的:应用组织芯片原理手工制作乳腺癌雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和原癌基因CerbB-2免疫组化对照芯片.方法:选取ER、PR、CerbB-2免疫组化表达水平为-、+、++和+++的乳腺癌标本和相应的组织蜡块,使用自制的组织芯片采样器和改良的简易组织芯片制作方法制成组织芯片蜡块,经过连续切片获得对照芯片,每张对照芯片包含4个组织芯点位,依次为阴性对照和3个等级表达阳性对照.将常规工作中测试片裱贴在对照芯片旁边,同时进行免疫组化EnVision染色.结果:乳腺癌ER、PR、CerbB-2免疫组化染色结果能明确地在对照芯片中找到参照,测试组织是否阳性有了明确的对照.结论:乳腺癌ER、PR、CerbB-2免疫组化染色中设立等级对照十分必要,手工自制对照芯片方法简单,实用性强.     

贝伐单抗结合紫杉醇对肺癌小鼠的治疗效果及对癌组织S100A4和MMP-9的影响

目的：探讨贝伐单抗结合紫杉醇对C57BL/6肺癌小鼠的治疗效果及对癌组织S100A4与MMP-9的影响。方法：应用鼠源性Leweis肺癌瘤株制备瘤液,对SPF级健康C57BL/6小鼠进行分组,将实验小鼠分为正常组（未接种瘤液）、模型组（接种瘤液）、贝伐单抗组（接种瘤液）、紫杉醇组（接种瘤液）、联合组（接种瘤液）,每组8只。正常组和模型组腹腔注射0.9%氯化钠溶液;贝伐单抗组腹腔注射15 mg/kg贝伐单抗;紫杉醇组腹腔注射10 mg/kg紫杉醇;联合组分别腹腔注射15 mg/kg贝伐单抗和10 mg/kg紫杉醇。所有小鼠2周后处死,摘眼球取血和取瘤称重。比较各组小鼠的抑瘤率,酶联免疫吸附法检测IL-2、IL-6、TNF-α、VEGF、S100A4与MMP-9含量,流式细胞技术检测T淋巴细胞亚群,Western blot法测定VEGF水平。结果：治疗后,贝伐单抗组、紫杉醇组、联合组瘤重,IL-2、IL-6及TNF-α含量、VEGF水平、S100A4与MMP-9含量显著低于模型组,联合组抑瘤率明显高于贝伐单抗组和紫杉醇组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;联合组IL-2、IL-6及TNF-α含量、VEGF水平、S100A4与MMP-9含量显著低于贝伐单抗组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。贝伐单抗组、紫杉醇组以及联合组的CD3+、CD4+、CD8+、CD4/CD8的含量与模型组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：贝伐单抗结合紫杉醇能抑制C57BL/6肺癌小鼠肿瘤的生长,能改善其免疫功能,降低VEGF、S100A4与MMP-9的含量。     

细胞周期蛋白D1,P63蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:探讨细胞周期蛋白D1(CyclinDl),P63蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及临床意义.方法:应用免疫组化EnVision二步法检测71例NSCLC和15例肺良性病变组织中两种基因蛋白的表达.结果:在肺鳞癌、肺腺癌、肺良性病变中CyclinDl的阳性表达率分别为64.3%(18/28),67.5%(27/40)和13.3%(2/15);P63蛋白阳性表达率分别为78.6%(22/28),27.5%(11/40)和26.7%(4/15).有淋巴结转移组CyclinD1和P63阳性率明显高于无淋巴结转移组,P＜0.01;Ⅲ-Ⅳ期CyclinD1表达的阳性率高于Ⅰ-Ⅱ期,P＜0.01.结论:CyclinD1和P63的过表达与肺癌的发生、发展有关.