应用单克隆抗体对小鼠绿脓杆菌感染保护作用的研究

本文报道用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗绿脓杆菌单克隆抗体(McAb)保护小鼠抗绿脓杆菌感染,获得满意的效果。用约3个LD_(50)菌量攻击,实验组存活率为80％,而对照组全部死亡,两者有显著性差异。实验揭示抗绿脓杆菌Ⅰ群10115株杂交瘤单克隆抗体(A_4和D_4混合剂)具有明显抗小鼠该型绿脓杆菌感染的保护作用。     

蓖麻蛋白A链免疫毒素对免疫活性T细胞和造血祖细胞产生的影响

本文报道用抗人全T细胞单克隆抗体SOKT_1蓖麻蛋白A链(RTA)交联构成的免疫毒素SOKT_1-RTA对植物血凝素和同种异体抗原刺激的人外周血淋巴细胞转化的抑制率分别达到92.9%和84.7%。同种异体细胞毒性T细胞的产生也被该免疫毒素明显抑制。人骨髓单个核细胞经SOKT_1-RTA结合物处理后,红系造血细胞集落形成单位(CFU-E)增殖率为62.9%。以上结果表明,SOKT_1-RTA免疫毒素在体外能有效地灭活人T细胞,而对造血前体细胞无严重影响,有可能成为临床预防急性移植物抗宿主病的有效制剂。     

我国主要致病钩端螺旋体DNA与OmpL1基因同源性的研究

用￣（３２）Ｐ标记的ＯｍｐＬ１基因片段与我国１８株钩体进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析，此片段与非致病钩体ＰａｔｏｃＩ株、伊利尼细丝体３０５５株无杂交信号；问号钩体中，除爪哇群、塔拉索夫群、曼耗群和明尼群的４株钩体外，黄疸出血群、犬群、拜伦群、致热群、秋季群、澳洲群、波摩那群、流感伤寒群、七日热群、巴达维亚群、赛罗群各群钩体参考株ＤＮＡ均有杂交信号。     

钩端螺旋体DNA限制性内切酶分析和硷性蛋白膜展层电镜观察

作者首次用限制性内切酶分析,结合硷性蛋白膜展层电镜技术对几株不同属、群、型、株的钩端螺旋体DNA 进行了研究。结果发现:不同钩体的DNA内切酶谱在高分子区域存在区别,在电镜下呈现不同形态。作者认为,这种差别有利于钩体的分类、鉴定。     

钩体017株基因库pDJH_2与L．alstoni重组DNA探针同源性及pDJH_2在大肠杆菌中表达产物的分析

用地高辛标记含完整ＯｍｐＬ１结构基因之Ｌ．ａｌｓｔｏｎｉ２．５ｋｂＥｃｏＲ１重组ＤＮＡ探针与我们构建的赖型钩体０１７株基因库重组质粒ｐＤＪＨ＿２进行ＤＮＡ－ＤＮＡ杂交。结果显示：该重组ＤＮＡ探针与ｐＤＪＨ＿２１．９ｋｂ插入片段同源；使用ＩＰＴＧ诱导重组质粒ｐＤＪＨ＿２后，其在大肠杆菌中表达了６８ｋｄ产物。经蛋白酶Ｋ消化、免疫印迹及斑点一酶联免疫吸附试验，提示此６８ｋｂ产物是蛋内质抗原；用该６８ｋｂ蛋白质抗原主动免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，可抵抗强毒力赖型钩体０１７株的攻击，表现出对小鼠的免疫保护性，从而为赖型钩体０１７株基因工程疫苗的研制奠定了一定基础。此赖型０１７株钩体重组ＤＮＡ经ＩＰＴＧ诱导后能在大肠杆茵中表达，以及其表达产物的保护性动物试验结果，在所查国内外文献中尚属首次报道。     

光敏生物素和~(32)P标记DNA打点杂交检测钩端螺旋体

应用光敏生物素和~(32)P标记黄疸出血群赖型017株钩端螺旋体DNA(简称017DNA)作为探针,打点杂交检测问号状钩体。结果表明:两种探针均能检测不同群、型的问号状钩体DNA,最小检测量分别为5pg和1pg;与双曲钩体patoc型PatocⅠ株、细螺旋体属illini型3055株及其他致病菌和正常人血清未发现明显杂交信号。提示光敏生物素制备的017DNA探针可以用于检测钩体,也可应用于钩体病的早期诊断和流行病学调查。     

庆大霉素治疗钩端螺旋体病探讨

作者以Cox固体培养基培养黄疸出血群赖型017株钩体,并以杯碟法观察抑菌环,揭示庆大霉素有抑制钩体生长的作用。临床随机分组观察结果表明:庆大霉素治疗早期钩体病有效,仅个别病例发生赫氏反应。     

我国新疆皮肤利什曼病病原体SSU rDNA多变区序列分析

我国新疆皮肤利什曼病病原体（ＣＬＰ）种株鉴定尚有分歧。本研究用一对利什曼原虫属特异引物Ｒ２２２和Ｒ３３３，直接从皮肤利什曼病病人皮肤病变组织、热带利什曼原虫（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａｔｒｏｐｉｃａ）和婴儿利什曼原虫（Ｌ．ｉｎｆａｎｔｕｍ）基因组ＤＮＡ中扩增出一ＳＳＵｒＤＮＡ特异片段，克隆到ｐＧＥＭ○Ｒ－ＴＥａｓｙＶｅｃｔｏｒ上，并以双脱氧链末端终止法测序。序列分析显示扩增的ＣＬＰ、Ｌ．ｉｎｆａｎｔｕｍ和Ｌ．ｔｒｏｐｉｃａＳＳＵｒＤＮＡ序列皆为３９１ｂｐ长，Ｌ．ｔｒｏｐｉｃａ与ＣＬＰ的序列之间３８７个碱基相同，存在４个点突变；Ｌ．ｉｎｆａｎｔｕｍ与ＣＬＰ的序列之间３８３个碱基相同，存在７个点突变和２个移码突变；Ｌ．ｔｒｏｐｉｃａ与Ｌ．ｉｎｆａｎｔｕｍ的序列之间３８７个碱基相同，存在３个点突变和２个移码突变。表明扩增的ＣＬＰ、Ｌ．ｉｎｆａｎｔｕｍ和Ｌ．ｔｒｏｐｉｃａＳＳＵｒＤ－ＮＡ多变区序列高度同源，但仍存在少数点突变，或插入／缺失；该ＳＳＵｒＤＮＡ序列变异可反应种间差异；新疆皮肤利什曼病病原体与Ｌ．ｔｒｏｐｉｃａ较相近。     

抗绿脓杆菌Ⅱ群10117株及Ⅳ群10119株McAb杂交瘤细胞株的筛选和鉴定

用SP2/0骨髓瘤细胞分别与绿脓杆菌Ⅱ群10117株和Ⅳ群10119株免疫BALB/c小鼠脾细胞融合,各获得三株连续分泌抗绿脓杆菌单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株10117A_1、B_3、D_5及10119A_6、B_4、C_3。经染色体、IFA、ELISA 鉴定分析,证明是能分泌高效价McAb的杂交瘤细胞株。McAb类和亚类鉴定分别为IgG_? IgG_2b和IgM。交叉反应初步表明上述McAb具有较高的型特异性。     

赖型钩体pDC38核酸序列测定及其与流感伤寒型钩体外膜蛋白基因ompL1核酸序列的类似性匹配

为了探讨赖型钩体 ｐ Ｄ Ｃ３８ 插入片段基因组 Ｄ Ｎ Ａ 编码、位置与ｏｍ ｐ Ｌ１ 基因的关系,作者采用在流感伤寒型钩体外膜蛋白基因ｏｍ ｐ Ｌ１ 首尾区段设计一对引物,以 ｐ Ｄ Ｃ３８ 插入片段作模板进行 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增、测定和类似性匹配（ａｌｉｇｎｍ ｅｎｔ）。结果发现：ｐ Ｄ Ｃ３８ 含有 ２．７ｋｂ 和３．０ｋｂ 两个插入片段,３．０ｋｂ 片段含有 １ 个ｏｍ ｐ Ｌ１ 基因全拷贝。结论：类似性匹配表明,ｐ Ｄ Ｃ３８ 和ｏｍ ｐ Ｌ１ 相同碱基８６４ 个（９０％ ）,碱基变异（不配对）９６（１０％ ）个, ｐ Ｄ Ｃ３８ 可用于钩体诊断、分类、鉴定、疫苗和发病机理的研究。