经股后肌群注射DiI逆行示踪标记神经元胞体的实验研究

目的 探讨经股后肌群注射DiI行逆行示踪以精确显示支配神经元胞体在脊髓的时空分布情况.方法 新生昆明小鼠65只,经左后肢股后肌群注射DiI,在注射2、4、6、8、12、24 h和2、4、7、14、28 d及2、3个月后观测背根神经节和腰段脊髓示踪荧光的分布和强度.结果 ①示踪细胞分布在左侧L2～S2脊髓段和相应的背根神经节,主要集中在L4～L6段;②注射DiI 6 h后,在背根神经节和脊髓前角可见发微弱红色荧光的神经元;③标记的神经元数量逐渐增多,4 d达到高峰;④6～24 h每个标记神经元荧光逐渐增强,24 h后达到高峰;⑤3个月后荧光强度无显著降低.结论 经股后肌群注射DiI作逆行示踪,可快速、准确、持久地标记背根神经节感觉神经元和脊髓运动神经元,且适当延长示踪时间可提高神经元的标记率.     

GDNF及不同生长底物对培养颈上神经节交感神经元的作用

目的 探讨胶质细胞源性神经营养因子及不同生长底物对培养颈上神经节交感神经元存活和突起生长的影响.方法 取新生大鼠颈上神经节(superior cervical ganglion, SCG)体外分离培养,培养基中含不同浓度的胶质细胞源性神经营养因子(glial cell derived neurotrophic factor, GDNF),并选取不同方法溶解多聚-D-赖氨酸(poly-D-lysine, PDL)包被培养盖片,观测交感神经元的存活和突起生长状况.结果 用0.01 mol/L硼酸溶解的PDL进行包被,细胞存活和突起生长最好,且神经元分散好,优于其他各组;GDNF对培养交感神经元的存活、突起生长具有显著的促进作用,且与其浓度存在量效关系,但它并不能阻止培养前5 d存活神经元数量的减少.结论 用0.01 mol/L硼酸溶解PDL包被是一种良好的生长底物处理方法,GDNF能促进离体培养的交感神经元的存活和突起生长.     

大鼠自体脾组织移植后神经再生中生长相关蛋白mRNA的表达

目的 研究自体脾组织移植术后不同时相再生脾组织中生长相关蛋白(GAP-43)mRNA的表达，阐明GAP-43^ 神经在自体移植脾组织中的再生规律。方法 健康Wistar大鼠108只，雌雄不限，体质量100～120g，随机分为实验组和假手术组，术后15、30、60、90、120、180d取两组脾组织，行RT-PCR及凝胶图像分析定量测定GAP-43mRNA。结果 脾绀织移植手术后30d，自体移植脾组织中出现GAP-43mRNA；手术后90d达到高峰；手术后120～180d，移植脾组织中GAP-43mRNA逐渐接近正常脾组织。结论 GAP-43 mRNA在自体移植脾组织中有表达，其表达规律与移植脾组织中神经纤维的再生规律相一致。     

手术学实验课的教学体会

手术学基础是外科教学的重要组成部分，是基础课程向临床课程过渡的桥梁，是临床外科的基础。通过对手术学实验课的学习，可培养学生严格的无菌观念和手术基本操作技术，为以后临床工作奠定坚实的基础。在不断地教学实践探索和改进后，我们紧密结合临床外科的实际需要，加强手术学实验课的教学管理和质量监督，效果满意。现报告如下。     

生长因子与动脉弹性蛋白

弹性蛋白是动脉壁的主要成分之一,它使动脉富于伸展性,能自动产生弹性张力而不消耗生化能量,对动脉血流动力学有着十分重要的作用.近年研究发现,多种生长因子影响动脉弹性蛋白的基因表达.     

大鼠大脑中动脉的形态及结构成分的增龄变化

脑血管病更是以其高发病率、高死亡率、高致残率、高复发率极大地危害人类的健康。弹性蛋白作为血管壁的一种重要的细胞外基质蛋白 ,对于维持正常的管壁构筑和舒缩功能起着十分重要的作用。本实验选用健康 Wistar大鼠 90只 ,雌雄不拘 ,分为幼年组 (1— 2月龄 )、成年组 (6— 7月龄 )、老年组 (>2 4月龄 )。采用常规染色光镜观察、透射电镜、Weigert染色、改良 Heidenhain染色、图像分析等方法对大鼠大脑中动脉 (MCA)管壁细胞形态、内弹性膜 (IEL )构筑变化、弹性纤维及胶原纤维相对含量变化进行了研究。其结果如下 :(1)常规光镜 :MCA的…     

BGC-823胃癌细胞株裸小鼠成瘤模型的建立

目的建立BGC-823胃癌细胞株的裸鼠成瘤模型,为胃癌研究提供参考载体。方法体外培养BGC-823细胞,常规传代,收集并用生理盐水冲洗细胞,并用生理盐水制成细胞密度为22×1010/mL的单细胞悬液,取0.1 mL注入裸鼠颈部与前肢交界处皮下。观察并测量裸鼠成瘤情况,切片光镜观察瘤体组织结构。结果裸鼠注射后未发生明显的炎症反应,1周时虽肉眼观察不到瘤体,但能触及实体豆状颗粒;2周时即能观察到瘤体形成,触诊能扪及实体包块;4周时瘤体明显,呈分页状,直径可达0.9cm;8周时瘤体巨大,凹凸不平,直径可达3.0 cm以上。光镜下可见瘤体组织癌细胞核大,多呈椭圆形或不规则形,排列杂乱。结论经皮下注射BGC-823细胞能有效建立裸鼠胃癌成瘤模型。     

5·12地震灾害紧急医疗救援

目的:回顾大地震突袭我市周边地区,短时间内,来自北川、安县、平武等地大量伤员,不断运抵现场,需要紧急救治。方法:本院迅速组织人员、车辆、药品、器械、通讯、物资等力量,及时到达九州体育馆,立即开展紧急救援,进行搜寻、分检、急救,识别、监测和伤情的评估。结果:24000余例伤病员经止血、清创、包扎、固定、控制感染、吸氧等处理,全部伤病员实现安全分流、转运。结论:伤病员因及时得到有效救治,平稳渡过了生理极限即致死性三联征之前的一段时间,紧急救援取得显著成效。     

人工反射弧建立后大鼠膀胱胆碱能神经的形态学变化(英文)

目的观察体神经—内脏神经人工反射弧建立后,大鼠膀胱肌间神经丛分布的改变以及神经肌肉接头处的变化。方法Sprague-Dawley大鼠随机分为三组:对照组、脊髓横断组和手术重建组。手术重建组大鼠术后饲养3个月,与脊髓横断组大鼠一起进行脊髓横断,再继续饲养3个月,对照组不做任何处理。DiI进行逆行神经追踪;免疫荧光的方法显示DiI阳性标记细胞中的胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,ChAT);改良的Karnovsky-Roots法检测膀胱铺片中神经纤维的分布。结果DiI阳性标记细胞主要分布于脊髓L3尾部至L5头侧前角,ChAT阳性细胞和DiI阳性标记细胞部分重叠。手术重建组和对照组相比,膀胱肌间神经纤维的数量较少,染色浓度也较浅(P<0.05);而手术重建组神经纤维密度较脊髓横断组增大,染色浓度增强(P<0.05),且出现明显的神经再分布。结论人工体内脏神经反射弧建立后,新的传出支为体神经,可以长入副交感神经纤维,传出神经元的递质仍为乙酰胆碱,膀胱内胆碱能神经纤维再生和乙酰胆碱活性增强且出现神经再分布,这可能在膀胱的控制性排尿中起作用。     

脊髓腹侧神经元的纯化培养与鉴定

目的探讨胚胎大鼠脊髓腹侧组织神经元的分离、纯化和培养方法,并予以分类鉴定和测定其纯度。方法取胚胎大鼠脊髓腹侧组织分离成细胞悬液,经差速贴壁后在无血清条件培养基里培养,采用免疫细胞化学双标染色法对培养盖片上的细胞予以鉴定、分类,结合Hoechst荧光染核,计数各细胞成分的含量。结果细胞贴壁生长好,神经元占87．8％,其中,运动神经元达70．9％,星形胶质细胞占7．5％,NF200和GFAP染色皆为阴性的细胞占4．7％。结论差速贴壁接种法结合无血清条件培养基培养脊髓腹侧组织能有效抑制星形胶质细胞的快速增殖,能培养出高纯度的神经元,尤其是脊髓运动神经元。