人miRNA let 7a2质粒的构建及其表达

目的构建人miRNA let 7a2真核表达质粒,检测其在肺癌细胞A549中的表达。方法以人肺腺癌A549细胞总RNA为模板,将RT PCR扩增let 7a2的前体（pre let7a2）序列, 克隆至pSilencer4.1 CMV neo表达载体中,构建pSilencer4.1 let7a2重组质粒,转染A549细胞,采用RT PCR法检测pre let7a2的表达;构建let 7a2靶序列-报道基因融合质粒pMIR Report let7a2T,与pSilencer4.1 let7a2质粒共转染A549细胞,测定相对荧光素酶活性,以检测成熟let7a2在A549细胞中的表达及作用;采用MTT比色法检测pSilencer4.1 let7a2转染对A549细胞增殖的影响。结果构建的人let 7a2真核表达质粒pSilencer4.1 let7a2和let7a2靶序列-报道基因融合质粒pMIR Report let7a2T经酶切及测序鉴定正确;pSilencer4.1 let7a2质粒转染A549细胞后,RT PCR检测pre let7a2表达较对照组明显增强;MTT比色法显示let 7a2对A549细胞增殖有抑制作用。pSilencer4.1 let7a2 质粒和pMIR Report let7a2T质粒共转染A549细胞后,通过报告基因检测相对荧光素酶活性较对照组降低,显示let 7a2表达质粒转染A549细胞后,可有效表达let 7a2并转变为成熟的具有生物学活性的let 7a2。 结论成功构建了人let 7a2真核表达质粒,并在肺腺癌细胞A549中有效表达。     

双源CT血管成像技术对椎-基底动脉供血不足病因的诊断价值

目的利用双源CT血管造影技术（DSCTA）观察椎-基底动脉常见病变,探讨双源CT血管成像对椎-基底动脉供血不足（VBI）病因的诊断价值。 方法应用双源CT对43例临床拟诊为VBI的患者行椎-基底动脉CTA检查,原始数据于高级后处理工作站MMWP8818进行重建后处理,并利用相关分级法对椎-基底动脉进行评价。结果43例患者86支椎动脉中有6例12支椎动脉显示正常。余37例74支椎动脉中,局限性狭窄27支,其中粥样硬化斑块所致21支,颈椎增生压迫所致6支;迂曲18支;先天变异14例18支;椎动脉瘤1支。部分椎动脉合并两种以上病变。通过DSCTA检查,43例拟诊VBI患者中37例明确了病因（约占86%）。其中16例患者同时与数字减影血管造影（DSA）检查进行对照,对局限性狭窄的显示,CTA的灵敏度为84.6%,特异度为94.7%。 结论DSCTA各种后处理功能联合应用,对显示椎-基底动脉病变有明显优势,可作为VBI的常规影像检查方法。     

慢性HBV活动性感染者外周血淋巴细胞泛素mRNA的表达及临床意义

目的探讨外周血淋巴细胞泛素mRNA的表达与慢性HBV活动性感染的关系及临床意义。方法96例慢性HBV感染并有炎症活动者,其中慢性乙肝组（40例）,活动性肝炎肝硬化组（30例）,慢性重型肝炎组（26例）,同时设立健康对照组（26例）。采用实时荧光PCR检测外周血淋巴细胞泛素mRNA的表达,以β actin作为内参。组间差异采用单因素方差分析。结果各组患者外周血淋巴细胞泛素mRNA的表达水平均低于对照组（P＝0.00）,其中慢性重型肝炎组表达水平最低,活动性肝硬化组次之。结论慢性HBV感染并有炎症活动者均存在外周血淋巴细胞泛素mRNA表达不足,病情越重表达水平越低;外周血淋巴细胞泛素mRNA的低表达可能与疾病的发生发展有关。     

RhG CSF对快速老化模型小鼠P10脑组织炎症反应的干预作用

目的观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG CSF)对快速老化模型小鼠P10(SAMP10)炎症反应的抑制作用。方法随机将48只SAMP10分为对照组、rhG CSF治疗组,每组24只。治疗组皮下注射rhG CSF100?μg/(kg·d),对照组给予等体积生理盐水,连续7?d。分别于给药结束后第7、14、28、56天取脑组织进行免疫荧光染色,检测TNF α和iNOS的表达,用Image proPlus图像分析软件,分析TNF α和iNOS阳性细胞百分率、总面积及灰度值。结果治疗组小鼠脑组织额叶皮质TNF α和iNOS阳性细胞百分率、总面积及灰度值明显减少（P＜0.05）。结论rhG CSF能明显抑制SAMP10脑组织炎症反应。     

膀胱移行细胞癌中Survivin表达的意义

目的探讨膀胱移行细胞癌（TBCC）中Survivin表达的意义。方法应用免疫组织化学一步法、RT PCR法检测40例BTCC和12例正常膀胱粘膜中Survivin和Survivin mRNA的表达,Western blot方法检测40例BTCC与32例非BTCC患者尿液细胞中Survivin的表达。结果免疫组织化学方法显示,Survivin在BTCC中阳性表达率为95.0%,在正常膀胱粘膜中无表达（P<0.01）。RT PCR显示,Survivin mRNA在BTCC中阳性表达率为100.0%,在正常粘膜中无表达（P<0.01）。Western blot显示,Survivin在BTCC患者尿液细胞中阳性表达率为95.0%,在非BTCC患者中无表达(P<0.01)。3组中Survivin的表达与BTCC的分级、分期密切相关（P<0.01）。结论Survivin在BTCC中高表达,因而可作为BTCC的一个良好的诊断和预后指标。     

GnRHa和孕三烯酮对异位子宫内膜细胞生长及凋亡的影响

目的探讨GnRHa及孕三烯酮对体外培养的异位子宫内膜间质(ES)细胞生长和凋亡的影响,及两种药物作用后基质金属蛋白酶 3(MMP 3)在ES细胞表达的变化。方法以不同浓度的GnRHa和孕三烯酮对体外培养的ES细胞分别进行处理,倒置相差显微镜下观察细胞的生长状态,免疫组化法鉴定间质细胞。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测药物作用0～60?h的细胞抑制情况,并绘制细胞生长曲线;采用流式细胞仪检测GnRHa和孕三烯酮作用48h后异位内膜间质细胞周期和凋亡率的变化。采用免疫组化法检测不同浓度GnRHa和孕三烯酮作用48h后MMP 3在异位内膜表达的变化。结果GnRHa和孕三烯酮可抑制细胞的生长增殖,并呈时间和剂量依赖方式。药物作用48?h后,各组细胞均发生细胞周期阻滞,G1期细胞增加,S期细胞减少,各组凋亡率明显升高(P<0.05);免疫组织化学表明,两种药物均可降低异位子宫内膜MMP 3的表达;且GnRHa诱导异位子宫内膜细胞的凋亡、降低其MMP 3表达的作用强于孕三烯酮(P<0.05)。结论GnRHa和孕三烯酮均可明显抑制体外培养的ES细胞的生长增殖,诱导其凋亡,同时降低MMP 3的表达,且GnRHa上述作用的效果更加明显。     

胃癌组织中SEPT9_i1和PLZF的表达及其临床意义

目的 探讨SEPT9亚型1蛋白（SEPT9_i1）和早幼粒细胞白血病锌指蛋白（PLZF）在胃癌组织中的表达水平,分析两者与胃癌临床病理特征及预后的关系。方法 采用免疫组化EnVision二步法检测75例胃癌组织和62例癌旁组织石蜡切片中SEPT9_i1和PLZF表达情况,以阳性细胞百分比与着色强度乘积值分为低表达（＜5分）和高表达（≥5分）,分析两者表达与胃癌临床病理参数（性别、年龄、临床分期、肿瘤部位、Lauren分型、肿瘤大小、分化程度、浸润深度和淋巴结转移）及预后的关系;同时采用Spearman相关分析胃癌组织中SEPT9_i1和PLZF表达的相关性。结果 胃癌组织SEPT9_i1高表达率高于癌旁组织（65.33％ vs. 37.10％, P＜0.05）,而PLZF高表达率低于癌旁组织（41.33％ vs. 85.48％, P＜0.05）;胃癌组织中SEPT9_i1与PLZF的表达呈负相关（r=-0.299, P=0.009）,且两者表达与临床分期及淋巴结转移均有关,此外SEPT9_i1与浸润深度有关,而PLZF与分化程度有关（P＜0.05）。SEPT9_i1高表达者的中位总生存期（OS）为21.5个月,低于低表达者的32.0个月（P＜0.05）;PLZF高表达者的中位OS为26.5个月,与低表达者31.0个月的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 SEPT9_i1在胃癌组织中高表达,PLZF为低表达,两者均与临床分期及淋巴结转移有关,且SEPT9_i1表达与胃癌患者预后有关,提示两者可能在胃癌的发生发展中起重要作用,可用于辅助胃癌的诊断和病情评估。     

双手麻木无力4年、畸形2年

患者男，69岁，双手麻木无力4年、畸形2年，于2003年1月26日人院。患者4年前无明显诱因出现双手麻木，进行性加重，并出现精细动作障碍，2年前开始出现双手畸形、怕冷，四季戴手套，腕部以下痛、温、触觉减退。查体：一般情况好，五官端正，皮肤黏膜、全身淋巴结无异常，颈软，心、肺、腹(一)，肢体无凹陷性水肿，胸腹部皮肤少量色素沉着，左乳晕     

AF系统内固定治疗胸腰椎椎体骨折(附26例报告)

对26例胸腰椎骨折患者行后路AF钉复位、固定、植骨融合，并对骨折椎体高度、脊椎Cobb角的变化以及神经功能恢复程度进行随访。结果术后随访6～24个月，无断钉及内固定物松动，术后伤椎椎体高度和Cobb角恢复均满意，神经功能按Frankel分级有1～3级改善。认为AF系统内定治疗胸腰椎椎体骨折操作简单，固定可靠、复位满意，疗效优良。     

指掌侧推进皮瓣修复手指屈曲挛缩畸形

自2003年1月始应用指掌侧推进皮瓣法矫正手指屈曲挛缩畸形5例8指，获得良好治疗效果。 1一般资料 本组5例8指，男3例5指，女2例3指。年龄9～55岁。示指2指，中指1指，环指3指，小指2指。创伤或感染挛缩3例5指，烧伤瘢痕挛缩1例2指，掌腱膜挛缩症1例1指。病程最短1年，最长9年。