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61.
62.
目的对定量测定甲胎蛋白(AFP)的颗粒增强免疫透射比浊法(PETIA)进行方法学评价。方法应用OLYMPUS AU5400全自动生化分析仪定量测定AFP,探讨该检测方法的精密度、试剂开瓶稳定性、检测下限、敏感性、线性范围、干扰和准确性;并与SIEMENS CENTAUR电化学发光法(ECLIA)定量测定临床新鲜血清AFP的结果进行相关性分析,同时对其参考区间进行验证。结果 29.95和132.25 ng/mL的新鲜血清测定的批内变异系数(CV)分别为1.67%和1.52%;天间CV分别为7.17%和7.84%;测定下限和敏感性分别为0.52和0.53 ng/mL;5.4~256 ng/mL范围内其测定的线性相关系数(r2)达0.999 4,回归方程为Y=1.014X+1.063 3;高、低水平浓度的定值质控血清测定的相对偏差分别为5.96%和8.40%,远小于卫生部临床检验中心AFP室间质评能力比对试验(PT)评价标准的"靶值±20%";107例临床病例测定结果与SIEMENS化学发光分析仪测定的结果相关性良好,YECLIA=1.138 7XPETIA+2.835 3(r2=0.992 1);一定程度的溶血、黄疸及脂血对该测定无明显干扰;20名健康体检者AFP测定结果均处于厂家推荐的参考区间内。结论 PETIA测定AFP可作为一种简便易行、快捷价廉、准确可靠的临床常规检测方法,特别适合于健康体检时大规模筛查。 相似文献
63.
目的建立、优化快速检测临床标本中热带假丝酵母菌的实时荧光定量PCR方法 ,并对其临床应用进行初步评价。方法用自行设计的高效引物、探针检测5种临床标本中的热带假丝酵母菌,对该方法的敏感性、特异性进行评价,并与真菌培养法进行比较。结果检测临床标本中热带假丝酵母菌的灵敏度可达10 copies/ml,与人类基因组、细菌及其他真菌无交叉阳性反应。与真菌培养法的检测一致性好(Kappa值为0.916,P〈0.01)。结论实时荧光定量PCR检测热带假丝酵母菌灵敏度高、特异性强,可直接用于各种临床标本中热带假丝酵母菌的检测,而且可大大缩短报告时间,为临床诊断提供可靠依据。 相似文献
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改良缺血修饰白蛋白测定方法(白蛋白-钴结合试验)的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立改良的缺血修饰白蛋白(IMA)测定方法[白蛋白-钴结合(ACB)试验]。方法以1-亚硝基-2-萘酚(NN)代替二硫苏糖醇(DTT)作为显色剂,确定试验的基本条件(最佳波长、反应时间、试剂稳定性等),并对该试验的精密度、敏感性、线性等进行评价。测定急性心肌梗死(AMI)和胸痛患者的IMA值并进行统计学分析。结果改良ACB试验最佳吸收波长为410 nm,反应体系0~25 min时吸光度值变化稳定,试剂在室温和4℃30 d内性能稳定,反应体系线性良好。批内变异系数(CV)为2.67%,批间CV为5.44%。应用显色剂NN对钴离子(Co2+)的最低检出限为0.488 mg/L,应用DTT为7.812 mg/L。三酰甘油(TG)〈2.02 mmol/L、血红蛋白(Hb)〈6.9 g/L、总胆红素(TBil)〈66.0μmol/L时无干扰。AMI组为(1.195±0.320)吸光度单位(ABSU),胸痛组为(0.855±0.068)ABSU,二者差异有统计学意义(P〈0.01)。结论以NN作为显色剂测定IMA的ACB试验灵敏、方便、简单,适合批量测定。 相似文献
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通过回顾性研究分析, 探究非伤寒沙门菌(NTS)对喹诺酮类药物的耐药性及耐药机制。以南方医科大学第五附属医院2020年5月至2021年2月临床标本中分离的105株NTS为研究对象, 采用VITEK2 Compact全自动鉴定药敏分析系统和血清学实验对菌株进行鉴定;用琼脂稀释法检测菌株对环丙沙星、左氧氟沙星和萘啶酸的敏感性;对105株NTS 进行全基因组测序, 采用Abricate等软件分析菌株的耐药相关基因, 包括质粒介导的喹诺酮耐药基因(PMQR)和喹诺酮耐药决定区(QRDR);采用SISTR和MLST分析血清型和ST型, 并构建系统发育树。结果显示, 分离的NTS主要为ST34鼠伤寒沙门菌(53.3%)。药敏结果显示NTS对环丙沙星、左氧氟沙星和萘啶酸的耐药率分别为30.4%、1.9%和22.0%, 对环丙沙星、左氧氟沙星的中介率为27.6%、54.2%;62株喹诺酮类非敏感株中共有46株(74.2%)携带PMQR基因, 主要为qnrS1(80.4%), 其次为aac(6′)-Ib-cr(15.2%);QRDR突变分析共有14株和8株NTS分别存在gyrA和parC基因突变, gy... 相似文献
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总蛋白与酸性磷酸酶试剂对钾测定的正干扰 总被引:15,自引:0,他引:15
目的:了解总蛋白与酸性磷酸酶试剂对酶法测定钾的干扰情况。方法:设置全自动生化分析仪的分析顺序,将单独测定血清钾与先测总蛋白再测钾,先测酸性磷酸再测钾的结果进行统计分析。结果:先测总蛋白再 测血清钾会对钾产生约5%的正偏差,先测酸性磷酸酶再测钾会产生约4.6%的正偏差。结论:部分试剂含钾的检验项目对酶法测定钾产生明显的正误差。 相似文献
67.
68.
弓形虫p30基因在真核系统中的表达 总被引:1,自引:0,他引:1
采用聚乙二醇(PEG)沉淀法纯化克隆刚地弓形虫(Toxplasmagondii)p30基因的转移载体质粒pSXIVVI+X3-p30DNA;将pSXIVVI+X3-p30DNA与粉纹夜蛾核型多角体缺陷型病毒TnNPV-SVI-GDNA共转染草地夜蛾(Sfg)细胞,构建出既能形成多角体又能表达外源基因的重组病毒TnNPV-p30。经空斑纯化挑选出6株单克隆重组病毒,感染细胞裂解液在相对分子质量约为34000~35000位置出现一条表达带;其含量占细胞总蛋白的5.13%~5.62%,株间差异不明显;用抗弓形虫多克隆抗血清进行Western-Blot呈一特异反应条带。感染后72h蛋白表达量最高,可达7.18%;96小时次之,为5.91%。 相似文献
69.
烧伤患者由于细胞免疫功能紊乱,易感染和引起脓毒血症。为探讨烧伤患者免疫功能的变化,我们采用流式细胞仪对烧饬患者外周血T细胞亚群进行了检测,报道如下。1对象和方法1.1研究对家烧伤病人23例,男性,年龄20至30岁,按烧伤面积不同将病人分三级。Ⅰ组,8例,烧伤面积为80%~90%;Ⅱ组:8例,烧饬西积为60%~70%;Ⅲ组,7例,烧伤面积为50%以下。正常对照组20例。1.2方法分别在两个试管中加入EDTA抗凝的外周静脉血100μl,一管加入CD3单克隆抗体20“另一管加入CD4/CD8双标单克隆抗体20μl(抗体购自法国国际免疫公司),充… 相似文献
70.
已有的研究表明:EGFR的过量表达增强了肿瘤的转移,但其确切的机理还知之甚少.同时,肿瘤细胞对胞外基质的粘附是肿瘤侵袭转移的重要步骤.为了探讨EGFR的表达改变是否影响肿瘤细胞对胞外基质的粘附作用,我们将构建的EGh反义序列表达质粒(pLXSN/AS)导入人过量表达EGFR的人类鼻咽癌细胞侏CNE-2Z中(pLXSN/AS)作对照转染).经G418筛选及125I-EGF结合分析,获得EGFR下调表达的CNE-2Z/AS克隆细胞,继而分别将CNE-2Z/AS,CNE-2Z及CNE-2Z/pLXSN细胞铺入含有层粘连蛋白(LN,10mg/ml)或纤粘连蛋白(FN,10mg/ml)的平皿中,于培养20min,40min,60min分别计数粘附于平的细胞数并绘制细胞生长曲线.结果表明:EGFR的下调表达能明显降低CNE-2Z细胞对FN,LN的粘附作用,而对照组细胞对FN,LN的粘附作用没有改变.这一结果提示:肿瘤细胞中EGFR的过量表达增强了肿瘤细胞对胞外基质的粘附作用,从而促进了肿瘤细胞分解基底膜和远端转移,这为进一步研究肿瘤转移机制奠 相似文献