基于报告基因和NF-κB信号通路的抗阿尔茨海默病药物细胞筛选模型的建立与应用

目的建立基于报告基因和核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路的药物筛选模型,探讨不同化学结构类型的化合物对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的NF-κB信号通路的抑制作用。方法构建带有NF-κB靶序列和报告基因的诱导性表达载体(TATA-like promoter-NF-κB-secreted alkaline phosphatase,pTAL-NF-κB-SEAP),并将其转入人胚肾细胞(HEK293)中,考察模型的稳定性、时效、量效关系以及脂多糖对细胞的增殖作用。结果转染pTAL-NF-κB-SEAP的HEK293细胞中SEAP报告基因的表达受脂多糖的诱导并呈剂量与时间依赖关系,脂多糖对阳性克隆细胞无增殖作用,本模型的Z′因子为0.88。结论利用此模型通过测定分泌型碱性磷酸酶(secreted alkaline phosphatase,SEAP)报告基因的诱导表达水平可筛选NF-κB信号通路抑制剂。     

芹菜籽油抗脑缺血作用的研究

目的:研究芹菜籽油对实验性脑缺血大鼠的保护作用。方法:采用结扎大鼠双侧颈总动脉形成急性实验性不完全性脑缺血模型,观察芹菜籽油对脑指数和脑含水量的影响;用栓线法建立大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,观察芹菜籽油对急性脑缺血大鼠神经症状、脑梗塞范围和海马区谷氨酸(Glu)含量的影响。结果:芹菜籽油能够明显降低大鼠脑指数和脑含水量;改善急性脑缺血大鼠的神经症状,降低脑梗塞范围和Glu的含量。结论:芹菜籽油对脑缺血具有较好的保护作用。     

蟾酥脂质体注射液的抗肿瘤作用

目的探讨蟾酥脂质体注射液(CS)的抗肿瘤作用。方法体内实验采用小鼠肝癌H22、肉瘤S180荷瘤小鼠模型,考察CS的抑瘤作用;采用小鼠接种肝癌H22后,用环磷酰胺造成免疫低下模型,考察CS提高机体免疫力作用。体外实验采用MTT法,测CS对人宫颈癌HeLa细胞或人肝癌BEL-7402细胞增殖抑制率。结果CS(0.2、0.4、0.8 mg.kg-1)对2种荷瘤小鼠肿瘤增长有显著或非常显著的抑制作用(P<0.05,P<0.01);同时对机体具有明显的免疫调节作用。CS 0.01~3.00 mg.L-1对人宫颈癌HeLa细胞或肝癌BEL-7402细胞增殖有非常显著的抑制作用;CS对人宫颈癌HeLa细胞IC50为0.51 mg.L-1,95%可信限0.213 2~1.214 0 mg.L-1,CS对人肝癌BEL-7402细胞IC50为0.75 mg.L-1,95%可信限0.312 6~1.801 5 mg.L-1。结论蟾酥脂质体注射液体内、体外均有抗肿瘤活性,且具有免疫调节功能。     

双香油的处方筛选及双香油对心肌缺血的影响

目的确定双香油软胶囊中两种成分组成的最佳配比,并通过整体动物实验考察双香油对异丙肾上腺素造成心肌缺血大鼠的抗心肌缺血的作用。方法传统中药苏合香和降香的有效成分苏合香油和降香油最佳配比采用均匀设计方法筛选;建立由异丙肾上腺素造成的心肌缺血大鼠模型,将实验分为模型对照组、双香油高、中、低3个剂量组及冠心苏合丸阳性药物对照组后进行药效学实验。结果双香油软胶囊中苏合香油、降香油两者在所选择剂量范围内的理论最佳配比为1.5∶1.0;抗心肌缺血药效学试验表明,双香油有显著的抗心肌缺血的作用,与模型对照组比较具有显著的差异。结论双香油软胶囊具有抗心肌缺血、抗血小板聚集、抑制血栓形成等方面的作用,对防治心肌缺血等方面具有一定的应用前景。     

苦碟子注射液的抗肿瘤作用

目的探讨苦碟子注射液(Kudiezi injection,KDI)抗肿瘤作用。方法体内实验分别采用小鼠肝癌H22、肉瘤S180和Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,造模次日小鼠连续7 d给予苦碟子注射液,每天1次。剂量分别为5、10、20g.kg-1。第8天记录每组每只小鼠体质量和瘤质量,计算每组平均体质量和抑瘤率;体外实验采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测人宫颈癌Hela细胞或肝癌HepG-2细胞增殖抑制率;升白实验采用肝癌H22荷瘤小鼠模型,造模次日小鼠连续7 d给予苦碟子注射液,每天1次。剂量分别为5、10、20g.kg-1。第8天记录每组每只小鼠外周血中白细胞数量。结果苦碟子注射液(5、10、20g.kg-1)对3种荷瘤小鼠肿瘤增长有非常显著的抑制作用(P<0.05,P<0.01,P<0.001),同时显著升高肝癌H22小鼠外周血白细胞数量(P<0.05);在体外,苦碟子注射液(12.5~200g.L-1)对人宫颈癌Hela细胞或肝癌HepG-2细胞增殖有非常显著的抑制作用。结论苦碟子注射液体内体外均有抗肿瘤活性,在体内抑瘤的同时能显著升高肝癌H22小鼠外周血白细胞数量。     

淫羊藿消渴冲剂降糖作用的研究

目的考察淫羊藿消渴冲剂 (epimediumhypoglycemicspring ,EHS)对实验动物的降糖作用 ,并探讨其可能的机制。方法EHS连续灌胃给药 ,考察对正常小鼠、肾上腺素高血糖小鼠、四氧嘧啶高血糖大鼠空腹血糖 (fastingbloodglucose ,FBG)影响 ,此外还考察了EHS连续给药对四氧嘧啶大鼠肝糖原及胰岛病理组织形态学的影响。结果EHS对正常小鼠的FBG无影响 ,但可降低肾上腺素高血糖小鼠及四氧嘧啶高血糖大鼠的FBG。对其作用机制探讨发现 :EHS高、中剂量 (10 0、5 0mg·kg-1)能增加四氧嘧啶高血糖大鼠肝糖原的含量 ,光镜下观察EHS高剂量 (10 0mg·kg-1)对胰岛 β细胞有明显的修复作用。 结论EHS能降低肾上腺素高血糖小鼠和四氧嘧啶高血糖大鼠的FBG ,其机制是增加肝糖元含量及保护胰岛 β细胞     

六味地黄软胶囊对成年及幼年免疫低功小鼠特异性免疫功能的影响

目的考察六味地黄软胶囊对成年及幼年免疫低功小鼠特异性免疫机能的影响。方法采用环磷酰胺致小鼠免疫低功模型,采用四甲基偶氮唑蓝比色分析法、乳酸脱氢酶法、免疫荧光法及掌跖肿胀法等。结果六味地黄软胶囊2 5、5 0、10 0g·kg-1连续灌胃给药7d ,可显著提高环磷酰胺致特异性免疫功能低下成年及幼年小鼠的体液免疫和细胞免疫水平(P <0 0 1)。结论六味地黄软胶囊对环磷酰胺致成年及幼年小鼠特异性免疫功能低下有显著改善作用     

布洛芬川芎嗪酯的抗炎机制

目的探讨布洛芬川芎嗪酯(ITE)的抗炎机制。方法采用角叉菜胶致炎模型测定炎症渗出液中前列腺素E2(PGE2)和丙二醛(MDA)含量,测定小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)和红细胞过氧化氢酶(CAT)活力并测定大鼠肾上腺质量及Vc含量的变化。结果ITE能够显著降低炎症渗出液中PGE2和MDA含量,显著提高小鼠血清SOD和红细胞CAT活力,对大鼠肾上腺质量及Vc含量无影响。结论ITE抗炎作用可能是通过抑制环氧化酶(COX)、抗自由基、抗氧化作用实现的,而与垂体肾上腺皮质功能轴无关。