重庆市消除丝虫病后的监测

目的探讨达到消除丝虫病后的监测措施 ,巩固消除丝虫病的防治成果。方法 1 998-2 0 0 1年 ,选择 1个村为纵向监测点 ,进行病原学和蚊媒纵向监测。对原丝虫病流行县防治工作薄弱地区、重流行区、边界地区 ,每年选择 2个县 2个村开展病原学和蚊媒的横向监测。加强流动人口 ,应征入伍青年重点对象的监测。结果纵向监测点累计血检 6 91 1人次 ,未检出微丝蚴血症者 ;解剖致倦库蚊 5 4 31只 ,未检出人体幼丝虫阳性蚊。横向监测共 7个点县 (区 ) ,累计血检 1 0 1 82人 ,未检出微丝蚴血症者 ;解剖致倦库蚊 1 31 94只 ,未检出人体幼丝虫阳性蚊。重点人群监测流动人口 5 0 5 1人 ,应征入伍青年 92 2 1人 ,均未检出微丝蚴血症者。结论监测结果表明 ,重庆市内源性传染源存在的可能性极小 ,已肃清了传染源 ,巩固了消除丝虫病的成果     

一种潜在的抑癌基因-CHD5参与肝癌的发生和发展

目的 研究CHD5在三种不同细胞株SMMC7721、HepG2及LO2中的表达及在人类肝癌(HCC)和癌旁组织中的表达,并探讨CHD5与临床病理特征之间的关系.方法 用逆转录酶聚合链反应(RT-PCR)检测30例肝癌手术标本及其相应的癌旁组织中CHD5 mRNA的表达缺失率,同时检测其在三种不同细胞株中的表达情况.结果 CHD5 mRNA在SMMC7721中表达缺失,在HepG2及LO2巾表达的吸光度值分别是0.364±0.026、0.127±0.015(P<0.05).CHD5 mRNA在肝癌组织、癌旁组织中的缺失率分别为53.3%、13.3%,差异有统计学意义(x2<0.01).在肝癌组织中CHD5 mRNA的缺失与肝癌的细胞分化程度、肿瘤直径有关(x2<0.05),而与性别、年龄和有无肝外转移灶等无关(x2>0.05).结论 CHD5在人类肝癌中表达缺失率高,并与肝癌分化程度、肿瘤大小有关,可能是参与肝癌发生和发展的重要抑癌基因.     

急性小肠坏死9O例临床分析

目的：探讨急性小肠坏死的病因及其临床特征,提高急性小肠坏死的诊治水平。方法：收集2003-01-2012—12收治的急性小肠坏死患者的一般资料、病史、临床表现、并发症、影像学检查、血液学检查、病理检查等相关资料,归纳总结其临床特征。结果：共收集急性小肠坏死病例90例,其中嵌顿疝26例、粘连24例、肠扭转22例、肠系膜上动脉栓塞9例、肠系膜上静脉血栓形成5例、腹部闭合性损伤3例、肠套叠1例。全组治愈81例,病情危重自动放弃4例,死亡5例。结论：急性小肠坏死病因复杂,早期诊断困难,及时行手术切除是一种有效的治愈方法。     

燃煤型地方性氟中毒病区除氟取暖房研究

燃煤污染型地方性氟中毒(简称地氟病)是使用无排烟设备的土炉灶燃煤做饭、取暖致氟污染室内空气和粮食,造成人体总摄氟量增加而引起的慢性全身性疾病.     

缺氧诱导热休克蛋白70-2表达的分子机制

目的 观察缺氧对HepG32细胞中热休克蛋白(HSP)70-2(基因名为HSPA2)表达的影响,探讨缺氧条件下缺氧诱导因子(HIF)-1在转录水平调控HSP70-2表达的具体机制. 方法 以物理缺氧法和化学缺氧诱导剂(DFO或CoC12)诱导法分别模拟肿瘤缺氧环境,Western blot检测HIF-1α和HSP70-2蛋白表达的变化,荧光素酶报告基因分析技术检测缺氧对HSPA2基因的激活作用.HIF-1α抑制剂(YC-1)或HIF-1α小干扰RNA(siRNA)处理后检测缺氧HepG2细胞中HSP70-2的表达变化.构建一系列截短和突变的HSPA2基因启动子荧光素酶报告基因质粒,将其与HIF-1α siRNA共转染HepG2细胞,荧光素酶分析技术检测HSPA2启动子活性的变化,寻找HIF-1在HSPA2启动子上的结合位点.各组间比较用方差分析,两组间比较用t检验. 结果 缺氧培养6 h后,HepG2细胞中HIF-1α和HSP70-2表达增加,其表达量随着缺氧培养时间的延长而逐渐增加(F=77.369,P<0.01;F=108.854,P<0.01).各组分别加终浓度为0、50、100 μmol/L的化学缺氧诱导剂DFO或终浓度为0、100、200 μmol/L的CoCl2,培养24 h后检测,随着DFO浓度增加,HIF-1α和HSP70-2蛋白表达逐渐增加(F=443.174,P<0.01;F=589.238,P<0.01);随着COCl2浓度增加,HIF-1 α和HSP70-2蛋白表达也逐渐增加(F=637.724,P<0.01;F=692.918,P<0.01).与常氧培养相比,缺氧培养后HSPA2启动子活性增加7.09倍(t=43.551,P<0.01).随着YC-1浓度升高,HIF-1α表达受到明显抑制(F=883.614,P<0.01),HSP70-2表达水平也相应下降(F=218.112,P<0.01).转染HIF-1α siRNA后HIF-1α表达受到明显抑制(F=577.130,P<0.01),HSP70-2表达水平也相应下降(F=465.598,P<0.01).构建系列截短的HSPA2启动子报告基因载体转染HepG2细胞后检测,转染HSPA2(-1114/+62)-LUC和HSPA2(-653/+62)-LUC细胞的相对荧光素酶活性无明显改变,但转染HSPA2(-385/+62)-LUC细胞的相对荧光素酶活性较前明显降低(t=13.717,P<0.01).分别构建突变缺氧反应元件(HRE)1和HRE2的HSPA2启动子报告基因载体,转染HepG2细胞后检测,突变HRE1后HSPA2启动子活性显著降低(t=10.954,P<0.01),但是突变HRE2后HSPA2启动子活性无明显改变.结论 缺氧显著上调HepG2细胞中HSP70-2的表达,其机制可能是HIF-1与HSPA2启动子上HRE1结合后激活该基因的转录.     

靶向Pokemon基因shRNA重组质粒的构建及其对HepG2细胞生长的影响

目的:观察携带shRNA的重组质粒对肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响,并初步探讨其分子机制.方法:设计3对针对Pokcmon基因不同位点的shRNA片段的真核表达载体,脂质体介导转染肝癌细胞株HepG2细胞.RT-PCR及Western blot检测转染前后Pokemon mRNA及蛋白质的 表达,MTT和流式细胞仪分析转染后细胞增殖及凋亡的变化,RT-PCR检测其可能的下游因子β-catenin及H-ras的表达.结果:成功构建含shRNA片段的重组质粒,依次命名为pshRNA1、2、3.转染HepG2细胞后,Pokemon基因的mRNA及蛋白质表达水平明显下调,以pshRNA2最强,抑制率分别为75.2%(RNA水平)和72.6l%(蛋白质水平).MTT显示pshRNA2可明显抑制细胞增殖;流式细胞仪测定转染后细胞凋亡增加;RT-PCR显示下游因子H-ras的表达明显降低(P＜0.05),而β-catenin的表达没有变化(P＞0.05).结论:采用RNAi技术可以特异性阻断Pokemon 基因的表达;Pokemon基因有促进肝癌细胞株增殖及抑制其凋亡的作用,该效应可能与下调其下游因子H-ras的表达有关.     

奉节县燃煤污染型地方性氟中毒防治效果调查分析

目的了解奉节县燃煤型氟中毒防治效果,为地氟病防治工作提供科学依据。方法运用Dean′s法检查奉节县所有病区村8～12岁儿童氟斑牙（GB16396-1996）,计算氟斑牙检出率、缺损率、氟斑牙指数。对儿童氟斑牙检出率≥30%的病区村全部开展入户调查,调查病区村居民的燃料结构、房屋结构、炉灶使用情况、主食结构等。随机抽查3个病区村150名8～12岁儿童尿氟（WS/T89-1996）,计算几何均数。结果儿童氟斑牙检出率为35.40%,缺损率为1.57%,氟斑牙指数为0.48。病区村由2003年179个降至2009年的120个,达到控制病区村标准的有59个。120个儿童氟斑牙检出率≥30%的病区村中,燃煤使用率87.58%;台灶经常使用率12.70%,有排烟设施的占13.30%;炉子中无排烟设施铁皮炉使用率87.35%,有排烟设施降氟炉使用率12.65%。主食以大米为主,占92.32%。2004年与2008年尿氟几何均数分别为0.84、0.62mg/L。检测96个病区村玉米和辣椒各480份,氟含量均值分别为（1.73±1.97）mg/kg、（5.34±4.66）mg/kg。结论奉节县燃煤型氟中毒病区病情呈轻微流行,2004-2008年中央转移支付地方公共卫生专项资金地氟病防治项目的实施取得显著效果。建议加强对现有未达到控制标准的病区村继续实施改炉改灶项目和健康促进工作。     

2008年重庆市燃煤型氟中毒病区环境氟调查分析

目的 了解重庆市燃煤型氟中毒病区环境氟分布特征,为制订科学防治措施提供科学依据.方法 2008年,根据重庆市的历史资料,以巫山县凌云村、栗子村和彭水县太平村、大青村4个病区村和永川区的双楼村、现龙村2个非病区村为调查村.对4个病区村所有8～12岁儿童进行氟斑牙检查,对16岁以上人群进行临床氟骨症检查.6个调查村每村抽取5户居民,每户采集1份家中所用煤、拌煤土、混土煤、煤渣、土壤,每份500 g;每村抽取15户居民,每户采集玉米、大米、土豆、蔬菜,粮食和蔬菜样品各1份,每份500 g,干辣椒样品1份,每份100 g;每户采集1份饮用水水样,每份250 ml;有饮茶习惯的居民村,每村采集茶叶15户以上,每户采集50 g茶叶和600 ml茶水测定含氟量;每村抽取5户居民,测旺火时的室内、外空气含氟量.结果 病区村儿童氟斑牙检出率为74.65%(736/986),成人氟骨症检出率为7.20%(75/1592);病区村煤、拌煤土、混土煤、煤渣、土壤含氟量分别为(310.56±209.46)、(360.51±224.96)、(293.62±65.15)、(186.59±133.66)、(497.54±294.70)mg/kg;非病区村分别为(48.68±10.62)、(275.66±62.69)、(152.20±34.43)、(209±14±188.66)、(269.98±58.21)mg/kg,病区村均显著高于非病区村(t=7.67、31.54、5.82、5.82,P均<0.05);病区村饮用水、玉米、辣椒、大米、土豆、蔬菜含氟量分别为(0.30±0.14)、(1.83±2.67)、(23.50±91.80)、(0.77±0.25)、(0.44±0.11)、(0.48±0.18)mg/kg,非病区村分别为(0.18±0.06)、(2.21±0.46)、(2.82±2.51)、(1.31±0.21)、(0.64±0.41)、(1.10±0.77)mg/kg;饮用水、辣椒含氟量病区村显著高于非病区村(t=7.79、2.33,P均<0.05);大米、土豆、蔬菜含氟量非病区村显著高于病区村(t=39.29、4.69、4.01,P均<0.05);病区村茶叶、茶叶水含氟量[(99.41±55.83)、(1.59±0.91)mg/L]与非病区村[(79.95±43.78)、(1.80±1.16)mg/L]比较,差异无统计学意义(t=1.01、0.27,P均>0.05);但病区人均饮茶水量[(1.45±0.68)L/d]显著高于非病区村[(1.00±0.47)L/d,t=4.27,P<0.05].病区村室内空气氟[(12.77±8.08)μg/m3]显著高于非病区村[(1.16±1.08)μg/m3,t=9.49,P<0.01],病区村室外空气氟[(1.10±1.57)μg/m3]与非病区村[(0.39±0.31)μg/m3]比较,差异无统计学意义(t=2.01,P>0.05).结论 重庆市氟中毒病区的氟源为煤和拌煤土,氟进入人体的途径主要为呼吸道,从食物摄入量很少,干辣椒含氟量虽高,但居民不食用;防治措施应以控制室内空气氟为主.饮茶可能为氟中毒的因素之一,须在深入研究基础上采取相应措施.     

缺氧环境中Netrin-1对肝癌细胞骨架重组的作用研究

目的 研究缺氧对人肝癌细胞HepG2细胞骨架重组的影响及Netrin-1在细胞骨架重组中的作用.方法 通过1%O_2 低氧培养建立人肝癌细胞HepG2物理缺氧模型,观测缺氧对细胞形态的改变.构建针对Netrin-1 mRNA的干扰质粒pshRNA-Netrin-1及阴性对照质粒pGensil-1,并将其转染HepG2细胞,筛选稳定转染细胞株.观测转染pshRNA-Netrin-1质粒前后,鬼笔环肽检测缺氧对肝癌细胞对HepG2细胞骨架重组的影响,细胞迁移实验检测缺氧条件下干扰Netrin-1对细胞迁移能力的影响.同时构建Netrin-1真核表达质粒pGNET1转染HepG2细胞,观测Netrin-1对肝癌细胞骨架重组的作用.结果 低氧培养HepG2细胞胞体变得狭长,细胞连接松散.Netrin-1蛋白表达水平显著升高(P＜0.05).HepG2细胞稳定转染pshRNA-Netrin-1后,Netrin-1 mRNA表达显著下降.抑制率达73.32%±4.12%(P＜0.01).鬼笔环肽检测F-actin结果 显示,缺氧促进HepG2细胞骨架重组,转染pshRNA-Netrin-1后,缺氧促进HepG2细胞骨架重组受到显著抑制.细胞迁移实验结果 显示,缺氧条件下干扰Netrin-1的表达显著抑制HepG细胞迁移能力(P＜0.05).转染 pGNET1后,HepG2细胞骨架发生重组.结论 缺氧促进HepG2细胞骨架重组与Netrin-1表达水平升高相关,Netrin-1表达的上调可能是缺氧促进肝癌细胞骨架重组进而促进侵袭转移的机制之一.     

重庆市饮水型地方性氟中毒现况调查结果分析

目的加强监测，掌握饮水型地方性氟中毒病区病情现状及进展，完成水氟可疑超标地区的饮用水氟含量筛查。方法按照GB／T5750-2006检测饮用水氟含量，并计算算术均值；如发现饮水氟含量超标（大于1mg／L），则运用Dean法调查病区村8-12岁所有儿童氟斑牙情况，计算氟斑牙检出率，以及根据《地方性氟骨症的临床诊断标准》调查病区村16岁以上人群氟骨症情况，计算氟骨症检出率。结果共检测了150份饮用水，有6份水氟含量超过国家水氟含量标准（1．00mg／L），合格率为96％；鹅颈关村儿童氟斑牙检出率为16．10％；氟骨症病人检出率为0。结论重庆市饮水型地方性氟中毒病区饮用水水氟含量合格，病情达到国家控制标准。