寄生于猫的马来西亚弓首蛔虫在我国的发现

目的对采集于广州1只猫小肠内、形态与犬弓首蛔虫相似的寄生虫进行分子生物学鉴定。方法以核糖体DNA(rDNA)内转录间隔区(ITS)作为遗传标记对虫体进行种特异PCR鉴定,并测定了ITS-2序列,将序列与犬弓首蛔虫、猫弓首蛔虫、马来西亚弓首蛔虫序列进行比较,得到其序列的相似性和差异性。结果用马来西亚弓首蛔虫种特异性引物对试验虫体DNA进行扩增时,能扩增出明显的DNA片段,而犬弓首蛔虫、猫弓首蛔虫种特异性引物对试验虫体DNA扩增时不能扩增出任何DNA片段。试验虫体的ITS-2序列与马来西亚弓首蛔虫的ITS2序列相似性为100%,与猫弓首蛔虫的相似性为88.7%～89.0%,与犬弓首蛔虫相似性为75.8%。结论经分子生物学和形态学鉴定,从广州猫体采集的蛔虫为马来西亚弓首蛔虫,在我国为首次发现。     

弓形虫致密颗粒蛋白的生物学功能及免疫原性研究的新进展北大核心CSCD

刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)可引起严重的人兽共患弓形虫病,给全世界经济造成巨大的损失,给公共卫生安全带来巨大的隐患。致密颗粒(dense granule)分泌的致密颗粒蛋白(dense granule proteins,GRAs)参与调节纳虫泡(parasitophorous vacuole,PV)及纳虫泡膜(parasitophorous vacuole membrane,PVM)的形成并能维持其结构稳定性,部分GRAs可参与宿主细胞的转录。近几年来,不断发现了多种新的GRA蛋白家族新成员,并随着对该家族成员研究的逐步深入,发现GRAs是研制抗弓形虫疫苗的候选分子之一。本文综述了弓形虫致密颗粒蛋白的生物学功能和免疫原性研究的新进展,旨在为研究弓形虫致病机理和研发新的抗弓形虫疫苗提供思路。     

PCR-SSCP技术及其在寄生虫学上的应用

聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术是一种简便、快速、灵敏的基因突变分析方法，能有效地检出碱基突变。目前，该方法在寄生虫学领域已得到日益广泛和深入的应用，尤其是近几年来用于寄生虫的分子分类学、分子遗传学、虫种及虫株鉴定等方面的研究已取得了很大的成功。本文综述了该技术的基本原理、影响因素、研究进展及其在寄生虫学方面的应用。     

MiR-36f对猪蛔虫幼虫感染力和发育的影响（英文）北大核心CSCD

目的探讨猪蛔虫虫卵和幼虫期特异表达的miR-36f的是否与猪蛔虫幼虫的感染性和发育有关。方法将合成的miR-36f的模拟物,抑制剂以及模拟物对照和抑制剂对照通过浸泡的方法被猪蛔虫三期幼虫吸收后,分别将这四组幼虫通过灌胃的方式感染小鼠,以不作任何处理的幼虫感染小鼠作为空白对照组,四天后采用贝尔曼法收集各组小鼠肺和肝的幼虫。对各组回收幼虫的数量以及幼虫的长度和宽度进行测量,并采用qRT-PCR方法对miR-36f的两个靶基因OST48和cytochrome b进行定量分析。结果抑制miR-36f以后,miR-36f的两个靶基因OST48和cytochrome b均被下调,幼虫发育和感染力受到抑制。结论提示猪蛔虫的miR-36f与幼虫个体发育和感染力有关。     

弓形虫胚层发育相关蛋白基因的克隆和序列分析

目的 对15个弓形虫虫株的弓形虫胚层发育相关蛋白(TgERP)基因进行克隆和序列分析,了解其变异和进化情况,为评价该蛋白在血清学诊断和疫苗防疫应用上的价值提供理论基础。方法 设计TgERP基因的PCR引物,对15个弓形虫虫株进行PCR扩增和序列测定,测序结果利用Puzzle 5.2、Paup 4.0和DNAStar 5.0软件进行分析。结果 TgERP基因包含的完整开放阅读框(ORF)长度均为315 bp,A+T含量在46.67%～46.98%之间,仅有1个碱基发生变异,变异率为0%～0.32%。编码104个氨基酸,变异率在0%～0.96%之间。系统进化分析显示,TgERP基因序列虽然能够将弓形虫I型虫株与II/III型虫株区分开,但却不能区分所有基因型的虫株。结论 TgERP基因在各基因型虫株中十分保守,不适合作为遗传标记分子来区分不同基因型的弓形虫虫株。     

表达谱基因芯片技术及其在兽医学上的应用

20世纪90年代初兴起的人类基因组计划(HGP),其研究重点现已从结构基因组迈向了功能基因组的研究。揭示生命的本质。阐明基因的功能是后基因时代的重要任务。随之而产生的基因芯片(genecKp)技术,为功能基因组学研究提供了强有力的手段。由于基因芯片具有高通量和平行检测等特点。所以该技术自1989年提出并取得国际专利以来。已经在基因组测序、基因表达及功能分析、     

Contracaecum ogmorhini复合种分类鉴定特异PCR方法的建立

根据作者已测得的Contracaecumogmorhini复合种 (包括Contracaecumogmorhini和Contracaecummargolisi)线粒体DNAcox1基因的部分核苷酸序列 ,设计、合成了一对针对C .margolisi的特异性引物(CHL1,CHL2 ) ,通过PCR条件优化和扩增 ,C .margolisi扩增出 1条清晰的 30 6bp大小的特异DNA片段 ,而其他虫体如C .ogmorhini、拟地新线虫、鲁道夫对盲囊线虫、猪蛔虫、犬弓首蛔虫、猪有齿食道口线虫等 14个对照样本均未扩增出特异性片段。敏感性实验可检测到C .margolisiDNA的最低浓度为 0 34ng μL ,从而初步建立了鉴定C .ogmorhini复合种的特异PCR方法。该方法特异性强、敏感度高、重复性好 ,不仅可用于C .ogmorhini复合种的分类鉴定 ,也可用于它们所导致的寄生虫病的诊断、防制和流行病学调查 ,同时也为C .ogmorhini复合种在中国的分布及其进一步的分类学研究提供了重要依据和手段     

我国6个弓形虫虫株线粒体cox1部分序列的比较分析

目的对采自我国的6个弓形虫虫株线粒体细胞色素c氧化酶第Ⅰ亚基（cox1）基因部分序列（pcox1）进行比较分析，并与RH株的相应序列进行比较，研究弓形虫线粒体cox1基因与弓形虫的种群遗传关系。方法应用聚合酶链反应（PCR）扩增弓形虫不同虫株的pcox1，并进行序列分析比较。结果每个虫株都获得599bp的pcox1序列，比较分析表明，弓形虫不同虫株的pcox1序列之间没有差异。结论弓形虫pcox1序列不能作为种群遗传变异研究的标记，也与弓形虫毒力无关。研究结果为进一步研究弓形虫的群体遗传结构奠定了一定的基础。     

绒山羊和绵羊源东毕吸虫ITS rDNA的PCR扩增及序列分析

目的扩增绒山羊和绵羊源东毕吸虫的ITS rDNA序列并进行分析比较。方法运用PCR方法，以保守引物BD1和BD2扩增从黑龙江绒山羊和绵羊体内分离的东毕吸虫（Oriemobilharzia spp．）rDNA的内转录间隔区（ITS-1及ITS-2）。PCR产物经测序后进行序列分析。结果黑龙江绒山羊和绵羊东毕吸虫的ITS序列总长均为875bp，其中ITS-1序列长为384Up，5．8S序列长为159Up，ITS-2序列长为332Up。黑龙江绒山羊和绵羊东毕吸虫的ITS序列相似性为99．9％，只有一个碱基差异，存在于ITS-2序列中。结论本研究在国际上首次报道了绒山羊和绵羊东毕吸虫的ITS序列，证实绒山羊和绵羊源东毕吸虫代表同一个种。这些结果为东毕吸虫分子生物学的进一步研究奠定了基础，并为寄生虫分子系统学研究提供了新资料。