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目的 建立一种荧光比率方法来测量细胞内钙离子的动力学变化,并研究血管平滑肌细胞钙动力学变化在重症休克血管反应性降低中的作用。方法 复制SD大鼠失血性休克模型,分离肠系膜细动脉血管平滑肌(ASMC)。使用荧光探针Fluo-3/AM、FuraRed双标记比率方法结合激光扫描共聚焦显微成像技术测定单个平滑肌细胞钙动力学变化;评估荧光比率法在动态测定胞内钙离子浓度变化中的应用及其观察ATP敏感钾通道(KATP)特异性阻滞剂优降糖对血管反应性和钙动力学影响。结果 休克后2h(失代偿期1,血管反应性明显降低,NE作用带来的平滑肌细胞内钙离子浓度升高的程度明显减弱;加入优降糖可明显提高NE对平滑肌细胞内钙离子的升高作用,改善细动咏对NE的反应性,带来血管反应性部分恢复。在37℃,Flu-o-3/AM、FuraRed浓度为5μmol/L的条件下,肠系膜细动脉平滑肌细胞负载40min左右即可获得良好的标记效果。结论 优降糖特异性的阻滞ATP敏感钾通道的开放,增多细胞外钙内流并提高血管反应性;使用荧光比率法可以使胞内钙离子浓度的测量不受荧光探针浓度、细胞大小、激光漂白等因素的影响,可以准确、实时、动态测量细胞内钙离子浓度变化。 相似文献
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白藜芦醇促进Ca2+介导的线粒体Ca2+转运发生 总被引:1,自引:0,他引:1
目的为探讨白藜芦醇(Tesveratrol,Res)诱导细胞凋亡过程中线粒体的作用,Res对线粒体通透性的影响。研究了Res对线粒体通透性转变孔道及Ca^2+诱导的线粒体内Ca^2+释放(CICR)发生的影响。方法提取大鼠肝线粒体。通过紫外分光光度仪检测Res作用下线粒体的膨胀,借此测定线粒体PTP的开放状态;采用双波长双光束紫外分光光度仪检测Res作用下测试体系内Ca^2+浓度的变化引起的D(λ)值的变化,以反映线粒体Ca^2+的转运情况(即CICR)。结果Res能促进Ca^2+诱导的鼠肝线粒体PTP开放;并且Res可以加速Ca^2+介导的线粒体Ca^2+的转运(CICR):而Ca^2+通道抑制剂tdfluoperazine和钌红(RR)能分别部分或完全抑制Res的这种促进作用。结论Res能促进Ca^2+诱导的鼠肝线粒体CICR过程。并且Res对PTP的作用依赖于Res对线粒体CICR的影响,Res促进线粒体膜的通透性可能是Res诱导细胞凋亡的一种途径。 相似文献
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目的为探讨白藜芦醇(Tesveratrol,Res)诱导细胞凋亡过程中线粒体的作用,Res对线粒体通透性的影响,研究了Res对线粒体通透性转变孔道及Ca2+诱导的线粒体内Ca2+释放(CICR)发生的影响.方法提取大鼠肝线粒体.通过紫外分光光度仪检测Res作用下线粒体的膨胀,借此测定线粒体PTP的开放状态;采用双波长双光束紫外分光光度仪检测Res作用下测试体系内Ca2+浓度的变化引起的D(λ)值的变化,以反映线粒体Ca2+的转运情况(即CICR).结果Res能促进Ca2+诱导的鼠肝线粒体PTP开放;并且Res可以加速Ca2+介导的线粒体Ca2+的转运(CICR);而Ca2+通道抑制剂trifluoperazine和钌红(RR)能分别部分或完全抑制Res的这种促进作用.结论Res能促进Ca2+诱导的鼠肝线粒体CICR过程.并且Res对PTP的作用依赖于Res对线粒体CICR的影响,Res促进线粒体膜的通透性可能是Res诱导细胞凋亡的一种途径. 相似文献
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目的了解2015-2016年度龙山县感染性腹泻病例的病原学特征,为制定相应的防控措施提供科学依据。方法2015年5月-2017年4月,收集在龙山县哨点医院就诊的符合纳入标准的腹泻病例相关信息,采集粪便标本进行肠道致病菌及病毒检测,并进行数据分析。结果共调查并检测264例感染性腹泻病例,检出阳性病例98例,总感染率为37. 1%。2015、2016年度感染率分别为45. 0%、30. 6%,差异有统计学意义(χ~2=5. 851,P=0. 016)。细菌、病毒的感染率分别为13. 3%、25. 4%,差异有统计学意义(χ~2=12. 443,P<0. 001)。共分离出致病菌35株,阳性率为13. 3%,以沙门菌为主(74. 3%);共分离出病毒78株,阳性率为29. 5%,以诺如病毒为主(61. 5%),细菌、病毒病原谱构成差异均有统计学意义(χ~2=36. 260,P<0. 001;χ~2=11. 957,P=0. 008)。不同性别病原检出阳性率及病原谱构成差异无统计学意义(P> 0. 05);青少年组、壮年组和老年组病毒检出阳性率分别为45. 2%、19. 2%、10. 8%,差异有统计学意义(χ~2=24. 175,P<0. 001)。各年龄组细菌检出阳性率及细菌、病毒病原谱构成差异均无统计学意义(P>0. 05)。7-9月份细菌检出阳性率高,检出沙门菌22份,占总数的84. 6%; 11月-次年3月病毒检出阳性率高,诺如病毒春秋季感染较多,共检出36份,占总数的75%,轮状病毒感染呈现秋冬季高峰特点,共检出9份,占总数的60%。结论 2015-2016年度龙山县腹泻病例的主要病原是沙门菌、诺如病毒和A组轮状病毒,且具有明显的季节流行特征。 相似文献
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目的:研究白藜芦醇诱导HepG2细胞凋亡的机制,探讨白藜芦醇诱导HepG2细胞凋亡过程中线粒体形态功能的改变.方法:采用AnnexinV-FITC/PI标记结合流式细胞仪测定白藜芦醇诱导HepG2细胞凋亡的作用;电子显微镜观察白藜芦醇处理8 h、12 h和24 h后线粒体的超微结构变化;rhodamine123标记结合流式细胞仪观察白藜芦醇处理后HepG2细胞线粒体跨膜电位(△ψm)的变化.结果:流式细胞术分析显示,白藜芦醇能显著诱导HepG2细胞凋亡,并呈浓度依赖性.白藜芦醇处理细胞12 h后,电子显微镜检测到线粒体外膜肿胀或破裂,并可伴有线粒体嵴数量减少或消失,24 h后观察到明显的细胞线粒体消失、染色质浓缩、细胞核裂解为碎块等细胞凋亡特征.流式细胞仪结果显示,经白藜芦醇处理后,rhodamine123的荧光强度明显降低.说明白藜芦醇可使△ψm去极化.结论:线粒体的形态和结构变化在白藜芦醇诱导HepG2细胞凋亡过程中起着重要作用,白藜芦醇诱导细胞凋亡的作用可能与其破坏△ψm和影响线粒体结构有关. 相似文献
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目的 探讨白藜芦醇对亚急性衰老小鼠海马神经细胞的保护作用.方法 D-半乳糖颈背部皮下注射制备亚急性衰老小鼠模型,设正常对照组、对照组、高低剂量处理组和阳性对照组.第3周始,处理组分别给予白藜芦醇15、45mg/kg(低、高剂量)灌胃,对照组给予生理盐水或DMSO溶液灌胃.8周后,检测小鼠血清、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.制作石蜡切片,尼氏染色观察小鼠海马CA1区形态结构,免疫组化检测P53蛋白表达,TUNEL法检测细胞凋亡.结果 各组小鼠海马组织形态结构无明显变化;与对照组相比,白藜芦醇45 mg/kg体重组小鼠血清和脑组织中SOD活性明显升高,MDA含量明显下降;白藜芦醇45 mg/kg体重组小鼠海马CA1区P53蛋白表达阳性细胞较对照组小鼠减少,但各组均无明显的凋亡细胞.结论 白藜芦醇能增强亚急性衰老小鼠的抗氧化功能,降低亚急性衰老小鼠海马CA1区神经元P53蛋白的表达. 相似文献