Sequence analysis of small subunit ribosomal DNA of cutaneous leishmaniasis pathogen from Xinjiang,China

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｃｈｏｏｓｅｔｈｅｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｖａｒｉａｂｌｅｒｅｇｉｏｎｏｆｔｈｅｓｍａｌｓｕｂｕｎｉｔｒｉｂｏｓｏｍａｌＤＮＡ（ＳＳＵｒＤＮＡ）ａｓｔａｒｇｅｔｇｅｎｅｔｏｃｏｍｐａｒｅｗｉｔｈｔｈｅｓｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆｃｕｔａｎ...     

地塞米松对钩端螺旋体病肺弥漫性出血和线粒体能量代谢作用的实验研究——豚鼠肺、肝、肾组织的光镜、电镜观察以及肝细胞乳酸和肝线粒体ATPase活性测定

本实验在钩体病PDH实验模型的基础上,用40只健康豚鼠随机分成4组,每组10只。(1)静脉内注射强毒力浓缩钩体菌液感染组;(2)菌液和地塞米松混合组;(3)地塞米松组;(4)正常对照组。动物一律在注射后48小时处死。注射前后对照组观察动物表现、体温变化,死后均作肉眼、光镜和电镜观察。活体取肝组织,匀浆、差逮离心、超声、     

重组钩体基因疫苗候选抗原交叉免疫研究

重组钩体基因多肽疫苗候选抗原ｐ6 8(分子量 6 8× 10 3 )是作者构建的问号钩体赖型 0 17株基因库筛选的重组质粒表达抗原。该疫苗候选抗原具良好免疫原性 ,能激起体内强有力Ｔ Ｂ细胞协同效应的特异性体液免疫反应和动物保护性 (ＢＡＬＢ ｃ小鼠、豚鼠 )。然而 ,好的交叉保护是作为衡量疫苗候选抗原的金标准。因此 ,作者将该ｐ6 8钩体重组基因保护性抗原按常规制备兔抗血清 ,分别与我国分布的主要致病钩体群、型强毒力组 :(1)菌号 0 17,黄疸出血群 ,赖型 ;(2 )菌号 5 6 6 0 7,澳洲群 ,澳洲型 ;(3)菌号 5 6 6 0 6 ,秋季热型 ;(4 )菌号 5 6 6…     

强力霉素治疗钩端螺旋体病研究

强力霉素(DOX)治疗早期钩端螺旋体(钩体)病的研究,国内尚未见报告。随机采用DOX治疗钩体病19例,并以青霉素G(PNC-G)治疗15例作对照。两组病例都治愈,其主要征候持续时间无显著差异。但PNC-G组发生赫氏反应(JHR)11例(73.3％),其中1例(9.1％)演变成肺弥漫性出血,而DOX组无JHR发生。DOX和PNC-G对新分离出的8株钩体的体外抗菌活性良好。检测3例DOX组病人的血药浓度,服药期中都显著高于最低抑菌浓度。     

赖型钩端螺旋体内鞭毛蛋白基因的体外扩增、分子克隆、核苷酸序列分析及其编码33kDa内鞭毛蛋白对BALB/c小鼠的兔疫/保护作用

戴保民教授于1986年任博士导师,1981～1987年任卫生部医学科学委员,1986～1993年任国际细菌学会钩端螺旋体命名委员会协作委员,1992～1997年任卫生部自然疫源性疾病专家咨询委员,1990年获卫生部科技进步一等奖,1992年获国家科技进步三等奖。     

问号赖型钩端螺旋体重组质粒pDL121的初步研究

目的　探讨问号赖型钩端螺旋体抗原基因的特点。方法　应用６ 种常见内切酶（ＢａｍＨＩ,Ｂｇｌ Ⅱ,ＥｃｏＲⅠ,Ｈｉｎｄ Ⅲ,ＰｓｔⅠ,Ｐｖｕ Ⅱ）对从问号赖型钩端螺旋体０１７ 株的基因文库中筛选出来的重组质粒ｐＤＬ１２１ 外源基因进行酶谱分析,同时用Ｄｉｇｏｘｉｎ 标记的ｐＤＬ１２１ 外源基因片段作探针对不同种属的致病性钩端螺旋体和非致病性钩端螺旋体基因进行杂交分析。结果　显示问号赖型钩端螺旋体重组质粒ｐＤＬ１２１ 外源基因没有６ 种内切酶的酶切位点,重组探针与致病性钩体（ｓｅｒｏｖａｒｌａｉｓｔｒａｉｎ０１７,ｓｅｒｏｖａｒ ｈｅｂｄｏｍａｄｉｓｓｔｒａｉｎ ５６６１０ ,ｓｅｒｏｖａｒ ｐｏｍｏｎａｓｔｒａｉｎ ５６６０８）有杂交信号,与非致病性钩体（ｓｅｒｏｖａｒ ｐａｔｏｃ ｓｔｒａｉｎ Ｐａｔｏｃ Ⅰ,ｓｅｒｏｖａｒｉｌｌｉｎｉｓｔｒａｉｎ ３０５５）无杂交信号,亦不识别大肠杆菌。结论　重组质粒ｐＤＬ１２１ 外源基因可能是问号赖型钩端螺旋体的一个新基因,进一步测序分析将揭示该基因本质,同时因该重组探针能鉴别致病性钩体和非致病性钩体,提示其可用于钩端螺旋体病的早期诊断及钩端螺旋体的鉴定和分类。     

问号赖型钩端螺旋体23kDa蛋白的免疫原性研究

目的 探讨ｐＤＬ１２１的１．０ｋｂ０１７株问号赖型钩端螺旋体ＤＮＡ片段可否作为钩体重组疫苗广谱保护性抗原的侯选。方法 采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ制备２３ｋＤａ蛋白,免疫日本大耳兔制备抗２３ｋＤａ抗血清,Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ鉴定其免疫原性。结果 ２３ｋＤａ重组抗原兔抗血清可识别ｐＤＬ１２１体外表达２３ｋＤａ抗原产物和问号赖型钩端螺旋体０１７株超声抗原成份;用Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔ鉴定抗血清效价,其抗体     

致病性与非致病性钩端螺旋体蛋白电泳及单克隆抗体识别抗原的比较

作者用SDS—PAGE和Western blot分析了三株钩端螺旋体的全细胞蛋白电泳图谱及McAb识别的抗原分子。三株钩体在10％SDS—PAGE中均被分出40多条清晰的区带,其中致病性的问号钩端螺旋体赖型017株,秋季型606株蛋白电泳图谱的平均相似性为90％,与非     

应用重组DNA探针检测不同毒力钩端螺旋体

应用质粒载体ｐＵＣ１８构建赖型钩端螺旋体０１７株的基因库。筛选出重组质粒ｐＤＪ６和ｐＤＪ８，插入片段分别是１．９ｋｂ和２．２ｋｂ。地高辛随机引物标记１．９ｋｂ片段制备探针，对５个血清型６株钩体ＤＮＡ进行杂交。结果显示，重组探针与致病钩体ＤＮＡ出现明显杂交信号，与非致病钩体，人白细胞ＤＮＡ及大肠杆菌ＪＭ１０３株ＤＮＡ杂交信号不明显。此特异性重组探针可作为鉴定、识别致病性钩体和进行钩体属、种分类的一种手段。     

钩端螺旋体重组DNA探针对致病性黄疸出血群钩体DNA的杂交识别

作者从建立的黄疸出血群钩端螺旋体(下称钩体)DNA基因库中筛选出重组DNA克隆PLIps01(15kb)和PLIEc34(4kb)制备成~(32)P放射性探针。以该二探针对致病性黄疸出血群所属血清型的13个菌株钩体DNA进行Southern印迹分析,结果表明,该二DNA探什对黄疸出血群各株钩体DNA具有强烈的特异性结合,能识别出简洁的DNA带型,并能区分不同血清型以至菌株的DNA带型差别。作者认为,钩体DNA重组探什结合Southern印迹分析是一种灵敏而特异的检测分析方法,可作为诊断、鉴定和分析钩体的工具。