E1A抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖及其分子机制

Objective To explore the molecular mechanism of proliferation inhibition of human breast cancer cell MCF-7 regulated by E1A gene.Methods E1A gene was transfected into MCF-7 cells by liposome reagents. RT-PCR and Western blot were used to detect E1A mRNA and protein expression and HER-2 mRNA in MCF-7. The proliferation and colony formation of MCF-7 were measured by 3-(4,5-dinmethylthiahiazo-z-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay and soft agar formation assay. The apoptosis of MCF-7 cells regulated by E1A expression was examined by flow cytometry.Results E1A was not endogenously expressed in MCF-7. E1A expression in MCF-7 could significantly decrease HER-2 mRNA and protein expression. Flow cytometry indicated that the apoptosis of MCF-7 could be induced by E1A. Meanwhile, E1A gene could significantly inhibit MCF-7 proliferation and colony formation in soft agar.Conclusion E1A gene can decrease HER-2 expression and induce the apoptosis of human breast cancer cell MCF-7, and inhibit the proliferation and colony formation of MCF-7.     

大豆异黄酮对辐射损伤小鼠肝脏抗氧化酶活性的影响

目的 探讨大豆异黄酮(SI)对60Co-γ射线造成的小鼠肝脏损伤的防护作用.方法 56只雄性ICR小鼠随机分成5组.A、B、C组每组12只小鼠,分别给予SI 40mg·kg-1·d-1、80mg·kg-1·d-1、160mg·kg-1·d-1;正常对照(N)组10只小鼠仅给予玉米油0.2ml/d;单纯辐照(D)组10只小鼠作为阳性对照.连续胃饲至第7天,A、B、C、D组小鼠接受4.5Gy60Co-γ射线全身性辐照1次.辐照后继续按以上分组方案灌胃,分别于辐照后第2天及第7天处死小鼠,取肝组织标本,测定肝脏抗氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱苷肽过氧化物酶(GPX)及谷胱苷肽转移酶(GST)活性变化.结果 辐照后第2天,A、B、C组CAT、GPX、GST、SOD浓度高于D组(P＜0.01);辐照后第7天,A、B、C组CAT浓度高于高于D组(P＜0.01);B、C组GPX浓度高于D组(P＜0.05和P＜0.01).结论 大豆异黄酮可提高辐射损伤小鼠肝脏的抗氧化能力.     

MNT减少2型糖尿病内脏脂肪的研究

目的 :探讨医学营养治疗(medical nutrition therapy,MNT)与2型糖尿病患者内脏脂肪面积减少的关系。方法 :选择南京医科大学第一附属医院内分泌科确诊的2型糖尿病患者67例,随机分为干预组35例和对照组32例,所有入选患者均进行人体成分测定。根据人体成分分析仪的结果,对干预组进行为期3个月系统和有重点的营养健康教育。对照组则不接受常规的相关饮食指导和健康教育,其相关方案不依赖人体成分分析仪的结果做出调整。观察两组患者干预前后的人体成份、人体学测量指标、血糖血脂的变化。结果:干预组的腰围(waist circumference,WC)、腰臀比(waist hip ratio,WHR)、脂肪含量、内脏脂肪面积(visceral fat area,VFA)、餐后2 h血糖(2 h postprandial glucose,2h PG)、血清甘油三酯(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白(lowdensity lipoprotein,LDL)与干预前相比显著降低(P<0.05);且相关性分析显示,内脏脂肪面积与收缩压、舒张压、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、甘油三酯、胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,IR-index)呈明显正相关。结论:通过MNT可有效减少内脏脂肪面积从而改善患者胰岛素抵抗,对糖尿病血糖血脂的管理具有更好效果。     

Mepyramine inhibits platelet activating factor-induced rabbit platelet aggregation:role of intracelular histamine

研究细胞内组胺在ＰＡＦ诱导血小板活化中的作用．方法：采用血小板聚集及放免法测定ＴＸＢ２，Ｆｕｒａ２负载测细胞内钙．结果：美吡拉敏高于１００μｍｏｌ·Ｌ－１抑制ＰＡＦ诱导的聚集，而西咪替丁在４００μｍｏｌ·Ｌ－１亦无效，组胺及２ｔｈｉａｚｏｌｙｌｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ也无协同作用．但在皂素（８－１０ｍｇ·Ｌ－１）通透的血小板，组胺可减弱美吡拉敏的抑制效应，美吡拉敏还可抑制ＰＡＦ引起的ＴＸＢ２产生和细胞内钙增加．结论：ＰＡＦ诱导的血小板活化伴随有细胞内组胺的合成或释放通过ＴＸＢ２产生和细胞内钙增加这一共同通路．     

大鼠Smad1基因重组腺病毒的构建

目的 利用Cre-loxP特异性位点基因重组技术构建大鼠Smadl的重组腺病毒.方法 巢式PCR得到大鼠Smadl全部开放阅读框架序列,克隆到质粒pCR-Blunt II-TOPO中,然后将目的 基因片段连接到中间载体质粒pDNR-CMV,测序后在Cre重组酶作用下,将Smad1 cDNA转移到腺病毒载体pLP-Adeno-X-CMV.在HEK 293细胞中包装和扩增重组腺病毒,并检测Smad1基因重组腺病毒在大鼠肝脏星状细胞系HSC-T6中的表达和功能.结果 PCR法和限制性内切酶Xhoi I消化法均证实Smad1重组腺病毒的成功构建,RT-PCR和Western Blot检测证实该重组腺病毒显著性增强了HSC-T6细胞中Smad1的mRNA、蛋白表达及其磷酸化水平.结论 Cre-loxP特异性住点基因重组技术是一种快速、高效构建基因重组腺病毒的方法 ,大鼠Smad1基因重组腺病毒的成功构建为与Smad1有关的细胞信号调控以及基因治疗提供了良好的工具.     

改良SMILE方案治疗ENKTL-NT的临床观察

目的探讨改良SIMLE方案治疗结外NK/T细胞淋巴瘤鼻型的近期疗效、不良反应和可行性。方法 2008年11月～2010年1月,2例复治、3例初治的Ⅲ、Ⅳ期ENKTL-NT患者,接受改良SMILE方案治疗。结果 5例患者中,CR1例,PR2例,近期总有效率60%。主要不良反应为骨髓抑制、肝功能受损。结论改良SMILE方案对于复发难治性及晚期ENKTL-NT患者有一定疗效,但剂量、时间及用法值得深入探讨。     

经皮椎体成形术联合局部封闭治疗骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折的疗效研究

目的 探究经皮椎体成形术(PVP)联合局部封闭治疗骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折的临床疗效。方法 60例骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折患者,采用随机数字表法分为观察组和对照组,各30例。对照组采用经皮椎体成形术治疗,观察组采用经皮椎体成形术联合局部封闭治疗。比较两组患者镇痛疗效、术后不良事件发生率及治疗前后视觉模拟评分法(VAS)评分、Oswestry功能障碍指数问卷表(ODI)评分。结果 观察组镇痛总有效率为93.33%,显著高于对照组的73.33%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组VAS评分和ODI评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组VAS评分和ODI评分均低于治疗前,且观察组VAS评分(2.77±1.33)分和ODI评分(33.37±15.54)分均低于对照组的(3.84±1.97)、(47.70±20.34)分,差异有统计学意义(P<0.05)。两组术后不良事件发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折采用经皮椎体成形术联合局部封闭治疗能够有效减轻患者术后疼痛,改善伤椎功能,且安全性较高,具有较高...     

溶血性磷脂酰胆碱诱导血小板活化及蛋白质酪氨酸激酶和蛋白激酶C的作用

应用双道血小板聚集仪和荧光分光光度计分别测定溶血性磷脂酰胆碱(LysoPC)诱导的兔洗涤血小板聚集,细胞内钙离子浓度(［Ca²⁺］_i),细胞内pH值(pH_i)的变化及5-羟色胺(5-HT)的释放,并观察蛋白质酪氨酸激酶(PTK)抑制剂金雀异黄素(Gen)和蛋白激酶C(PKC)抑制剂星形孢菌素(Sta)对其作用的影响. 结果表明：LysoPC(30-300 μmol·L^-1)诱导血小板聚集,5- HT释放和［Ca²⁺］_i 升高,均呈现良好的浓度依赖性,100 μmol·L^-1以上时伴有pH_i的增加;Gen使LysoPC 诱导的聚集浓度效应曲线右移,半效聚集浓度值从(100±23) μmol·L^-1增加到(200±42) μmol·L^-1,明显抑制 ［Ca²⁺］_i 升高和胞浆碱化,对5-HT释放无明显影响;Sta对较低浓度LysoPC 诱导的血小板聚集,5-HT释放, ［Ca²⁺］_i 和pH_i的增加均有明显抑制作用,但对高浓度LysoPC 诱导的血小板活化无明显影响. 提示：LysoPC通过内Ca²⁺调节和Na^＋/H^＋交换介导血小板聚集和致密颗粒释放;PTK的激活参与了LysoPC诱导的血小板聚集,内Ca²⁺调节和Na^＋/H^＋交换,而在5-HT释放的机理中意义不大;PKC的激活在较低浓度LysoPC 诱导的血小板活化中起重要作用,高浓度LysoPC通过不依赖于PKC的途径激活血小板.