医师工作倦怠与职业紧张和应对资源的关系评价

目的探讨医师工作倦怠与状及职业紧张、应对资源对医师工作倦怠的影响。方法从3所省市级医院随机抽取561名各科临床医师,采用MBI—GS和OSI—R对其工作倦怠、职业紧张和应对资源进行测量．结果外科、内科医师的工作倦怠高于其他临床科室（P〈0．05）;0-40岁的医师衰竭得分最高（P〈005）;业低效能感随年龄的增高而下降、随学历的增高而增高僻〈0．05）;职业紧张和应对资源的性质不同对医师工作倦怠的影响也不同,衰竭的主要预测变量有任务过重、责任感、工作环境、娱乐休闲和自我保健等（P〈0．05）,消极怠慢的主要预测变量有任务不适、任务过重和责任感等（P〈0．05）,专业低效能感的主要预测变量为任务不适、社会支持和理性处事等（P〈0．05）．结论降低或保持适度的职业任务量、职业责任感,明确职工工作要求和工作中的角色与职责,丰富其业余生活、提高其自我保健能力与理性处事能力是预防医师工作倦怠的重要措施．     

节律紊乱与苯影响小鼠肝脂质代谢的独立和交互作用研究

目的 观察节律紊乱和苯单独作用及联合作用时,雌性小鼠肝脂质代谢的变化.方法 通过固定光照周期和定期改变光照周期的方法维持实验动物节律正常或使其节律发生紊乱.选用96只C57BL/6J小鼠,根据体重随机分成节律正常组和节律紊乱组,节律正常组在试验期间均采用常规光照周期,即光照期为8:00 pm～8:00 am,黑暗期为8...     

血清前白蛋白、COMP蛋白及维生素D检测在类风湿性关节炎中的诊断价值分析

目的 研究血清前白蛋白、血清软骨寡聚基质蛋白（cartilage oligomeric matrix protein, COMP）及维生素D检测在类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）中的临床诊断价值。方法 选取早期RA患者42例设为实验组,另选取同时期收治非RA的其他风湿病患者38例设为对照组。采用免疫比浊法检测各组血清前白蛋白,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清COMP蛋白、维生素D表达水平,分析各项指标单独及联合检测对RA的诊断价值。结果 实验组血清前白蛋白、COMP蛋白表达水平显著高于对照组（P<0.05）,实验组维生素D表达水平显著低于对照组（P<0.05）。单独检测时,血清前白蛋白、维生素D敏感度较高,COMP蛋白特异度较强,三者联合检测ROC曲线下面积（AUC）、灵敏度、特异度、约登指数较单独检测升高。结论 血清前白蛋白、COMP蛋白、维生素D可作为RA早期诊断的生物学标记物,三者联合检测较单独检测更具有临床诊断价值。     

成纤维细胞生长因子-21表达变化对3T3-L1脂肪细胞成纤维细胞生长因子受体及脂肪细胞因子的影响

目的 探讨FGF-21表达变化对FGF相关受体(FGFRs)和脂肪细胞因子表达的影响.方法 设计并构建2条针对小鼠FGF-21基因的短发夹状RNA(shRNA)序列,运用双荧光蛋白检测系统初步验证其有效性,筛选出抑制有效的pGenesil-FGF21重组质粒,分别用FGF-21过表达质粒pcDNA-FGF21和FGF-21 RNAi表达载体pGenesil-FGF21转染3T3-L1脂肪细胞,采用荧光定量PCR法检测FGF-21、FGFRs、脂联素、Visfatin以及瘦素(Leptin) 的mRNA表达水平.结果 成功构建2条FGF-21-shRNA重组质粒.转染上述重组载体的细胞内,两组pGenesil-FGF21 GFP平均荧光强度/RFP平均荧光强度均低于阴性对照组(均P<0.05),且pGenesil-FGF21-1组更低.转染pcDNA-FGF21的3T3-L1脂肪细胞内FGF-21 mRNA表达明显增加(P<0.01),转染pGenesil-FGF21-1的细胞内FGF-21 mRNA表达降低77.8%(P<0.05).FGF-21过表达的脂肪细胞内以β-klotho和FGFR1 mRNA表达明显升高,而Leptin mRNA表达明显降低;而FGF-21表达缺陷时则相反(均P<0.05).结论 FGF-21可能主要通过β-klotho和FGFR1途径激活受体后信号系统,并且可能通过影响脂肪细胞因子表达从而对代谢发挥其调控作用.     

肿瘤坏死因子α诱导的胰岛素抵抗对糖脂代谢相关细胞因子的影响

目的探讨肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导的胰岛素抵抗（IR）对小鼠糖脂代谢相关细胞因子的影响。方法用静脉葡萄糖耐量试验和3-[^3HI葡萄糖为示踪剂的扩展胰岛素钳夹技术评价不同TNF-α剂量组及对照（NC）组小鼠胰岛素敏感性和糖脂代谢的变化,用RT-PCR、western blot和ELISA测定脂联素和内脏脂肪素表达水平的变化。结果HTNF-α组小鼠FBG、Ins、FFA水平及糖耐量和胰岛素释放水平变化较MTNF-α和LTNF-α组更明显。胰岛素钳夹术中,与NC组相比,HTNF-α组Ins对FFA的抑制作用明显障碍,葡萄糖输注率明显降低,基础葡萄糖清除率（GRd）和肝糖输出率（HGP）明显升高。钳夹稳态时,HTNF-α组GRd的增加明显低于NC组,NC组HGP被完全抑制,而HTNF-α组仅被部分抑制。HTNF-α组脂肪组织脂联素和内脏脂肪素mRNA表达及血浆脂联素和内脏脂肪素水平也明显低于NC组。结论脂联素、内脏脂肪素的变化在TNF-α诱导的IR中可能具有重要作用。     

骨髓源性间充质干细胞联合来氟米特对小鼠T淋巴细胞的免疫调节作用

目的 探讨骨髓源性间充质干细胞(BMSCs)在体外联合来氟米特(LEF)对小鼠T淋巴细胞的免疫调节作用.方法 直接贴壁筛选法分离培养小鼠BMSCs,流式细胞分析(FCM)鉴定BMSCs的纯度.用EZ-SepTMm Mouse 1X分离异体BALB/c小鼠的脾淋巴细胞,在刀豆球蛋白A(ConA)诱导的同时,先经LEF处理,洗去LEF后,脾淋巴细胞再和BMSCs共培养.分组:A组:脾淋巴细胞;B组:脾淋巴细胞+BMSCs;C组:LEF处理的脾淋巴细胞;D组:LEF处理的脾淋巴细胞+BMSCs.用四甲基噻唑蓝(MTT)比色法检测各组T淋巴细胞的增殖情况,流式细胞术分析各组T淋巴细胞的活化及凋亡情况,定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组T淋巴细胞的白细胞介素(IL)-2、IL-10基因水平.结果 在体外,BM-SCs处理组(B组)T淋巴细胞的A570 nm值为0.578±0.042,LEF处理组(C组)A570 nm值为0.5024±0.040,两组A570 nm值均显著低于对照组(A组)A570 nm值为0.778±0.035(P<0.01).BMSCs联合LEF组(D组)A570 nm值为0.218±0.033,显著低于BMSCs处理组及LEF处理组(P<0.01). BMSCs联合LEF对CD3+CD69+、CD3+CD28+表达、IL-2基因表达均无明显影响.BMSCs单独或联合LEF组T淋巴细胞凋亡率分别为(2.29±0.32)%、(4.22±0.98)%,较A组T淋巴细胞凋亡率(8.08±1.20)%均明显下降.BMSCs处理组和LEF处理组T淋巴细胞IL-10基因相对表达分别为:0.098±0.039、0.054±0.022明显低于A组(IL-10基因相对表达为1.000)(P<0.01),MSCs联合LEF组IL-10基因相对表达为:0.023±0.015,显著低于BMSCs处理组及LEF处理组(P<0.01).结论 BMSCs联合LEF对小鼠T淋巴细胞有一定程度的协同免疫调节作用.     

RNAi介导的脂联素基因沉默对ApoE基因敲除小鼠糖脂代谢的影响

探讨脂联素基因表达缺陷对ApoE基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠糖脂代谢的影响.注射短发卡RNA(shRNA)腺病毒后高脂喂养的ApoE~(-/-)小鼠(ADI组)血浆脂联素水平明显低于普食喂养(NF)、单纯高脂喂养(HF)和空载腺病毒高脂对照组(GF,均P<0.01).3组高脂喂养的APOE~(-/-)小鼠体重、空腹血糖、血浆游离脂肪酸、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和血浆胰岛素水平明显高于NF组(均P<0.01),而ADI组与HF和GF组相比,游离脂肪酸、总胆同醇、甘油三酯、LDL-C、HDL-C和血浆胰岛素水平增高更为明显(P<0.01或P<0.05),提示长期高脂饲养和脂联素基因表达缺陷使ApoE~(-/-)小鼠具备较为典型的糖脂代谢紊乱和胰岛素抵抗的病理生理表现.     

利拉鲁肽对RNAi介导的脂联素基因抑制ApoE基因敲除小鼠糖脂代谢的影响

目的 探讨利拉鲁肽对脂联素基因表达缺陷的ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠糖脂代谢的影响.方法 采用静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT)评价利拉鲁肽的量效关系.利用扩展高胰岛素钳夹技术评价各组小鼠糖脂代谢和胰岛素敏感性变化.结果 在IVGTT中,利拉鲁肽1 mg/kg组,糖负荷后5、15和30 min血糖值均明显低于其它剂量组(均P＜0.01),而血浆胰岛素水平在5、15 min均明显高于其他3组(均P＜0.01).联合注射利拉鲁肽和脂联素RNAi腺病毒组体重、空腹血糖、血浆游离脂肪酸、总胆固醇、甘油三酯、血浆胰岛素和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著低于脂联素RNAi腺病毒组(P＜0.05或P＜0.01),而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)则明显高于脂联素RNAi组(P＜0.05).钳夹稳态时,脂联素RNAi组血浆胰岛素明显高于利拉鲁肽组(P＜0.01),游离脂肪酸、总胆固醇、甘油三酯虽被抑制,但仍明显高于利拉鲁肽组(P＜0.05).利拉鲁肽组葡萄糖输注率(GIR)则明显高于脂联素RNAi组(P＜0.01).钳夹结束时,脂联素RNAi组葡萄糖清除率(GRd)明显低于利拉鲁肽组(P＜0.01),而肝糖输出率则明显高于利拉鲁肽组(P＜0.01).结论 长期的利拉鲁肽干预上调了脂联素基因表达缺陷ApoE-/-小鼠血浆脂联素水平,并改善了其胰岛素抵抗.     

亚硝基铁氰化钠来源的外源性NO体外杀伤旋毛虫肌幼虫作用研究

目的探讨亚硝基铁氰化钠(SNP)来源的NO体外杀伤旋毛虫肌幼虫的作用及其相关机制。方法制作浓度为1 000条/ml的旋毛虫肌幼虫悬液。培养板每孔加入0.1 ml肌幼虫悬液,再加入SNP,使其终浓度分别为0.02、0.05、0.10、0.20、0.50 mmol/L和1.00 mmol/L,并设空白对照组,37℃5%CO2培养箱中孵育4 d后收集各孔肌幼虫,镜检计数,计算并比较各组肌幼虫死亡率。另于培养板中每孔加入0.1 ml肌幼虫悬液,分别设A组(对照组,1.00 mmol/L SNP)、B组(0.15 mmol/L Fe SO4+1.00 mmol/L SNP)、C组(1.00 mmol/L L-半胱氨酸+1.00 mmol/L SNP)、D组(0.15 mmol/L Fe SO4+1.00mmol/L L-半胱氨酸+1.00 mmol/L SNP)、E组(0.15 mmol/L Hb+1.00 mmol/L SNP),培养、检测方法同前,计算并比较各组肌幼虫死亡率。结果 0.02 mmol/L SNP组与空白对照组的旋毛虫肌幼虫死亡率分别为(5.50±1.80)%和(4.93±0.25)%(P0.05)。0.05、0.10、0.20、0.50、1.00 mmol/L SNP组虫体死亡率分别为(20.19±2.71)%、(29.21±2.12)%、(41.81±2.03)%、(47.85±3.79)%和(60.98±5.19)%,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P均0.05)。旋毛虫肌幼虫死亡率与SNP浓度呈正相关(rs=0.875,P0.05)。B、C、D、E组肌幼虫死亡率分别为(49.48±1.34)%、(47.29±2.79)%、(26.28±1.37)%和(17.93±3.49)%,均较A组(60.98±5.19)%有所下降(P均0.05)。结论 SNP来源NO对体外培养的旋毛虫肌幼虫具有杀伤作用,而血红蛋白、硫酸亚铁、L-半胱氨酸对该杀伤具有抑制作用,以血红蛋白抑制效果最显著。     

携有胰岛素样生长因子1重组腺病毒对链脲佐菌素诱导胰岛β细胞损害的保护性研究

目的构建含有鼠胰岛素样生长因子-1(rIGF-1)重组腺病毒,研究rIGF-1在链脲佐菌素(STZ)诱导胰岛β细胞损害中的作用。方法构建重组腺病毒并感染RINm5F细胞,ELISA、Western blotting检测rIGF-1蛋白表达;STZ诱导细胞破坏,检测培养上清中NO水平,胰岛素释放试验进行功能测定,流式细胞检测细胞凋亡,四甲基偶氮唑盐法检测细胞存活率。结果成功构建含有rIGF-1基因重组腺病毒,病毒滴度为4.0×108pfu/ml,rIGF-1在细胞内外有效表达,并具有抑制STZ诱导胰岛β细胞凋亡和NO产生、保护细胞胰岛素分泌和促进细胞增殖的活性。结论胰岛β细胞局部表达IGF-1能够保护细胞功能,抑制NO产生,使胰岛β细胞免受诱导凋亡因子的损害,提高细胞存活率。STZ诱导胰岛β细胞凋亡可能与NO介导有关。