用SSLP连锁分析进行成人多囊肾病快速基因诊断的研究

目的为了探索一种简便、快速的成人多囊肾病（ａｄｕｌｔｐｏｌｙｃｙｓｔｉｃｋｉｄｎｅｙｄｉｓｅａｓｅ，ＡＰＫＤ）基因诊断方法。方法应用ＰＣＲ技术结合ＳＲＳ－ＳＳＬＰ，对成人多囊肾病进行研究。结果ＰＣＲ扩增ＰＫＤ１近端微卫星序列ＳＭ７，观察了中国人群ＳＭ７的多态性，在６７名非血缘关系正常人中发现７种等位片段，杂合子频率５２．２％，ＰＩＣ值０．６２。以ＳＭ７为遗传标记，对２个ＡＰＫＤ家系进行ＳＳＬＰ连锁分析，和３′ＨＶＲ／ＰｖｕⅡＲＦＬＰ连锁分析进行对照，结果二者相符。结论ＳＭ７在中国人中具有较高的多态性，用ＳＳＬＰ连锁分析进行成人多囊肾病的基因诊断切实可行。     

一种快速检测 HbCS和 HbQS点突变的 PCR新方法

【目的】建立一种快速的PCR基因诊断方法,用以检测中国人常见的非缺失型α地中海贫血HbCS和HbQS。【方法】根据突变扩增系统(ARMS)的基本原理,自行设计了一套含4条等位特异性引物的PCR反应体系(4P-ASPCR法),分别用以检测中国人常见的HbCS和HbQS的点突变类型。通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法和DNA序列分析对检测结果进行验证。【结果】该方法检测到的HbCS突变、HbQS突变,与PCR-酶解法和DNA序列分析得出的结果一致。【结论】该新型PCR法检测HbCS和HbQS点突变快速、准确,适于推广应用,该设计思路亦可用于检测其它点突变。     

Analysis of Rb gene in primary acute lymphoid leukemia

Theretinoblastomasusceptibilitygene(Rb)istheprototypeforaclassofgenestheinactivationofwhichappearstobecausallyrelatedtocancer;thesegenesarethereforereferredtoastumorsup-pressorgenes-ItsactivityisrelatedtoDNAsyn-thesisorcellcycleregulation.Structuralandfunc-tionaldefectsintheRbgenehavebeendemon-stratedinanumberofprimarytumorssuchassmallcelllungcancer,breastcancer,bladdercar--cinomaandhematopoieticmalignancies['J.Theseobservationshadpromptedustoinvestigatethestatusofthisgeneinacutelymphoidleuk…     

中国人粘多糖贮积症Ⅰ型IDUA基因突变的检测

[目的]检测中国人粘多糖贮积症Ⅰ型患者IDUA基因(IDUA)突变.[方法]采用PCR-SSCP、PCR产物直接测序等技术对35例粘多糖贮积症Ⅰ型患者的IDUA第2、6、7、8、9和10外显子及其相邻区域进行突变筛查.[结果]本研究筛查出7种突变,均为单碱基置换.一内含子区突变nt1486C→T;一中性突变nt1945G→C;1种无义突变E404X;4种错义突变F198L、L218V、A361T和V454I.[结论]中国人IDUA在第2、6、7、8、9和10外显子区存在突变.在上述检测到的7种突变中,A361T国外已确定为多态性,E404X国外已报道为重型突变.而nt1486C→T、F198L和L218V和V454I为我们首次发现和报道,可能为新突变,但其突变性质还有待于进一步鉴定.     

异源双链和单链构像多态法筛查基因突变

目的比较异源双链、单链构像多态（ＳＳＣＰ）、异源双链ＳＳＣＰ法筛查突变的效率，寻找简便有效的基因突变筛查方法。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增２３个已知的杂合子突变，分别以异源双链、ＳＳＣＰ、异源双链ＳＳＣＰ法分析突变，对比各方法对突变的检出情况。结果２３个杂合子突变中，异源双链法、ＳＳＣＰ法与异源双链ＳＳＣＰ法检出突变分别为２２个（９６％）、２０个（８７％）和２３个（１００％）。异源双链法结果比ＳＳＣＰ法结果稳定，重复性好，两种方法之间有一定互补性，异源双链ＳＳＣＰ法兼有两种方法的特点。结论异源双链ＳＳＣＰ法突变检出率高，经济、简便，值得在基因突变筛查中推广应用。     

荧光定量聚合酶链式反应种植前胚胎β-地中海贫血基因诊断

目的 用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)方法进行种植前β-地中海贫血一种中国人常见突变类型CD41／42(-TCTT)的基因诊断。方法 来源于β-地中海贫血病人或携带者的289个淋巴细胞和人体外受精-胚胎移植志愿者剩余的胚胎分离137个单细胞用荧光定量PCR方法进行分析。结果 用单个淋巴细胞诊断p地中海贫血扩增效率达96％，准确率达99％～100％，等位基因丢失(ADO)率仅0～5％。单个胚胎细胞扩增效率86％。结论 荧光定量PCR技术是一种敏感、快速、可靠和准确的技术。适合包括β-地中海贫血在内的单基因疾病的种植前诊断。     

器官移植的某些进展

临床上使用器官移植已挽救或延长了成千上万人的生命。接受移植器官病人的长期生存率日渐增高,移植对象的范围不断扩大。1976年和1978年国际移植协会先后在美国纽约和意大利罗马召开了第六、七届移植学会国际会议,对于临床移植、实验移植、组织相容性、移植抗原、细胞膜及其抗原、移植物反应性的介质、免疫反应性的遗传控制、特异性同种异源无反应性、免疫抑制、肿瘤与移植、移植生物学等问题作了广泛的讨论。器官移植已逐渐成为一门独立的学科。本文拟对近年国外器官移植临床的某些进展作一介绍。     

St14/BclⅠ限制性片段长度多态性基因频率

St14-1(DXS52)是位于人X染色体长臂远端的一段DNA顺序,与第Ⅷ凝血因子(FⅧ:C)基因紧密连锁.用其作探针,BcII酶切,对人基因组DNA进行Southern印迹杂交分析,可检测到一限制性片段长度多态性(RFLP).我们分析广东地区汉族人群中st14/BcII RFLP,等位基因片段长度分别为17.4kb和16·6kb(见附图).15条无遗传关系的X染     

Application of α-globin 3′hypervariable region to gene diagnosis of adult polycystic kidney disease

Seventy-four members from 9 adult polycystic kidney disease(APKD)familieswere analysed with Southern blot and 3′hypervariable region/Pvu Ⅱ,3′HVR/Bgl ⅡRFLPs.The results showed that 3′ HVR fragments were highly polymorphic.Theheterozygote frequencies of Pvu Ⅱ,Bgl Ⅱ and PvuⅡ+Bg1Ⅱ fragments were 92%,84.7%and 98.6%,respectively.The maximum lod score for linkage between 3′HVR and APKDwas 9.71 at a recombination fraction 0.045.We successfully applied 3′HVR probe to thegene diagnosis of 17 symptomatic patients and 7 patients in the presymptomatic stage.     

广州地区人群慢性迁延性肝炎人类白细胞抗原基因型分析

研究慢性活动性肝炎(以下简称CAH)与人类白细胞抗原(HLA)的关系是研究CAH遗传易感性的一个重要方面。70年代以来已有不少文献报告在CAH病人中HLA—A1、A3、B8,Bw35,Cw6以及D Rw3抗原的基因频率比正常人明显增高,但不同地区的作者报告结果不一致,因不同种族的正常人群中HLA各位点抗原频率的分布有很大差异,因此可能影响到在不同种族中CAH的HLA抗原基因频率分布。在我国CAH较少见,但慢性迁延性肝炎(CPH)却较常见,其遗传易感性是否与细胞免疫系统中HLA的某些抗原有关?国内尚未见报道。在我国CPH病人中HLA抗原的分布是否与国外报告其它人