流感病毒快速检测方法特异性和敏感性研究

目的 比较多重逆转录聚合酶链反应(mRT-PCR)和胶体金法检测流感病毒的敏感性和特异性.方法 采用mRT-PCR和胶体金法检测经细胞培养和红细胞凝集抑制试验(HI)鉴定为A/H1、A/H3、B型流感病毒的鼻咽拭标本78份,阴性鼻咽拭标本40份,并对已稀释成101～105病毒半数感染量(TCID50)/0.1 mL的3株H1、H3、B型流感病毒进行敏感性试验.结果 mRT-PCR对A型流感病毒的检测敏感性为44.8%,特异性为97.5%;对B型流感病毒检测敏感性为20.0%,特异性为100.0%.胶体金法对A型流感病毒检测敏感性为44.8%,特异性为100.0%;对B型流感病毒检测敏感性为5.0%,特异性为97.5%.对经20代内狗肾细胞(MDCK)分离培养阳性的4份A/H1、4份A/H3和3份B型流感培养液,mRT-PCR和胶体金法检测的阳性符合率与型别符合率均为100.0%.mRT-PCR检测流感病毒敏感性为103 TCID50/0.1 mL;胶体金法检测的敏感性为103 TCID50/0.1 mL.结论 mRT-PCR和胶体金法的敏感性与特异性无差异;mRT-PCR和胶体金法均可用于人群流感鼻咽拭标本流感病毒快速检测,特别是聚集性暴发流感患者,建议采样时标本数要适当放大2～3倍.mRT-PCR可进一步确定流感病毒的H1和H3亚型.     

上海地区2004年至2008年甲型流行性感冒病毒亚型的分布

目的 分析近5年上海地区甲型流行性感冒(流感)病毒亚型的分布并探究其原因.方法 对上海地区流感监测哨点流感样患者和聚集性流感暴发患者,采集咽拭子标本接种犬肾细胞(MDCK),直接荧光免疫法鉴定阳性分离株型别,多重RT-PCR鉴定亚型.结果 2004年至2005年初的季节性流感以A/H3N2为主;2005年末至2006年中期的季节性流感以A/H1N1为主;2006年末到2007年10月份分离到的流感毒株基本为A/H3N2亚型;2008年1月至5月份,人群流感病毒分离株仍以A/H3N2处于优势地位,但从2008年7月开始的季节性流感则以A/H1N1占绝对优势.结论 近5年上海地区季节性流感主要为甲型流感病毒H3N2和H1N1亚型,但在不同年份的季节性流感中流行强度有所不同.     

肠粘连形成过程中的生物力学分析

目的 在肠粘连形成过程中,测定分离粘着肠管之间的牵拉力,探讨不同大小的力牵拉肠管所致的肠壁病理学变化.方法 70只Wistar雄性大鼠随机分为7组(n=10)构建肠粘连模型,分别测定肠粘连形成后第1～7天分离肠管之间粘连的牵拉力,动态分析其变化.另取正常肠管分别加载不同的力于肠管两侧进行牵拉,检测不同的牵拉力所致肠管的病理学变化.结果 术后第1～7d分离大鼠肠管间粘连的牵拉力分别为F1(58.672±13.286)g、F2(83.260±10.066)g、F3(103.280±16.389)g、F4(121.330±17.643)g、F5(145.180±17.454)g、F6(172.900±22.074)g、F7(191.900±20.838)g,(F=77.282,P＜0.01),牵拉力与粘连形成时间呈线性正相关(r=0.9973,P＜0.01).肠管间加载的牵拉力越大肠壁的病理学损伤越明显.结论 肠粘连形成过程中,分离肠管之间的粘着的牵拉力随着时间的推移逐渐增加,过大牵拉力强行分离可损伤肠管.     

KRAS突变对抗EGFR单抗治疗转移性结直肠癌影响的Meta分析

目的评价化疗或联合抗EGFR单抗治疗转移性结直肠癌的临床疗效与KRAS基因突变的关系。方法用"colorectal carcinoma"、"cetuximab"、"Panitumumab"系统检索PubMed、EMBASE、Ovid、CENTRAL(2000年1月-2011年11月)中关于KRAS突变对化疗或联合抗EGFR单抗(包括Cetuximab和Panitumumab)治疗转移性结直肠癌疗效的影响。结果包括无进展期(progressionfree survival,PFS)和总生存期(overall survival,OS)及其相应HR,依据Cochrane Handbook 5.0.2对符合标准的RCT进行Meta分析。结果 PFS的HR在KRAS野生型患者和突变型患者分别为-0.22(95%CI:-0.37~-0.07,P=0.005)和1.07(95%CI:0.88~1.30,P=0.48),OS的HR在KRAS野生型和突变型则为0.83(95%CI:0.82~0.85,P0.00001)、1.04(95%CI:0.95~1.15,P=0.40)。抗EGFR治疗均未见明显延长KRAS突变型mCRC患者的PFS和OS。结论 KRAS状态是预测mCRC患者抗EGFR治疗疗效的有效生物学标志之一。     

溶葡萄球菌复合酶体外抗流感病毒效果研究

目的：研究溶葡萄球菌复合酶体外抗流感病毒效果，探寻预防、治疗流感病毒感染的新药和给药途径。方法：应用细胞病变抑制试验和直接免疫荧光法．经不同给药途径、作用时间和剂量，研究溶葡萄球菌复合酶体外抗流感病毒效果。并与已被普遍公认有效的抗流感药物磷酸奥司他韦比较。结果：两种试验方法都显示，两种药物在不同给药方式下，大部分实验组对病毒的抑制作用与对照组相比均有统计学意义（P〈0．05）。溶葡萄球菌复合酶1：5稀释后与病毒作用30min和磷酸奥司他韦治疗组的抗病毒效果最显著，且两者间差别无统计学意义（P〉0．05）。结论：溶葡萄球菌复合酶在体外抗流感病毒中具有较明显的作用，部分实验组的效果和公认的高效抗流感药物磷酸奥司他韦没有差别。在预防流感流行中具有一定的应用前景。     

重型颅脑损伤术中的管理

重型颅脑损伤的死亡率和致残率居高不下，总死亡率一直保持在30％～50％左右。目前手术仍是治疗颅脑损伤的重要手段之一，因此合理的麻醉管理是提高重型颅脑损伤患者救治成功率和生存质量的重要手段。我院自1998-01～2002-12对132例重型颅脑损伤病人实施手术治疗，现将结果报告如下。     

改良间接血凝试验用于钩端螺旋体病诊断的初步研究

目的：对钩端螺旋体病常规HA法进行改进，探讨基层适用的临床诊断方法。方法：采用正常人血清吸收致敏血球，以封闭致敏血球对正常人血清凝集素反应位点，达到去除率非特异凝集的效果，并与常规HA与MA法作比较。结果：对28份确诊钩体病人及60份非钩体病人血清检测，结果两种HA法阳性符合率达91．3％，阴性符合率达93．3％（P＞0．05）；对28份钩体患者血清效价测定结果表明，两种HA平均滴度差异无显著性（P＞0．05）；对108份钩体疑似病人血清用3种方法比较，以MA为标准，常规HA敏感性为78．6％，特异性为91．3％；而改良HA敏感性为82．1％，特异性为96．3％，改良HA结果更接近MA。结论；用改良HA法检测钩体病准确性不亚于常规HA，方法简便可靠，一步完成，可作为基层无特殊设备条件下钩体病临床诊断之参考。     

无锡地区流感病毒病原学监测及H3亚型血凝素基因变异研究

目的 监测无锡地区2005年至2008年季节性流感型与亚型分布并了解2008年部分A/H3N2分离株血凝素(8A)基因变异状况.方法 无锡地区医院门诊流感样患者及集体单位聚集性流感样暴发患者采集鼻咽拭标本,接种MDCK细胞,采用标准抗血清鉴定阳性分离株型与亚型,并对2008年部分H3亚型流感病毒进行HA全基因测序,分析HA基因变异状况.结果 2005年至2008年9月,在无锡地区流感样患者中共分离到435株流感病毒,其中164株为A/H1N1亚型,80株为MH3N2亚型,B型191株.型与亚型有明显季节性分布强弱特征.H3亚型HA序列分析,无锡地区9株分离株与上海地区同期分离株接近,有很多序列相互穿插归属于进化树的同一分支,与WHO 2008-2009年疫苗推荐株相近.结论 近年无锡地区散发和局部暴发流感病毒感染仍主要为A/H1N1、A/H3N2和B型,A/H3N2 HA基因与上海地区同期分离株接近,与WHO 2008-2009年疫苗推荐株相近.     

甲型H1N1流行性感冒病毒血凝素蛋白基因进化研究

Objective To determine the evolutionary rate and divergence time of influenza A virus HA gene isolated recently worldwide pandemic and explore the origin and its transmission. Methods A total of 344 HI sequences available in the GenBank (including 248 isolated from human, 84 from swine, 11 from avian, and 1 from ferret) and 7 isolated in Shanghai were collected. The nucleotide substitution rate and time to most recent common ancestor (tMRCA) was calculated using molecular clock theory and Bayesian Skyline Plot (BSP) based on Markov chain Monte Carlo. Then genetic phylogeny was constructed referring to posterior distribution. Results It was found that H1 sequences in the US from human, swine and avian were clustered significantly with swine H1 ones from Asia phylogenetieally (Cluster US). The second cluster (Cluster Eurasian Human) nearly consisted of human H1 sequences isolated in other regions. The third cluster (Cluster Eurasian Animal) consisted of swine and avian H1 sequences from China and Italy respectively. As for all the H1 sequences, the evolutionary rate was of 2.57×10-3substitutions/site per year averagely (95% Highest Posterior Density: 1.96×10-3-3.03×10-3/site per year). The estimated dates for tMRCA of human H1 in Europe and swine H1 in the mainland of China were the earliest, with the corresponding rates of 6.46×10-3/site per year and 0.97×10-3/site per year respectively. The tMRCAs of human and swine H1 sequences from the US were similar, with the rates of 5.86×10-3/site per year and 5.02×10-3/site per year. Conclusion The present flu outbreak was possibly induced by long-term circulation of influenza A virus (H1 N1) in human population and swine herds in America. There was no evidence proving that influenza virus in China involved in the present outbreak.     

膀胱塑料异物一例

女,28岁,已婚。以下腹部堕感伴尿频、尿急9天为主诉入院。入院前曾在当地医院以尿路感染抗炎治疗未见显效而转入我院治疗。尿常规:脓球 、红血球 、上皮细胞 。先按尿路感染治疗,症状缓解停药后又反复上述症状。经泌尿外科和妇科会诊,未发现尿道、阴道、子宫颈、子宫及附件等异常。随后进一步向患者询问病史,方告明入院前半个月因会