多药耐药相关蛋白和肺耐药蛋白在胃癌组织中的表达

目的　探讨多药耐药相关蛋白 (MRP)和肺耐药蛋白 (LRP)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法　应用免疫组化S -P法检测 90例胃癌组织和 3 0例正常胃黏膜中MRP和LRP的表达情况。结果　 90例胃癌组织中的MRP、LRP阳性表达率分别为 92 .2 %和 93 .3 % ,均高于正常胃黏膜的阳性表达率 (P <0 .0 5 ) ,在高中分化腺癌中的阳性表达率高于低分化腺癌和黏液癌 (P <0 .0 5 ) ,不同浸润程度及是否有淋巴结转移者的阳性表达率相互比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　MRP、LRP在胃癌组织中均呈高表达 ,均在胃癌原发性多药耐药中起重要作用     

记忆合金药铜IUD对兔子宫内膜及重要脏器的组织形态学影响

目的:研究记忆合金药铜节育器(IUD)对兔子宫内膜及重要脏器的组织形态学影响。方法:将雌性日本大耳白兔随机分为3组,放置记忆合金药铜IUD(实验组)和放置不锈钢药铜IUD(对照组)各18只,空白对照组6只,手术放置IUD于兔子宫腔内,术后1、3、6个月处死兔,取出子宫、输卵管、卵巢和心肺肝脾肾组织,切片HE染色,光镜下进行组织学检查。结果:两置器组IUD直接压迫下的区域,子宫腔扩张,黏膜层变薄,黏膜皱襞减少。空白组子宫壁和两置器组IUD直接压迫区的子宫壁均可见小血管轻度扩张充血,3组比较无明显差异。心肺肝脾肾组织均未见异常。结论:记忆合金药铜IUD与不锈钢药铜IUD对兔子宫内膜及重要脏器的组织形态学影响相似。     

shRNA抑制高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ基因的表达对胃癌细胞侵袭力的影响及机制

目的：初步分析高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ（Golgi alpha-mannosidase Ⅱ,GMⅡ）在低中不同分化人胃癌细胞系中的差异表达,以探讨GMⅡ在胃癌发生发展中的作用。方法：应用阳离子脂质体法将合成的靶向GMⅡ基因的pGPU6/GFP/Neo-GMⅡ-1406质粒载体,分别转染至低分化胃癌细胞MGC-803和中分化胃癌细胞SGC-7901中,然后荧光倒置显微镜观察并计算转染率,最后经过G418筛选出稳定转染的细胞株。应用RT-PCR和Western blot检测转染后GMⅡ和E-cadherin、α-catenin 的mRNA及蛋白表达变化情况,同时利用细胞划痕实验和Transwell体外侵袭实验来测定GMⅡ被沉默后两株细胞侵袭能力的变化。结果：GMⅡ短发卡RNA（short hairpin RNA,shRNA）转染胃癌MGC-803和SGC-7901细胞后GMⅡ的mRNA和蛋白表达明显抑制,而E-cadherin和α-catenin的2种因子检测结果明显升高（P＜0.05）;细胞划痕实验结果显示,转染重组质粒pGPU6/GFP/Neo-GMⅡ-1406组（GMⅡshRNA组）与对照组（空白对照组,阴性对照组）相比,GMⅡ被沉默后的胃癌细胞的侵袭能力降低（P＜0.05）;Transwell体外侵袭实验中GMⅡshRNA组胃癌细胞较空白对照组、阴性对照组细胞侵袭能力都明显降低,18 h穿过小室的细胞数分别为：（65±5）、（197±6）、（186±5）,（72±4）、（178±4）、（184±5）个与对照组相比差别具有统计学意义（MＧＣ-803：P=0.000,SGC-7901：P=0.000）。结论：GMⅡ基因沉默后的胃癌细胞的侵袭能力下降,可能与上调E-cadherin、α-catenin的表达有关。     

高尔基体基质蛋白130、14-3-3ζ、整合素α3在中、低分化胃癌组织的表达及意义

目的：检测高尔基体基质蛋白130（Golgi matrix protein 130,GM130）、14-3-3 zeta（14-3-3ζ）、整合素α3（integrin al－pha3,Integrin α3）在正常胃组织和中、低分化胃癌组织中的表达,并由此探讨其与胃癌的关系。方法：运用免疫组织化学检测（strept avidin-biotin complex,SABC）法分别检测临床收集的84例胃癌患者的胃癌组织和正常胃组织（距癌肿边缘5 cm以上的胃组织）GM130、14-3-3ζ、Integrin α3的表达情况,并结合临床病理资料进行分析;用RT-PCR和Western blot分别检测42例胃癌（低分化胃癌24例,中分化胃癌18例）和42例正常胃组织GM130、14-3-3ζ、Integrin α3的mRNA和蛋白表达情况。结果：（1）ＧＭ1301、14-3-3ζ2、Integrin α33在胃癌组织中的表达阳性率分别为88.1%、90.5%、95.2%,明显高于上述各指标在正常胃组织上的阳性表达率（52.4%、27.4%、42.9%）;低分化胃癌组上述３个指标的表达较中分化胃癌组高,且２组间差异有统计学意义（P1=0.000、P2=0.007、P3=0.000）。Spearman等级相关性分析显示,胃癌中ＧＭ130、14-3-3ζ、Integrin α3之间表达呈两两正相关（P＜0.05）。（2）ＧＭ130、14-3-3ζ、Integrin α3的表达均与年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤直径、肿瘤浸润深度、有无淋巴结转移无关（P >0.05）;而与肿瘤病理组织学分级及临床分期有关（P<0.05）。（3）RT-PCR及Western blot结果显示ＧＭ130、14-3-3ζ、Integrin α3 mRNA和蛋白质的表达在胃癌组较正常胃组织组高,低分化胃癌组较中和分化胃癌组高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：GM130的异常表达可能在胃癌的发生发展中发挥重要作用。     

shRNA抑制p115表达对胃癌体外血管形成的影响

目的初步探讨胃癌BGC-823细胞高尔基体囊泡转运蛋白(golgi-vesicular transport protein,p115)对胃癌血管形成的影响及其可能机制。方法采用脂质体介导法将p115 shRNA-1318转染入胃癌BGC-823细胞株,经G418筛选出稳定转染的细胞株。利用Western blot、RT-PCR和细胞免疫荧光方法检测转染后的p115抑制效应及其对MIF、p-Akt、VEGF-A的调控情况;采用细胞活性检测实验、Transwell体外侵袭实验和血管形成实验方法分别检测转染p115 shRNA的胃癌BGC-823细胞对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖,迁移和血管形成的影响。结果 p115 shRNA-1318转染后胃癌BGC-823细胞p115、MIF、p-Akt和VEGF-A的蛋白及mRNA表达明显抑制(P<0.01);细胞免疫荧光:与对照组相比,p115 shRNA组p115、MIF及VEGF-A的色泽暗红且抑制率分别为63%、65%、68%;细胞活性检测:与对照组相比,p115 shRNA组...     

胃癌组织和细胞中P115 、MIF的表达及意义

目的 观察胃癌组织和细胞中高尔基体转运蛋白P115和MIF的表达情况,探讨其在胃癌发生、发展中的意义.方法 用S-P、Western blot和RT-PCR法检测P115及MIF在正常胃黏膜和胃癌组织,3种细胞株(正常胃黏膜上皮GES-1,不同分化程度的胃癌细胞株MKN-28,BGC-823)中的蛋白和mRNA表达情况.结果 P115和MIF在胃癌组织中的阳性表达率分别为73.3%、80%,在正常胃黏膜中的阳性表达率分别为40%、46.7%,胃癌组织中P115和MIF的表达明显高于正常胃黏膜(P＜0.01) ,且P115的表达和MIF的表达呈正相关(r=0.433,P=0.017);胃癌组织中P115、MIF的蛋白和mRNA表达水平明显高于正常胃黏膜组织(P＜0.01).免疫细胞化学,Western blot和RT-PCR结果显示: P115、MIF在胃癌细胞株MKN-28、BGC-823中的蛋白及mRNA表达水平明显高于正常胃黏膜上皮GES-1(P＜0.01);且低分化胃癌细胞株BGC-823中P115和MIF 的表达水平明显高于高分化胃癌细胞株MKN-28(P＜0.05).结论 P115和MIF的过表达,可能在胃癌的发生过程中起协同作用;对P115和MIF相互作用机制的深入探讨有可能使其成为研究胃癌发生、发展的分子机制的新靶点.     

高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ在胃癌中的表达及其与E-cadherin、Galectin-3的关系

目的:探讨胃癌高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(Golgiα-mannosidase Ⅱ,GMⅡ)、E-cadherin、Gahctin-3的表达及其与胃癌发生发展的关系.方法:应用免疫组化SP法检测65例胃癌,20例正常胃黏膜组织中GMⅡ、E-cadherin、Gahctin-3的表达情况.结果:65例胃癌中GM Ⅱ、E-cadherin、Galectin-3的阳性表达率分别为85%(55/65)、40%(26/65)、74%(48/65).20例胃正常切缘中GM Ⅱ、E-cadherin、Galectin-3的阳性表达率分别为50%(10/20)、100%(20/20)、40%(8/20).GM Ⅱ、Galeetin-3在浸润程度深及有淋巴结转移的胃癌组织中表达明显高于浸润程度浅及无淋巴结转移的胃癌组织(P<0.05).而E-cadherin则在分化程度低,浸润程度深及有淋巴结转移的胃癌组织中表达明显低于分化程度高,浸润程度浅及无淋巴结转移的胃癌组织(P<0.05).统计学分析GM Ⅱ与E-cadherin之间呈负相关(P<0.05),与Galectin-3元相关性(P>0.05).结论:GM Ⅱ、Galectin-3在胃癌中高表达,且与癌组织的浸润和转移明显相关.同时GM Ⅱ与E-eadherin呈负相关,提示GM Ⅱ可能通过下调E-cadherin的表达来促进胃癌的发展.     

三种水解酶在胃癌细胞中的分布及意义

采用酶组织化学，免疫组织化学法及电镜技术研究芳香硫酸酯酶，β－半乳糖苷酶及溶菌酶在胃癌细胞中有的分布与癌细胞的分化和浸润的关系，结果及发现粘液细胞癌的超微结构特点是易见内质网，高尔基复合体及多量的分泌颗粒，三种水解酶的反应强度均高于低分化及高分子化腺癌（Ｐ〈０．０１），其癌周的纤维组织及平滑肌消失，结果提示粘液细胞癌的ＧＥＲＬ系统分化较成熟，能分泌多种水解酶，破坏癌周间质，有利于癌细胞的浸润和扩散     

胃癌细胞寡糖结构的变化与淋巴结转移的关系

目的 检测五种寡糖在胃癌原发灶和淋巴结转移灶中的表达情况,探讨糖蛋白与转移的关系。方法 收集伴有淋巴结转移的胃癌５０例,行免疫组化和亲和组化染色,染色强度的判断采用了既考虑肿瘤的异质性又能客观地进行分析的半定量计分系统,统计学方法采用ＳＡＳ系统软件,作配对ｔ检验及相关分析,结果 三种组织学类型原发灶和转移灶均有５种寡糖的表达,Ｓｌｅ在三种组织学类型的转移灶中的表达均显著高于原发灶（Ｐ〈０．０５）,