蛋白激酶D1在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用

目的研究蛋白激酶D1（PKD1）在烟曲霉介导的NF-κB信号通路激活及转录活性中的作用,为进一步探讨PKD1在烟曲
霉感染引起的肺曲霉病中的作用及其机制奠定基础。方法首先将GFP、GFP-PKD1表达质粒分别转染人肺腺癌细胞A549和
HEK293细胞中,分别将灭活的烟曲霉分生孢子（1×105 CFU/ml）于不同时间处理上述两组细胞,Western blotting证实PKD1的
过表达,并检测PKD1的磷酸化活性;其次在A549细胞中分别转染GFP-PKD1、siRNA-PKD1并以灭活的烟曲霉分生孢子处理
细胞30 min,分别检测下游NF-κB通路相关信号分子的磷酸化活性;最后,将NF-κB-luc 荧光素酶报告基因及内参照报告质
粒海肾荧光素酶（pRL-SV40）共转染入表达GFP、GFP-PKD1的A549细胞中,两组细胞在有无烟曲霉分生孢子的作用下处理
24 h,收集细胞裂解液,进行双色荧光素酶活性检测。结果Western blotting证实PKD1的过表达时间依赖性地增强烟曲霉刺激
的A549细胞和HEK293 细胞中PKD1的磷酸化活性及NF-κB通路中IКB和p65（pS276）的磷酸化活性,反之,敲低PKD1的表
达则抑制烟曲霉介导的NF-κB通路中IКB和p65（pS276）的磷酸化活性。过表达PKD1明显增加NF-κB-luc荧光素酶的转录激
活活性。结论PKD1可能在烟曲霉刺激的NF-κB通路的激活及转录活性中起重要作用。
     

Sysmex CA 7000全自动凝血仪性能评价

目的对Sysmex CA7000全自动凝血仪进行性能评价。方法对Sysmex CA 7000凝血仪上的准确性、不精密度、线性、检测限、携带污染率进行评价。检测189名健康体检者的凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（FIB）并建立95%参考区间。结果准确性试验测定结果在厂家给定范围或标定靶值的±8%范围内,仪器的准确性良好。批内和天间最大变异系数（CV）为6.05%,符合厂家要求（CV〈10%）,仪器的不精密度良好。线性验证试验结果显示FIB相关系数（r）为0.999 1、FⅧ∶C为0.999 5、AT∶A为0.998 5、D-二聚体（D-D）为0.996 7,均符合厂家要求（r≥0.975）,仪器线性范围良好。检测限最大CV为10.45%,符合厂家要求（CV〈20%）,对低值样本有较好的检测能力。样本及试剂携带污染率最高CV为5.44%,均符合厂家要求（≤10%）。PT、APTT、TT和FIB的95%参考区间分别为8.0～14.2 s、25.1～40.8 s、15.1～19.7 s、1.7～4.0 g/L。结论 Sysmex CA7000凝血仪具有精密度良好、准确性可靠、检测范围宽、对低值样本有良好的检测结果、样本间及试剂间携带污染率低的特点,适合临床应用。     

实验诊断学双语教学和全英语教学的教材建设探析

双语和全英教学在实验诊断学教学中的应用为医学院校的师生掌握、传播和交流这门飞速发展的医学学科提供了一种有效的手段,实验诊断学双语教学就是用英语进行教学,而英文版教材的选用和建设则是实验诊断学课程双语教学和英语教学的灵魂。本文从双语教学的特点谈起,结合国外双语教学的经验和本教研室的教学实践,初步探讨了实验诊断学双语和全英教学教材建设所面临的挑战与应对措施。     

光滑假丝酵母菌感染实时荧光定量PCR检测方法的建立

目的：建立、优化快速检测临床标本中光滑假丝酵母菌的实时荧光定量PCR方法，并评价其临床应用价值。方法：以光滑假丝酵母菌ITSⅡ基因的一段高度保守序列为扩增靶序列，合成引物和探针，并与pMD19-T构建重组质粒作为标准品，建立检测光滑假丝酵母菌的实时定量荧光PCR方法。从线性范围、重复性、敏感性、特异性等4个方面对反应体系进行方法学评价。用建立的实时荧光定量PCR方法对1042例临床标本（包括血液、尿液、痰液、胸水、支气管肺泡灌洗液）进行检测，并与真菌培养法进行比较。结果：建立的光滑假丝酵母菌实时荧光定量PCR方法的灵敏度可达10CFu／ml；与人类基因组、细菌及其他真菌无交叉阳性反应。重复检测样本，其循环阈值的试验内及试验间变异系数均小于10％。用于临床标本检测时共检出96份阳性标本，与真菌培养法（检出93份阳性标本）的一致性好（Kappa值为0．925）。结论：实时荧光定量PCR方法检测光滑假丝酵母菌灵敏度高、特异性及重复性好；可直接用于各种临床标本中光滑假丝酵母菌的检测，能大大缩短报告时间，为临床诊断提供可靠依据。     

原发性肝癌伴癌综合征的发生率及其临床特点

目的探讨原发性肝癌(PHC)患者伴癌综合征(PNS)的发病率、临床特征及其实验室指标的变化规律。方法回顾性分析166例PHC患者临床生化、血常规、甲胎蛋白(AFP)、HBsAg、HCV-Ab等实验室检查结果,比较PNS组与非PNS组的差异。结果 25.9%(43/166)的PHC患者出现PNS表现,其中19例有1种PNS表现,16例有2种PNS表现,5例出现3种PNS表现。PNS患者高胆固醇血症占同期PHC住院患者的15.1%,白细胞增多症占9.0%,血小板增多症占7.8%,红细胞增多症占4.2%,低糖血症占6.6%,高钙血症占1.8%。PHC患者PNS组平均AFP水平、乙肝病毒与丙肝病毒感染血清标志物阳性率、血清总胆固醇、血钙、白细胞、血小板、碱性磷酸酶的实验室检查结果同非PNS组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 PHC患者PNS的发生率较高,多项实验室指标有其独特特点且对减少PHC的误诊率、调整治疗方案、疗效评价和预后判断均具有重要意义。     

心肌型脂肪酸结合蛋白用于急性心梗早期诊断的探索性研究

目的探讨心肌型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在急性心肌梗死(AMI)早期区分AMI患者与正常人的能力。方法人为纳入正常人、AMI确诊病人比例2:1的小样本人群,采用双抗体夹心ELISA法对40例正常人与19例AMI患者血清H-FABP浓度进行定量,绘制H-FABP在该人群中用于诊断AMI的受试者特征曲线(ROC曲线)并比较曲线下面积(AUC)与0.5的大小。0.5被认为是确定一项指标是否具有任何诊断意义的AUC临界值。结果H-FABP浓度定量正常人组为1.29±0.64 ng/mL AMI组为24.45±32.40 ng/mL;依此绘制出的ROC曲线其AUC为0.978(95%CI∶0.948-1.000),与0.5比较差异具有统计学意义。结论H-FABP具备在心梗早期区分AMI与正常人的能力,H-FABP定量检测用于AMI早期诊断是具备其可行性的。     

RelB shRNA慢病毒感染小鼠骨髓树突细胞的免疫学效应观察

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溴甲酚紫法测定血清白蛋白临床实用性评价

目的 对溴甲酚紫(BCP)法测定血清白蛋白(ALB)进行方法学评价，探讨其测定结果与传统溴甲酚绿(BCG)法的可转换性。方法 测定BCP法的线性范围、批内与批间变异系数、回收率及临床常见干扰因素对其干扰程度，比较测定结果与BCG法的差异。结果 BCP法测定ALB线性范围可达10～80g／L，批内与批间变异系数分别为0．95％和3．03％，平均回收率为99．4％，252μmol／L的胆红素、4％的Trilitid、4g/L的血红蛋白对其无明显干扰。应用BCP法比传统BCG法平均约低6．0g／L，但两者高度相关(y=1．08x 5．98)。结论 BCP法是一种较BCG法更为特异的测定ALB的方法，利用回归方程可方便地将其转换成BCG法的测定结果，使临床应用这两种方法测定ALB的结果具有可比性。