抑肽酶对肝素化全血激活的全血凝固时间和全血凝血酶原时间的影响

用体外血液凝固法观察了不同浓度的抑肽酶（ａｐｒｏｔｉｎｉｎ）对肝素化血液激活的全血凝固时间（ＡＣＴ）和全血凝血酶原时间（ＢＰＴ）的影响。结果显示：用高岭土作激活剂时抑肽酶也能延长ＡＣＴ时间，且与肝素有明显的协同作用（Ｑ＝０．７５７＜１）；但抑肽酶与肝素联用时对外源性凝血途径无影响，不影响ＢＰＴ时间。     

开设学生独立设计生理学实验课的探索

医学教育改革的核心是学生知识、能力、素质与创新精神的培养,并重的培养即核心知识和核心能力的培养[1].     

灵芝合剂对实验性血栓形成的影响

本研究旨在观察灵芝合剂是否对家兔实验性血栓形成具有抑制作用。结果显示：灵芝合剂组体外和体内（颈外静脉和颈总动脉内）形成的血栓重量和长度均较对照组明显减轻和缩短（Ｐ＜０．０１），提示灵芝合剂对家兔实验性血栓形成具有明显的抑制作用。其抗血栓形成机理可能与抗凝、抑制血小板活化和增加血管内皮细胞抗血栓能力有关。     

川芎嗪抑制肿瘤坏死因子诱导人脐静脉血管内皮细胞组织因子表达

[摘要]　目的 探讨川芎嗪（TMP）抑制肿瘤坏死因子 （TNF ）诱导人脐静脉血管内皮细胞组织因子（TF）表达的胞内信号转导机制。 方法　胰酶消化法分离培养人脐静脉血管内皮细胞,以一期凝固法、ELISA、RT-PCR分别测总的细胞促凝活性、TF抗原和 mRNA;放射免疫法测PKC（蛋白激酶C）活性;免疫组织化学染色观察NF－κB的变化。 结果 TMP和Staurosporine（Sta）可显著减少PMA与TNF 刺激的TF活性、抗原及mRNA的表达（P<0.01）; PMA、TNF 使胞浆中PKC活性明显降低(P<0.05),胞膜PKC活性显著增高(P<0.01),而TMP与Sta均能降低胞膜PKC活性(P>0.05);TNF 引起内皮细胞NF-κB从胞浆移入核内,TMP及吡咯二硫氨基甲酸酯（PDTC）均可抑制NF-κB的活化。 结论 TNF 诱导HUVEC TF的表达中,PKC及NF-κB的活化发挥着重要的作用;TMP通过影响PKC途径及NF-κB的活化而抑制TNF 诱导 TF的表达     

葛根素对AngⅡ诱导HUVECs细胞组织因子表达的影响及其机制研究

目的观察葛根素(Pue)对血管紧张素I(IAngII)诱导人脐静脉血管内皮细胞株(HUVECs)组织因子(TF)表达的影响,并探讨其作用机制。方法 HUVECs培养用DMEM完全培养基;一期凝固法测总的细胞促凝活性;TF活性的鉴定用乏Ⅶ血浆和TF单克隆抗体。采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)测定TF抗原;TFmR NA采用R T-PCR的方法检测。用免疫化学染色观察NF-κB的变化。结果①与对照组相比,不同浓度的AngI(I 10-10～10-6mol/L)促进HUVECs细胞TF活性和mR NA的表达,并具有明显的量效关系(P<0.05);单用Pue(62.5～500 mg/L)不能抑制HUVECs细胞的TF活性(P>0.05);在给予AngⅡ之前30 min用Pue(62.5～500 mg/L)预处理HUVECs细胞,Pue可呈剂量依赖式地抑制AngI(I10-7mol/L)诱导TF PCA,TF抗原和TF mR NA表达增加的作用(P<0.05),在500 mg/L时抑制作用达到最强;500 mg/L Pue抑制AngI(I10-7mol/L)对TF表达的刺激作用也呈时间依赖性,在12 h抑制作用最强。②一氧化氮合酶(NOS)的抑制剂L-NAME可明显地阻抑Pue拮抗AngII促进HUVECs TF PCA和TF mR NA的增加的作用(P<0.05)。③免疫组织化学染色显示HUVECs细胞经AngⅡ处理45 min后,细胞核内NF-κB颗粒明显增多,但经Pue处理HUVECs细胞15 min后,再加入AngII作用45 min,核内棕黄色NF-κB颗粒则明显减少。结论 Pue可抑制AngII诱导HUVECs TF的表达,NO途径参与上述抑制过程。Pue和AngII可能是通过影响NF-κB的活化发挥作用的。     

补阳还五汤对凝血酶诱导血管内皮细胞释放NO,vWF,TFPI及表达组织因子的影响

目的 :观察补阳还五汤对凝血酶诱导血管内皮细胞释放NO ,vWF ,TFPI和表达TF的影响。方法 :对传代培养的新生牛主动脉内皮细胞 (4～ 8代 )分别给予不同处理 ,取上清液测NO ,vWF ,TFPI;取细胞冻融液测定TF活性。结果 :①凝血酶促进血管内皮细胞表达TF ,较对照组明显增高 (12 .86± 2 .4 3vs 4 .6 9± 0 .83,P<0 .0 1) ,呈剂量依赖性 (r =0 .985 ,P <0 .0 1,0～ 2 0U·ml- 1 ) ,并促进vWF的释放 (18.4 3± 3.2 0vs6 .4 2± 2 .84 ,P <0 .0 1) ,补阳还五汤则抑制TF表达和vWF的释放 (P <0 .0 1) ;②补阳还五汤促进血管内皮细胞释放NO ,较对照组明显升高 (5 .93± 0 .94vs 1.6 3± 0 .2 7,P <0 .0 1) ;③凝血酶能抑制血管内皮释放TFPI (0 .6 2± 0 .38vs 2 .6 4± 0 .93,P <0 .0 1) ,补阳还五汤对凝血酶的这种抑制作用没有明显的影响。结论 :补阳还五汤能抑制凝血酶诱导血管内皮细胞表达TF和释放vWF ,促进血管内皮细胞表达NO。     

灵芝合剂对实验性血栓形成的影响

本研究旨在观察灵芝合剂是否对家兔实验性血栓形成具有抑制作用，结果显示，灵芝合剂组体外和体内形成的血栓重量长度均较对照组明显减轻和缩短，提示灵芝合剂对家兔实验性血栓形成具有明显的抑制作用。     

肉桂酸对肿瘤坏死因子诱导血管内皮细胞组织因子表达的作用及其机制

目的:观察肉桂酸(CINN)对TNF-α诱导人脐静脉血管内皮细胞株ECV304表达组织因子(TF)的影响,并探讨其作用的细胞内信号传导机制。方法:内皮细胞培养采用RPMI-1640完全培养基;一期凝固法测总的细胞促凝活性(PCA):TFmRNA采用RT-PCR的方法检测;用免疫组织化学染色法观察NF-κB的变化;Western-blod方法检测胞浆中I-κB的变化。结果:(1)与对照组相比,TNF-α(1000u／ml)引起ECV304的PCA增加(P<0.01),但可以被TF单抗阻断,其阻滞作用随TF单抗的增加而增加(P<0.05),由此证明血管内皮细胞的PCA来自于TF。在给予TNF-α之前30min用不同浓度的CINN预处理ECV304细胞,可以明显抑制TNF-α(1000u／ml)刺激内皮细胞表达TF的作用,具有显著的量效关系(r=-0.953,P<0.05)。在500μg/ml时,CINN有轻度抑制TF基础表达的效应;但以CINN预处理ECV304,可使TNF-α刺激TF的活性下降90％(P<0.001);CINN也可显著降低受刺激的ECV304TFmRNA表达。(2)Western-blot发现TNF-α作用45min胞浆中I-κB减少最明显,CINN预处理后,I-κB的减少不明显;免疫组织化学染色发现TNFα作用1h可引起内皮细胞NF-κB从胞浆移入核内,CINN可抑制NF-κB的活化。结论:CINN抑制血管内皮细胞对TNFα诱导的TF表达,它是通过影响NF-κB的活化发挥作用的。     

补阳还五汤抗家兔动脉粥样硬化形成的实验研究

在家兔动脉粥样硬化的模型上观察补阳还五汤抗动脉粥样硬化的作用。结果表明 :该汤剂具有明显的降低血清总胆固醇和甘油三酯的作用 ,显著延缓主动脉及腹主动脉粥样硬化斑块的形成、减缓冠脉血管受累的数目和程度。还具有升高 6 keto PGF1α和降低vWF的作用 ,但对血浆中ET的含量并无影响。提示补阳还五汤的抗动脉粥样硬化与抗血栓形成的作用有关。     

脑出血患者血浆组织因子和组织因子途径抑制物含量变化及其意义

探测脑出血患者血浆组织因子及组织因子途径抑制物水平变化及其意义。以酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）法测定了脑出血患者的血浆组织因子（ＴＦ）和组织因子途径抑制物（ＴＦＰＩ）。结果：脑出血急性期患者血浆ＴＦ抗原和ＴＦＰＩ抗原明显高于正常人（Ｐ＜０．０１），而ＴＦＰＩ／ＴＦ比值降低；而恢复期患者ＴＦ与ＴＦＰＩ抗原水平以及ＴＦＰＩ／ＴＦ比值与正常人差异无显著意义。提示：急性期脑出血患者有血液高凝倾向。