精子膜处理方法对精子介导的外源质粒转基因效率的影响

目的 探讨超声、NaOH和溶血卵磷脂三种小鼠精子膜处理方法对转染质粒与精子共孵育后卵胞质内单精子注射(ICSI)授精,观察质粒转染的效率.方法 采用上述三种方法对小鼠精子进行膜处理,通过Transgreen/PI荧光染色,观察小鼠精子质膜的完整性;通过流式细胞仪检测小鼠精子DNA的完整性;将处理后的小鼠精子与带GFP的转染质粒共孵育,再采用ICSI与促排卵后成熟小鼠卵子授精,统计各组受精率、卵裂率及荧光囊胚率,观察三种方法对小鼠精子作为质粒载体ICSI后转基因效率的影响.结果 溶血卵磷脂方法处理小鼠精子膜的效果显著优于超声和NaOH组(99.2％ vs 94.7％％,90.9)(P＜0.05).三种方法对小鼠精子DNA结构的损伤无显著性差异(P＞0.05),行ICSI后三组小鼠胚胎发育率差异不显著(P＞0.05),各组之间荧光胚胎的形成率无显著性差异(P＞0.05).结论 三种小鼠精子膜处理方法的效率均能达到90％以上,且对小鼠精子DNA的损伤、行ICSI后小鼠胚胎的发育率和转基因效率无显著差异,因此,三种方法均可用于ICSI法小鼠转基因研究.     

苯苄唑凝胶治疗浅部真菌病临床疗效观察

我科应用 1%联苯苄唑凝胶 (宁夏元康医药化工科技开发公司研制批号 :97110 67) ,对 70例门诊确诊的体癣、股癣、手足癣及花斑癣患者进行了临床试验 ,以1%联苯苄唑乳膏 (德国进口 )作为对照 ,现将结果报告如下。病例资料　患者共 70例 ,男 3 8例 ,女 3 2例 ,年龄 16～ 65岁 ,其中手足癣 3 4例 ,体癣 2 1例 ,股癣 8例 ,花斑癣 7例。诊断标准为具有典型的临床症状并且真菌镜检及培养阳性者。入选者须符合以上诊断标准 ,体健 ,愿意配合检查治疗者 ,年龄在 16～ 65岁之间 ,不合并湿疹 ,接触性皮炎 ,荨麻疹等过敏性皮肤病。无细菌感染、无药物接触…     

典型病案教学法在皮肤性病学中的应用

皮肤性病学是近年来医学发展过程中逐渐从内科和外科中分出来的一个专门学科。但教师讲授皮肤性病学时,如果不借助于图像,仅仅通过语言是很难将病人的皮损和疾病诊断的关系描述清楚,学生则更难于理解,这直接影响到授课效果。据调查统计,同样的内容学生通过听讲可记住15%,通过阅     

生殖细胞特异表达蛋白SP3111在受精及早期胚胎发育中的作用

目的:采用抗SP3111抗体Ab2438封闭后的体外受精试验,研究SP3111蛋白在受精及早期胚胎发育过程中的作用。方法:首先在体外受精前,将精子分为3组:实验组、空白对照组、阴性对照组。实验组精子与Ab2438共同孵育1h后进行体外受精,观察2、4、6、8、22h的受精率及碎裂胚胎的发生率。接着将Ab2438作用于受精后的卵母细胞,观察作用22h后的受精率及碎裂胚胎的发生率。结果:抗体Ab2438作用小鼠精子后,碎裂胚胎发生率在加入精子后2、4、6、8、22h分别为5.26%、8.77%、23.25%、43.42%、59.21%,与各对照组碎裂胚胎形成率均有显著性差异(P<0.01)。Ab2438作用于受精后的卵母细胞,22h后实验组的正常胚胎及碎裂胚胎的形成率分别为23.64%和63.64%,与各对照组相比差异有显著性(P<0.01)。结论:抗SP3111抗体对小鼠受精及早期胚胎发育有明显的影响,因此SP3111蛋白可能是一个信号分子,与其他蛋白一起在受精和早期胚胎发育中发挥作用,对SP3111蛋白生殖功能的进一步研究将为不育的分子机制的研究提供新的思路。     

人类精子RNA生殖功能研究进展

人类成熟精子中RNA的存在已经被证实,主要包括mRNA和部分小RNA家族成员。随着研究深入,发现精子mRNA表达差异,与精子活力和男性生育功能相关。而部分精子中特异存在的mRNA和小RNA在精卵融合和早期胚胎发育调控中有重要作用。已经获得的结果提示精源性RNA的表达具有个体差异性,并且是胚胎发育所必需的。对精子RNA功能的深入研究将会对男性不育、人类辅助生育技术以及核移植技术等相关领域产生推动作用。     

Caspase3、Bcl-2和PCNA在银屑病皮损组织中的表达

目的　探讨银屑病发生发展中细胞增殖和凋亡相关指标表达的趋势。方法　应用免疫组化技术检测 30例寻常型银屑病皮损、邻近皮肤及 10例正常皮肤中PCNA、Bcl - 2、Caspase3的表达。结果　在正常表皮中Bcl - 2和PCNA在基底层阳性表达 ,但在寻常型银屑病皮损中Bcl- 2表达明显低于正常皮肤组 ,皮损处与邻近皮损处表达、邻近皮损处与正常皮肤表达比较有统计学差异 (均P <0 0 5 ) ;PCNA在银屑病皮损处为角质形成细胞广泛阳性表达 ,皮损处与邻近皮肤的表达、邻近皮肤与正常皮肤相比有统计学差异 (P <0 0 1) ;Caspase3在寻常型银屑病皮损处与邻近皮肤及正常皮肤的表达无统计学差异 (P >0 0 5 )。结论　银屑病时 ,PCNA过度表达 ,Bcl - 2低表达 ,表明细胞过度增殖 ,凋亡基因Caspase3表达无统计学差异     

精原干细胞体内转染途径建立rsP3111转基因小鼠的可行性研究

目的构建目的基因rsp3111与荧光蛋白融合表达的质粒,并且实现目的基因在体外受精胚胎及在体附睾成熟精子中表达。为进一步通过精原干细胞体内转染途径建rsp3111转基因小鼠奠定基础。方法将rsp3111基因以Xholl和BdmHI酶切后插入经同样酶切处理的真核细胞表达质粒pDsRed-Monomer—N1中,重组质粒为pDsRed-Monomer—N1-rSP3111。采用共培养和脂质体介导方法将ICR小鼠精子与pDsRed-Monomer—N1-rSP3111质粒共孵育,再与成熟的卵母细胞体外受精;或用脂质体介导睾丸直接注射法,将pDsRed-Monomer—N1-rSP3111导入小鼠睾丸中,通过PCR及荧光显微镜观察体外受精后的受精卵及体内睾丸转染rsp3111基因后附睾精子中是否有外源rsp3111基因的表达。结果PCR结果表明,rsp3111基因成功地转入了附睾精子及受精卵中。荧光检测结果表明,目的基因rsp3111在体外受精胚胎及睾丸的曲细精管中均有表达。结论通过雄性生殖细胞载体法实现了大鼠配子特异性蛋白rSP3111在小鼠受精卵及睾丸、附睾精子中的表选为进一步通过精原干细胞体内转染途径建立rsp3111转基因小鼠奠定了基础。     

伊曲康唑1周和2周疗法治疗足癣50例疗效观察

伊曲康唑已广泛用于临床,我们于１９９８年５月～１９９８年１０月采用该药共治疗５０例足癣,效果满意,现报告如下。１资料与方法１．１一般资料：５０例中,角化型２４例,其它型２６例。所有病例均在治疗前经临床及真菌学镜检确诊,近半月未接受外用抗真菌药或类固醇...     

药物性皮炎206例临床分析

为了解药物性皮炎的发生情况，对206例药物性皮炎，就其致敏药物的种类及发疹情况进行回顾分析，从而指导临床，尽可能减少药物性皮炎的发生。     

用冲击量伊曲糠唑治疗孢子丝菌病临床观察

我科自１９９４～１９９７年４月从所发现的１８例孢子丝菌病患者中（经真菌培养证实）选出１０例患者，按皮损轻重分为二组（中度皮损８例删除）。第一组采用大剂量伊曲糠唑治疗；第二组采用常规量伊曲糠唑治疗，现将两组治疗结果，近期疗效报告如下。１一般资料所选择患...