早期母乳喂养中常见乳房问题及处理

对268例产妇在早期母乳喂养中常见的乳房问题：乳头扁平或凹陷、乳头皲裂、奶胀进行了临床调查分析，提出了相应的处理措施。对乳头偏平或凹陷使用乳头伸展练习法和注射器抽吸乳头法纠正，经处理后首次吸吮成功距分娩的时间为15．91±2．64h（1．5～70h），出院时吸吮成功率97．9％；对乳头皲裂者着重纠正含接姿势，同时利用产妇自身乳汁治疗创口，治愈率100％；对奶胀者进行热敷、按摩、拍打乳房，增加喂哺次数，及时排空乳房，1～2天解除率100％。     

荧光共振能量转移技术检测ITGB4BP与P311间的相互作用

目的 利用激光共聚焦显微镜中的荧光共振能量转移(FRET)技术来验证整合素4结合蛋白(ITGB4BP)和P311间的相互作用.方法 分别构建能在哺乳动物细胞中表达ITGB4BP的绿色荧光融合蛋白ITGB4BP-EGFP和表达P311的红色荧光融合蛋白P311-DsRed的重组载体pITGB4BP-EGFP和pP311-DsRed,经酶切与测序鉴定正确后,共转染人胚肾293(HEK293)细胞48 h后,采用受体漂白方法(P311-DsRed),检测ITGB4BP和P311间的能量转移率(E)和相互间的作用距离(R).结果 重组载体pITGB4BP-EGFP和pP311-DsRed经双酶切鉴定正确,转染293细胞后经激光共聚焦显微镜观察能分别表达融合蛋白ITGB4BP-EGFP和P311-DsRed,在细胞质和细胞核中存在着共定位,FRET检测结果显示其能量转移率为14%,两个分子间的作用距离为6.3 nm.结论 成功构建了ITGB4BP-EGFP和P311-DsRed融合蛋白真核表达重组载体,在哺乳动物细胞中进行了表达后,利用FRET技术证实了活体细胞内ITGB4BP和P311间存在着相互作用.     

氯喹对脂多糖/内毒素诱导的RAW264.7细胞TLR4-MyD88非依赖信号转导途径的抑制作用

目的探讨氯喹对脂多糖/内毒素(lipopolysaccharide/endotoxin,LPS)诱导TLR4-MyD88非依赖途径的抑制作用。方法MTT法检测不同浓度氯喹(5、10、20、40、60μg/ml)对RAW264.7细胞活性的影响,ELISA检测培养体系中TNF-α、IL-6在2、6、12、18、24h的释放情况,RT-PCR检测TNF-α、IL-6、TLR4、TRAMmRNA的表达,EMSA检测NF-κB的活性,Westernblot检测IκBα磷酸化水平和IRF3的降解情况。结果氯喹浓度小于40μg/ml时对RAW264.7细胞活性无影响(P0.05);应用氯喹预处理后LPS诱导的RAW264.7细胞TNF-α、IL-6在蛋白水平和核酸水平均受到明显抑制(P0.05),TLR4和TRAM在核酸水平均受到显著抑制(P0.01);EMSA结果显示NF-κB的活化受到抑制,而Western blot检测显示IκBα磷酸化及IRF3的降解也受到抑制。结论氯喹对LPS诱导的RAW264.7细胞TLR4-MyD88非依赖信号转导途径具有抑制作用。     

地塞米松、TRH、EGF对宫内感染模型未成熟胎肺的影响

目的 研究地塞米松、EGF及TRH在感染情况下对早产胎肺的影响。方法 建立孕兔宫内感染模型,分别用地塞米松EGF、TRH联合先锋霉素V治疗3d,通过光镜、电镜观察胎肺的感染程度及结构分经。结果 地塞米松治疗组胎肺感染程度明显重于EGF治疗组和对照组,EGF、TRH治疗组和对照组之间无明显差异。光镜下可见地塞米松、EGF治疗组胎肺组织形态发育明显较对照组成熟、肺泡扩张更明显、肺泡腔较对照组更大、更规则、肺泡间隔更薄,而TRH治疗组胎肺发育程度介于地塞米松、EGF治疗组与对照组之间。电镜下,可见各治疗组与对照组明显不同,地塞米松、EGF和TRH治疗组胎肺Ⅱ型上皮细胞比对照组更成熟,胞浆内板层体数量明显多于对照组,对照组胎肺Ⅱ型上皮细胞内板层体较少见,但0常见有肺不张或肺萎陷征象。结论 在感染条件下,地塞米松,EGF和TRH均能促进胎肺的发育成熟,但地塞米松同时具有加重胎儿肺部感染的危险。     

白鲜皮提取物拮抗内毒素/脂多糖的实验观察

目的 了解白鲜皮提取物2（DPR-2）对内毒素／脂多糖（LPS）的体外拮抗活性。方法 采用动态比浊法鲎试验定量检测DPR-2对LPS（0．1μg／L）的中和作用，激光共聚焦扫描显微镜观察不同浓度DPR-2（0、8、0、16．0、32．0、64．0mg／L）对异硫氰酸荧光素-LPS（FITC-LPS，100．0μg／L）与小鼠单核细胞株RAW264、7结合力的影响，用荧光定量反转录．聚合酶链反应（RT-PCR）法检测以上浓度DPR-2对LPS（100．0μg／L）刺激的RAW264．7细胞肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）mRNA表达的影响。结果 DPR-2对LPS具有一定的中和作用（P〈0．05或P〈0．01）；浓度为32．0、64．0mg／L时可显著抑制FITC-LPS与RAW264．7细胞结合（P〈0.01）；对LPS刺激的小鼠RAW264．7细胞TNF-α和IL-6mRNA的表达有抑制作用，该作用具有一定的剂量-效应关系。结论 DPR-2可通过中和LPS的作用阻断与RAW264．7细胞膜受体结合，从而抑制LPS介导的细胞活化。     

应用激光共聚焦显微镜图像扫描技术研究AT2R与PCNA的表达

目的 研究血管紧张素Ⅱ型受体（angiotensinⅡ type 2 receptor，AT2R）与增殖细胞核抗原（proliferating—cell nuclear antigen，PCNA）表达之间的关系。方法 应用免疫荧光双标检测颈动脉AT2R和PCNA蛋白表达的变化。大鼠颈动脉在体转染带有绿色荧光蛋白报告基因AT2R重组腺病毒目的基因，经血管球囊扩张再灌注术后横断取材，制成冰冻切片，用CY3红色荧光抗体标记AT2R，用AMCA蓝色荧光抗体标记PCNA，激光共聚焦显微镜以405、488、543nm激发波长同时检测三种荧光标记。     

驻科中医师制度的实践探讨

总结了驻科中医师制度创立的背景、具体做法及要求、保障措施及实施效果。通过医院在此制度创立四年来门诊量、中医住院病例数、中医药课题、中医特色诊疗项目、中成药处方、饮片处方、中医诊疗设备、药占比、中医文化等方面的变化数据的统计处理,说明驻科中医师制度在医院转型初期中医药专业人员不足的情况下,是一种有效、可行、方便的自救办法,值得借鉴和推广。     

栀子抗内毒素组分的制备及活性初步分析

目的 从中药栀子中提取抗内毒素(lipopolysaccharide,LPS)的有效成分并进行活性初步分析.方法 运用大孔树脂AB-8、聚酰胺树脂、萃取技术及高效液相色谱分离技术对栀子水提物进行分离;通过测定他与lipid A的结合强弱对分离过程进行跟踪,获得粗组分D,经过HPLC技术进一步获得与lipid A有较强结合活性的组分CJ-1;动态比浊法鲎试验检测组分CJ-1在不同浓度(0.5、1、2 mg/L)对LPS(0.2μg/L)的中和作用;ELISA法检测CJ-1组分对LPS(100μg/L)刺激RAW264.7细胞释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响.结果 从中药栀子中逐步分离出与lipid A结合活性较高的组分CJ-1,当CJ-1浓度为0.2 g/L时,RU值为112 arc/s;CJ-1浓度为0.5～2.0 mg/L时,对0.2μg/L LPS介导的鲎试剂的凝结反应具有显著的抑制作用(P＜0.01,P＜0.05),并呈剂量效应关系;CJ-1浓度为50～200 mg/L时,对100μg/L的LPS介导的RAW264.7细胞释放TNF-α具有显著的抑制作用(P＜0.01,P＜0.05),并呈剂量效应关系.结论 依靠lipidA为靶点指导中药栀子水煎液分离,从中分离提取出与lipid A的结合作用较强的组分CJ-1,CJ-1在体外对LPS具有一定的中和作用.     

喂养方式对婴儿感染性疾病及体重的影响

消化道和呼吸道感染是婴儿最易发生的两种疾病。为了探讨母乳喂养对婴儿的保护作用,本文对出生后６个月以内的婴儿进行了跟踪随访,比较了不同喂养方式对婴儿腹泻和呼吸道感染及婴儿体重的影响。１材料与方法１．１调查方式让婴儿母亲记录婴儿出院后的主要喂养食品,母乳喂养情况,辅食添加情况及原因,疾病发生及治疗情况等,每月来院随访一次,并用电子秤测量婴儿体重。１．２婴儿分组母乳喂养组：纯母乳喂养或以母乳喂养为主（每天添加辅食或饮料不超过一次）。人工喂养组：完全或主要喂养母乳以外的食物（每天母乳喂养不超过两次）。混…     

黄蜂毒素1对内毒素/脂多糖所致小鼠急性肝损伤的影响

目的 了解黄蜂毒素1(MP-1)对LPS所致小鼠急性肝损伤的影响,探讨其作用机制.方法 将104只BALB/c小鼠按随机数字表法分为健康对照组(8只,不作任何处理)、LPS组(48只,尾静脉注射LPS 5 mg/kg)和MP-1组(48只,尾静脉注射LPS 5 mg/kg和MP-1 3 mg/kg).后2组小鼠于注射后2、6、12、24、48、72 h处死,每组每时相点8只,采集血和肝组织标本.动态比浊法鲎试验检测2组小鼠各时相点血浆LPS水平,酶联免疫吸附测定法检测血浆TNF-α和IL-6水平,全自动生化分析仪检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平,实时荧光定量RT-PCR检测肝组织Toll样受体4(TLR4)、TNF-α和IL-6 mRNA表达,观察注射药物后各时相点肝组织病理变化.另取健康对照组小鼠相同样本进行以上检测.结果 与健康对照组比较,LPS组小鼠血浆LPS和TNF-α水平在注射药物后2 h迅速升高,各为(18 320.50±2782.50)EU/mL和(988±130)ng/L,此后逐渐下降,72 h降至(1.80±0.80)EU/mL和(150±44)ng/L,接近健康对照组水平;IL-6、ALT和AST逐渐升高,12 h达峰值,随后下降,72 h接近健康对照组水平;LPS组小鼠肝组织TLR4、TNF-α和IL-6mRNA表达也在注射后明显增强,12～48 h时肝组织炎性反应性病理改变最为显著.与LPS组比较,MP-1组小鼠LPS、细胞因子和转氨酶水平在注射后不同程度地降低(P<0.05或P<0.01),肝组织相关基因表达受到抑制(P<0.05或P<0.01),病理改变较轻.结论 MP-1可能通过中和LPS,减少其诱导的炎性介质合成与释放,进而减轻小鼠肝组织的损伤.