绞股蓝皂苷A通过调节线粒体功能改善ox-LDL诱导的EA.hy926细胞损伤的机制研究

目的探讨绞股蓝皂苷A(GpA)通过保护线粒体功能对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导过后血管内皮细胞(ECs)(EA.hy926)损伤的保护作用。方法采用ox-LDL诱导ECs(EA.hy926)损伤模型,GpA组予GpA处理24 h。使用Elisa法检测ATP含量;使用紫外分光光度法检测线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ、复合物Ⅱ、复合物Ⅲ、复合物Ⅳ及复合物Ⅴ活性发生的变化;同时应用免疫印迹(Western Blotting)检测视神经萎缩蛋白1(OPA1)以及线粒体分裂蛋白1(Fis1)表达的变化情况。结果与正常组对比,模型组的ATP含量降低,与模型组对比GpA组的ATP含量升高。与正常组对比,模型组的呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的活性有明显的降低。与模型组对比GpA组的呼吸链酶复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的活性有所升高。与正常组对比,模型组Fis1的表达发生了上调,与模型组对比GpA组Fis1的表达发生了下调。与正常组对比模型组OPA1的表达发生了下调,与模型组对比GpA组OPA1的表达发生了上调。结论 GpA可能通过影响线粒体能量代谢及融合裂解对ox-LDL诱导的EA.hy926发挥保护作用进而防治动脉粥样硬化(AS)。     

丹参酮ⅡA通过PI3K/Akt/mTOR信号通路调控自噬抗内皮细胞氧化应激损伤研究

目的基于PI3K/Akt/mTOR自噬信号通路探讨丹参酮ⅡA对氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导内皮细胞氧化应激损伤的保护作用及机制。方法体外培养EA.hy926细胞,随机分为正常组、模型组、丹参酮ⅡA组、LY294002组、ox-LDL加丹参酮ⅡA组、oxLDL加丹参酮ⅡA加LY294002组。用比色法检测细胞氧化应激损伤丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力,利用倒置荧光显微镜及Naolive 3D cell explorer实时无标记3D显微成像系统检测自噬发生,同时应用免疫印迹(Western Blotting)检测自噬相关蛋白以及PI3K/Akt/mTOR通路蛋白的表达情况。结果与正常组相比,模型组MDA含量增高,SOD活力降低,微管相关蛋白1轻链3(LC3)I/II蛋白含量增多(P0.01);丹参酮ⅡA干预后细胞中MDA含量降低,SOD活力增高,LC3-I/LC3-II蛋白含量增多(P0.01)。与正常组相比,模型组PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平明显减少(P0.05或P0.01);与模型组相比,丹参酮ⅡA干预后细胞中PI3K、p-Akt、pmTOR蛋白表达水平明显减少(P0.05或P0.01);与ox-LDL加丹参酮ⅡA组相比,加入PI3K的抑制剂LY294002后细胞中的LC3-I/LC3-II蛋白含量减少,自噬水平减少(P0.01)。结论丹参酮ⅡA可能通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路促进自噬,对ox-LDL诱导的EA.Hy926细胞氧化应激损伤起到保护作用,进而防治动脉粥样硬化。     

斜视手术患者的心理特征及护理

目的:观察240例斜视患者的心理特征,给予有效的心理护理。方法:将斜视患者分为3个年龄组:A组4~12岁;B组13~28岁;C组29~36岁,根据其心理特点给予心理护理。结果:经过针对性的心理护理措施,患者均能以较好的心态配合手术。结论:对不同年龄阶段的斜视手术患者制定有针对性的心理护理措施,对于手术的成功及术后恢复有重要意义。     

绞股蓝不同有效成分对ox-LDL诱导的内皮细胞线粒体能量代谢相关蛋白表达的影响

目的:探讨绞股蓝不同成分[绞股蓝总皂苷(Gps)、绞股蓝皂苷XLIX(GpXLIX)和人参皂苷Rb3(GRb3)]对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞线粒体能量代谢相关蛋白的影响。方法:将人脐静脉内皮细胞融合细胞EA. hy926分为对照组、模型组、Gps组、GpXLIX组和GRb3组。对照组仅用DMEM完全培养基培养;模型组予以100 mg/L ox-LDL诱导内皮细胞48 h;Gps组、GpXLIX组和GRb3组在加入100 mg/L ox-LDL作用24 h后,再分别加入100 mg/L Gps、GpXLIX和GRb3处理24 h。采用ELISA法检测各组细胞ATP含量,采用Wes全自动蛋白质印迹定量分析系统及Western blot法检测线粒体能量代谢相关蛋白细胞色素C氧化酶5a亚基(Cox5a)、NADH:泛醌氧化还原酶核心亚基S1(Ndufs1)、ATP合成酶F1亚基α(ATP5a)及细胞色素C(Cyt C)的表达。结果:与对照组比较,模型组细胞ATP含量有所降低(P<0. 01);与模型组相比,Gps组、GpXLIX组和GRb3组细胞ATP含量均不同程度...     

益气化痰活血方对AIT小鼠甲状腺Ets-1、IL-17基因表达的影响

目的:研究益气化痰活血方对自身免疫性甲状腺炎(AIT)小鼠甲状腺Ets-1、IL-17基因表达的影响,从分子水平说明其影响AIT的部分机制。方法:60只8周龄NOD.H-2h4小鼠,随机分为正常组(NG),模型组(MG),西药组(SeG),益气化痰活血方高、中、低剂量组(YG-1、YG-2、YG-3),每组10只,正常组饲以蒸馏水,其余各组饲以含高碘化钠水(浓度0.05%)。8周后分别以蒸馏水,阳性对照药硒酵母混悬液,益气化痰活血方高、中、低剂量的水煎液给各组小鼠灌胃。8周后取小鼠甲状腺,RT-PCR法检测E26transformation-specific-1(Ets-1)、白细胞介素-17(IL-17)mRNA表达。结果:①与模型组比较,益气化痰活血方组均能使Ets-1 mRNA的表达水平上调(P<0.01);②与模型组比较,益气化痰活血方组均能使IL-17 mRNA的表达水平下调(P<0.01)。结论:益气化痰活血方能上调Ets-1基因表达水平,进而使IL-17炎症水平下降,这可能是其改善AIT小鼠免疫失常的机制之一。     

颈丛神经阻滞联合全麻在甲状腺次全切除术中的应用

目的比较颈丛神经阻滞联合全麻与安氟醚-芬太尼静吸复合麻醉,用于甲状腺次全切除术中的恢复质量和用药相关费用。方法ASAⅠ或Ⅱ级,择期行甲状腺次全切除手术患者60例,随机均分为颈丛神经阻滞联合全麻组（L组）和全麻组（Q组）,分别以安氟醚、安氟醚-芬太尼-维库溴钱维持麻醉。记录术毕停药后患者自主呼吸恢复时间、呼名睁眼时间、拔管时间、定向力恢复时间及拔管后主诉需要镇痛药的例次;术后24h访视患者,记录有无恶心、呕吐等不良反应;比较两种麻醉方式的用药相关费用。结果两种麻醉方式术毕呼名睁眼时间、拔管时间的差异元统计学意义,L组自主呼吸恢复时间、定向力恢复时间早于Q组,其拔管后主诉需要镇痛药者也少于Q组（P〈0．01）。两组患者术后恶心、呕吐等不良反应发生率的差异无统计学意义。L组麻醉用药相关费用明显低于Q组（P〈0．01）。结论两种麻醉方式苏醒速度相近,L组苏醒质量较好,恢复期疼痛较少,麻醉用药费用较低。     

不同补铁方案治疗血液透析患者肾性贫血的疗效及不良反应的护理

目的:探讨不同补铁方案治疗血透患者肾性贫血的观察与护理.方法:选择45例我院血透肾性贫血患者,随机分为A组(周期性铁补足组)、B组(维持性补铁组)及C组(周期性铁补足+维持性补铁组)3组,在透析中使用蔗糖铁注射液联合重组人红细胞生成素治疗,对3组患者治疗贫血的疗效及不良反应情况进行观察与护理.结果:(1)治疗后3组患者的Hb、Hct、SF及TSAT均较治疗前有明显升高(P＜0.05),C组、A组高于B组(P＜0.05),C组高于A组,但差异无统计学意义;(2)治疗后3组患者的血压、肝肾功能、不良反应均无明显变化.结论:3种静脉补铁方案均有效,安全性均较好,但周期性静脉补铁结合维持性静脉补铁的方案可能是治疗血透患者贫血的最佳方案.     

香砂六君子汤调控长链非编码RNA-HC/miR-130b调节胆固醇代谢对ApoE-/- AS小鼠肝脏脂质沉积的影响及机制

目的 探讨香砂六君子汤通过影响长链非编码RNA-HC（Lnc-HC）/微RNA-130b（miR-130b）调节胆固醇代谢改善载脂蛋白E（ApoE）^-/-动脉粥样硬化（AS）小鼠肝脏脂质沉积防治AS机制研究。方法 10只C57BL/6J小鼠作为正常组，30只健康ApoE^-/-小鼠采用高脂饲料喂养12周，随机分为模型组、香砂六君子汤组（19.12 g·kg^-1·d^-1）和辛伐他汀组（2.275 mg·kg^-1·d^-1），连续灌胃4周。全自动生化分析仪检测小鼠血清血脂水平，苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠肝脏病理形态学变化，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测Lnc-HC，miR-130b mRNA表达，Real-time PCR和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ），肝X受体（LXR），腺苷三磷酸结合盒转运体A1（ABCA1），腺苷三磷酸结合盒转运体G1（ABCG1），腺苷三磷酸结合盒转运体G5（ABCG5），腺苷三磷酸结合盒转运体G8（ABCG8） mRNA及蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组小鼠血脂异常明显，肝细胞体积变大，脂肪空泡明显，小鼠肝脏Lnc-HC，miR-130b表达显著升高，小鼠肝脏PPARγ，LXR，ABCA1，ABCG1，ABCG5，ABCG8 mRNA及蛋白表达明显降低（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，香砂六君子汤组和辛伐他汀组小鼠血脂异常得以改善，肝细胞脂肪空泡明显减少，香砂六君子汤组小鼠肝脏Lnc-HC，miR-130b表达明显降低（P<0.05，P<0.01），香砂六君子汤组和辛伐他汀组小鼠肝脏PPARγ，ABCA1，ABCG1，ABCG5，ABCG8 mRNA及蛋白水平呈上升趋势，其中，香砂六君子汤组小鼠肝脏LXR mRNA及蛋白表达明显升高（P<0.05）。结论 香砂六君子汤可能通过影响Lnc-HC/miR-130b调节PPARγ介导的胆固醇代谢过程改善ApoE^-/-AS小鼠肝脏脂质沉积，进而起到防治AS的作用。     

三种荧光标记法对寡核苷酸芯片杂交信号的影响

目的 观察标记引物法、随机渗入标记法、末端转移标记法三种荧光标记法对寡核苷酸芯片杂交信号的影响。方法 将淋球菌gyrA基因91位密码子突变型探针倍比稀释成终浓度为1000／μmol／L～0．25μmol／L的梯度浓度点样并制作寡核苷酸芯片，PCR扩增荧光标记包含gyrA基因突变的目的DNA片段，与芯片杂交，分别记录三种标记方法的杂交信号强度。结果 标记引物法的荧光信号最强，随机渗入标记法的荧光信号强度次之，其Cy5—duTP最佳浓度为0．1mmol／L(dTTP：Cy5—dUTP=10：1)，末端转移标记法反应时间在60min和120min时荧光信号值相近。点样的探针浓度达到31μmol／L，以上，荧光信号为平台期。结论 明确了三种荧光标记法对寡核苷酸芯片杂交信号的影响，有助于选择寡核苷酸芯片的荧光标记方法。     

腰-硬联合麻醉在直肠癌根治手术中的应用

资料与方法 选择60例住院直肠癌根治手术患者，年龄38～60岁，ASAⅠ或Ⅱ级，无冠心病、高血压、重度贫血和内分泌疾病。于术前30分钟肌注苯巴妥钠100mg、阿托品0．5mg。随机分为CSEA组（A组）和硬外麻醉组（B组）。