儿童韦格纳肉芽肿病2例

例1.男,13岁,因反复发热、口腔溃疡2年,加重伴腭部溃烂1个月于2 0 0 2年9月入院。患儿2年前反复发热,体温38 5°C左右,在当地治疗无好转,第1次入我科查体:稍气促,舌尖部有一溃疡,双手杵状指,血清肺吸虫抗体阳性,肺CT示双肺间质性炎症,腹B超示肝实质弥漫性病变,予以吡喹酮治疗1个疗程,病情好转出院。出院后仍间断有发热及口腔溃疡,于半年后第2次入我科,查发砷、尿砷均增高(患儿生活在矿区) ,予以驱砷治疗,尿砷正常后出院。出院后患儿病情逐渐加重,口腔溃疡愈合时间延长。本次(第3次)入院前1个月出现腭部溃烂一直不愈,并逐渐出现右面部肿大…     

甲氨喋呤血药浓度监测在儿童髓外白血病防治中应用

为探讨大剂量甲氨喋呤在小儿髓外白血病防治中的药代动力学改变及血药浓度监测的临床意义，对52例为预防髓外白血病的急性淋巴细胞白血病患儿，应用大剂量甲氨喋呤(3．0～5．0g／m^2)治疗1～3个疗程，每疗程进行3次血药浓度监测。结果显示，开始静脉滴注后24h甲氨喋呤血清药物浓度出现峰值，48h明显下降，72h绝大多数患儿血药浓度回复到投药前水平。提示根据测定的甲氨喋呤血药浓度水平，可适当增加甲氨喋呤的药物剂量以增强防治髓外白血病的疗效，或增加解救药物的剂量和给药次数，以减少其毒副作用，指导临床治疗。     

树突状细胞与肿瘤免疫治疗

树突状细胞的生物学特征及其在免疫应答中的重要作用，使之成为当前肿瘤免疫治疗研究的热点。树突状细胞是目前已知功能最强的抗原呈递细胞，可在体内活化CD4^ ,CD8^ T细胞，从而激发一系列的特异性免疫应答。本文就其特性及在抗肿瘤免疫中的作用作一综述。     

儿童急性髓细胞性白血病WAVEl基因对耐药相关基因表达影响的研究

目的 探讨儿童急性髓细胞性白血病(AML)中WASP家族Verprolin同源蛋白1(WAVE1)基因参与P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRPl)、肺耐药相关蛋白(LRP)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)表达和调控的机制.方法 将52例患儿依据是否在随访期内持续缓解(CCR)分为难治/复发组和缓解组,应用实时定量PCR(RQ-PCR)法和蛋白印迹(Western blot)分别检测52例AML患儿治疗前及疾病发展过程中骨髓单个核细胞(BMMCs)中WAVE1、p-gp、MRPl、LRP及BCRP蛋白和基因mRNA的表达水平.将PCDNA3.1-WAVE1真核表达质粒转染HL60细胞构建WAVE1高表达HL-60细胞,将WAVE1基因的特异性小片段干扰RNA(WAVE1 siRNA)转染HL60/ADR构建WAVE1低表达HL60/ADR细胞;Western blot和RQ-PCR法检测基因转染前后白血病细胞系WAVE1、MRPl及BCRP蛋白及基因的表达水平.结果 ①复发/难治组病例的WAVE1及耐药相关基因水平明显高于缓解组患儿WAVE1基因表达水平(P<0.05);②同一患儿初治及复发时的WAVE1基因水平明显高于缓解期表达水平(P<0.05);③与HL60细胞相比较,HI.60/ADR细胞WAVE1 mRNA及蛋白表达水平增加3.53倍及95%;④转染WAVE1后HL60细胞系MRPl mRNA和蛋白表达水平分别增加16.54倍、129%,BCRP mRNA和蛋白表达水平分别增加4.93倍及96%,而转染WAVE1 siRNA的HL60/ADR细胞MRPl mRNA和蛋白的表达水平为干扰前的0.11倍及43%,BCRP mRNA和蛋白的表达水平为转染前的0.14倍及71%.结论 WAVE1与儿童AML的病程及预后相关,参与了髓系白血病细胞多药耐药的形成并可影响MRP及BCRPl等多个重要的耐药相关基因的表达和作用.     

118例小儿厌氧菌败血症

159例经血培养证实的小儿败血症中厌氧菌118例(74.8％),共检出菌148株。同一病人同时或先后检出2种厌氧菌20例,3种厌氧菌5例,25例同时检出需氧菌。检出厌氧菌中主要是消化球菌、脆弱类杆菌和专性厌氧杆菌。94例体外药敏试验甲硝哒唑、氯霉素、氟哌酸对厌氧菌抗菌活性很高。临床参照药敏,给予青霉素、头孢菌素、甲硝哒唑联合治疗,取得满意疗效。     

荧光定量聚合酶链反应检测儿童白血病骨髓GRIK2基因的表达

目的 分析骨髓中GRIK2基因产物在白血病患儿、白血病细胞株及非血液病患儿中的表达差异.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和荧光定量PCR(FQ-PCR)方法分别检测100例白血病患儿、3个白血病细胞株(Jurkat、Baji和HL-60细胞株)及30例对照组骨髓中GRIK2的表达情况.结果 RT-PCR和FQ-PCR检测标本的阳性率分别为4.51%(6/133例)和7.52%(7/133例),2种检测方法均显示GRIK2基因在白血病和正常造血细胞间的表达无统计学差异(P＞0.05),但GRIK2 mRNA在无6q缺失的T-急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿中较B-AIJL患儿表达高,在有6q缺失的T-ALL和B-ALL患儿中GRIK2表达为阴性,T细胞株Jurkat有阳性表达,B细胞株Raji和HL-60细胞株为阴性表达;30例对照组中3例有较高水平表达.结论 GRIK2 mRNA在骨髓中水平低或不表达,GRIK2基因是否为ALL的肿瘤抑制基因(TSG)有待进一步探讨.     

shRNA干扰MIPU1基因对脑星形细胞瘤U251细胞生物学行为的影响

目的： 探讨特异性短发夹RNA(shRNA) 干扰心肌缺血预适应上调基因1(myocardial ischemia preconditioning upregulated gene 1,MIPU1)对人脑星形细胞瘤U251 细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭能力的影响。方法： 采用瞬时转染MIPU1 shRNA干扰质粒,蛋白质印迹检测其干扰效率,MTT法检测各组细胞的增殖情况,Hoechest 染 色法和caspase-3 活性检测细胞凋亡程度,划痕实验及Transwell 实验检测细胞迁移及侵袭能力。结果： 转染MIPU1 shRNA 可明显降低MIPU1 蛋白的表达(P<0.05);与对照组比较,MIPU1 shRNA 组的U251 细胞增殖能力下降,凋亡 明显增加,细胞迁移及侵袭能力减弱(均P<0.05)。结论： MIPU1 shRNA能有效降低U251 细胞中MIPU1 蛋白的表达, 干扰MIPU1的表达可促进U251细胞凋亡,抑制U251细胞的增殖、迁移及侵袭。     

人细胞周期蛋白C在儿童急性淋巴细胞性白血病中的表达及对白血病细胞增殖的影响

目的：探讨人细胞周期蛋白C(Human cyclin C,CCNC)在儿童急性淋巴细胞性白血病（Acute Lymphocyte Leukemia, ALL）中的表达,并初步研究CCNC在体外对白血病细胞增殖的影响。方法：实时荧光定量PCR法检测CCNC在初治ALL、白血病细胞系及正常对照组中的表达,利用基因重组技术构建含有CCNC的全长的真核表达载体PCMV-2B-CCNC,用脂质体Lifefectamine2000将真核表达载体转染至人急淋细胞系6T-CEM细胞株中,Western-blot检测转染后的细胞CCNC蛋白的表达量,流式细胞分析CCNC对白血病细胞增殖的作用。结果：CCNC在对照组小儿、初治小儿ALL骨髓及6T-CEM细胞系中均有表达,在初治ALL中表达强度降低（P<0.05）。基因测序及重组质粒酶切后鉴定成功构建了PCMV-2B-CCNC真核表达载体,将其转染至6T-CEM细胞中,Western-blot检测到转染后的白血病细胞CCNC蛋白表达量增高,流式细胞结果表明在转染了CCNC基因的白血病细胞中,在细胞的Go/G1峰前出现一个亚二倍体峰,细胞凋亡指数有所增高（P<0.05）。结论: CCNC在初治小儿ALL中出现较低的表达强度,在转染人白血病细胞后,具有诱导白血病细胞凋亡作用,有可能与儿童ALL的发病相关。 关键词：儿童急性淋巴细胞性白血病,细胞周期蛋白C     

RNA干扰在功能基因组学和疾病基因治疗中应用进展

RNA干扰(RNAi)是由双链小分子干扰RNA片段引发的特异性基因沉默，是一种转录后基因沉默机制。RNAi是一种生物体广泛存在的基因调控机制，参与了机体正常发育和抵抗外源性病毒入侵等多种生命活动。作为一种简单、高效的代替基因敲除的遗传工具，RNAi正在功能基因组学和疾病基因治疗领域掀起一场革命，并将彻底改变这些领域的研究步伐。该文重点介绍了RNAi在功能基因组学和疾病基因治疗中应用进展。