周期型马来丝虫GAPDH部分编码基因原核及真核表达载体的构建

[目的]构建我国流行的周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶(BmGAPDH)部分编码基因原核和真核表达质粒以及基因序列分析,为进一步的研究奠定基础。[方法]根据GeneBank中马来丝虫GAPDH基因的已知序列设计引物,以周期型马来丝虫总RNA为模板,反转录PCR(RT-PCR)扩增目的编码基因。扩增产物经初步鉴定后将其克隆入pGEM-T载体,转化大肠杆菌(E.coli)DH5α,筛选阳性克隆,进行双酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性重组质粒pGEM-BmGAPDH,经测序验证,并进行同源性比较。亚克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcD-NA3.1(+)-BmGAPDH,转染COS-7细胞后进行RT-PCR验证。[结果]RT-PCR扩增出一条约877 bp大小的特异性条带,重组质粒双酶切的PCR结果与预期相符,DNA序列分析与GeneBank已知的基因序列同源性为99%。转染的COS-7细胞高水平表达BmGAPDH的mRNA,根据克隆的目的基因序列推导的氨基酸序列与GenBank登录的一致。[结论]成功构建了周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶部分编码基因原核及真核表达载体,为进一步功能研究提供了条件。     

马来丝虫疫苗候选分子的研究进展

马来丝虫是一种能引发人类淋巴丝虫病的寄生线虫。其生活史和抗原成分复杂,寻找有效的疫苗一直是研究工作的重点。分子生物学、生物信息学的发展使研发新的高效安全的马来丝虫疫苗成为可能。该文就马来丝虫疫苗候选分子的研究进展作一综述。     

一起结核病暴发疫情调查

2005年3月,杭州市西湖区某高校发生一起结核病暴发疫情,累计报告结核病病例51例,罹患率为0.46%。经采取综合性控制措施,3月15日后无新发病例,现将调查结果报道如下。     

肺康复在胸腔镜肺癌围手术期的应用效果

目的 探讨肺康复在胸腔镜肺癌围手术期的应用效果。方法 回顾性选取九江市第一人民医院总院胸外科2020年2月至2021年2月行胸腔镜肺叶切除手术的100名肺癌患者作为研究对象,按围手术期处理方法分为对照组和观察组,手术均由同一治疗组医师完成。两组均给予胸腔镜肺癌手术常规围手术期处理,观察组在对照组基础上给予围手术期肺康复处理,观察两组术后肺部并发症发生率(包括肺部感染、脓胸)、术后住院时间,测定并记录第1秒用力呼气量(FEV₁)及最大通气量(MVV)、6 min步行试验(6MWT)的差异。结果 观察组患者的术后肺部并发症发生率为12.00%(6/50),低于对照组的64.00%(27/50),差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者的住院时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者干预后的FEV₁、MVV、6MWT均高于干预前,且干预后观察组患者的FEV₁、MVV、6MWT均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 胸腔镜肺癌围手术期肺康复的应用效果好。     

热休克蛋白与抗丝虫感染研究

热休克蛋白是原核细胞扣真核细胞在应激情况下舍成的一组结构扣功能高度保守的蛋白。有些热休克蛋白是持续舍成的，在分子折叠中起着管家基因的作用。作为显性的免疫原，热休克蛋白广泛分布于各种丝虫，在丝虫的发育过程及宿主抗感染免疫中发挥了重要的作用。热休克蛋白作为免疫反应中的靶抗原之一，有望成为抗丝虫疫苗的候选分子。     

医学形态学信息化实验教学实践与思考

医学形态学教学是医学生课程学习极其重要的组成部分。与传统教学手段相结合,应用立体式、交互式、网络化教学方法,实现教学信息化,是提高医学形态学实验教学质量的重要途径。良好的信息化教学方式有利于节约教学资源,激发学生学习积极性,提高教师的工作效率和教学质量。     

观察不同术式治疗复发性气胸的临床效果

目的探究3种不同术式治疗复发性气胸的临床效果。方法抽取患有复发性的气胸的患者155例,分为A组、B组和C组,其中,A组50例,B组53例,C组52例,A组患者进行腋下小切口手术治疗,B组患者进行电视胸腔镜的手术治疗,C组患者进行标准后外侧切口手术治疗。结果患者手术中和手术后的失血量、疼痛情况,A组与B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。C组的出血量多,手术后疼痛情况比A组和B组明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论治疗复发性气胸的患者时,应用腋下小切口手术和电视胸腔镜手术的效果相似,腋下切口术创口小。     

胸腔镜局限性肺切除术治疗老年Ⅰ期肺癌可行性分析及疗效探讨

目的 对胸腔镜局限性肺切除术治疗老年Ⅰ期肺癌的可行性及临床治疗效果进行临床探讨研究.方法 选取2006年2月至2011年2月来我院接受Ⅰ期肺癌治疗的老年患者10名,10名患者中,其中6名患者的肺功能较差,采用胸腔镜局限性肺切除术进行治疗,作为观察组,剩下的4名患者肺功能正常,采用肺叶切除加纵膈淋巴结清扫法进行治疗,作为对照组.比较两组患者的临床治疗效果,并将比较结果使用统计学软件进行统计学处理.结果 观察组患者的复发患者数及死亡患者数与对照组差异无统计学意义,P>0.05.结论 胸腔镜局限性肺切除术可有效的对肺功能较差的老年1期肺癌进行有效的治疗,具有临床推广应用价值.     

细胞毒作用前后马来丝虫微丝蚴氨基酸组成及含量的测定分析

目的通过观察马来丝虫微丝蚴(mf)经细胞毒作用后,虫体氨基酸含量的变化,进一步探讨宿主体内的杀虫机制.方法应用高速氨基酸分析仪对细胞毒作用前后的周期型马来丝虫mf进行氨基酸组成及含量的分析比较.结果马来丝虫mf含1 7种氨基酸,缺少色氨酸.经宿主细胞毒作用后的虫体氨基酸绝对含量明显低于细胞毒作用前(P＜0.05).其中,精氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸下降显著(P＜0.01).结论虫体氨基酸含量下降,尤其是碱性氨基酸与酸性氨基酸、芳香族氨基酸之间比率下降可能是宿主体内杀伤丝虫mf的机制之一.     

半乳糖凝集素-3基因在口腔鳞状细胞癌增殖、侵袭、凋亡中的作用及机制研究

目的 探讨抑制口腔鳞状细胞癌（OSCC）中半乳糖凝集素-3（Galectin-3）基因的表达对癌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响及机制。方法 逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质印迹（Western blotting）分别检测OSCC中Galectin-3 mRNA和蛋白表达;人OSCC Tca8113分为空白组、阴性对照组和Galectin-3转染组,转染48 h后,Western blotting检测各组细胞中Galectin-3、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase-3）、β-连环蛋白（β-catenin）、细胞周期素D1（Cyclin D1）蛋白表达;CCK8检测细胞增殖;Transwell小室检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡。结果 OSCC中Galectin-3 mRNA及蛋白表达均显著高于癌旁组织（P<0.01）;RNA干扰Galectin-3表达后Tca8113细胞中Galectin-3蛋白表达明显降低;Galectin-3转染组细胞存活率、细胞侵袭能力及MMP-2、MMP-9、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达均显著低于空白组,细胞凋亡率及Cleaved Caspase-3蛋白表达均显著高于空白组（P<0.01）。结论 抑制OSCC中Galectin-3基因表达可显著降低癌细胞的增殖及侵袭能力,诱导细胞凋亡,其机制与下调Wnt/β-catenin信号通路有关。