中枢精氨酸加压素在大鼠CRH性发热机制中的作用

中枢精氨酸加压素在大鼠CRH性发热机制中的作用     

黄芪预处理对离体心脏再灌注损伤的保护作用

目的：比较黄芪和非创伤性肢体缺血两种预处理方法对大鼠离体心肌再灌注损伤的保护作用。方法：采用雄性大鼠,在Langendorff装置上对离体心脏进行灌流。预灌15min后,缺血15min,随后15min再灌注。观察先用含黄芪注射液（10mg/L)预灌在相应点分别测定冠脉流出液和心肌匀浆中SOD的活性和MDA含量,同时记录心肌细胞的单相动作电位（MAP）和心肌收缩张力曲线。结果：黄芪预处理和非创伤性肢体缺血预处理能显降低再灌注心律失常发生率,显降低心肌组织中MDA含量,提高SOD活性,稳定心肌细胞的膜电位和肌张力。结论：黄芪预处理对大鼠离体心肌再灌注损伤有明显的保护作用,可能是通过增强心肌的抗氧化能力、稳定心肌的膜相结构等途径而实现的。     

银杏达莫注射液对高钾血症大鼠离体血管张力的影响

目的: 观察银杏达莫注射液(GD)对高钾血症大鼠离体胸主动脉的影响,并探讨其可能作用机制。方法: 复制高钾血症大鼠模型,制备离体胸主动脉环,经生物信号与采集分析系统测定主动脉环的张力变化。观察不同浓度GD(4、8、16 mg/L)预孵育的高钾血症大鼠胸主动脉血管环对去氧肾上腺素(PE)和KCl收缩张力的影响。结果: 与正常大鼠相比,高钾血症大鼠胸主动脉环对PE和KCl收缩张力明显升高(P<0.05)。不同浓度GD对基础张力无明显影响(P>0.05)。在内皮完整主动脉环上,GD预孵育后对KCl收缩张力无明显影响(P>0.05);而16 mg/L GD预孵育后对PE收缩张力有明显抑制作用(P<0.05),此作用可被一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)或鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝(MB)所抑制。在去内皮的主动脉环上,不同浓度GD预孵育后对PE收缩张力无显著作用(P>0.05)。结论: GD对高钾血症大鼠胸主动脉环具有内皮依赖性舒张作用,其机制可能与激活血管内皮细胞一氧化氮-鸟苷酸环化酶途径有关。     

参麻益智汤对拟阿尔海默病模型小鼠的治疗作用及其机制研究

目的: 研究参麻益智汤(SYD)对拟阿尔茨海默病(AD)模型小鼠的治疗作用及其机制。方法: 选用昆明种小鼠,腹腔注射D-半乳糖和灌胃三氯化铝(AlCl₃)90 d制备AD小鼠模型,3个治疗组在造模的后40 d分别灌胃低、中、高剂量SYD。从第86 d起灌胃结束后进行Morris水迷宫测试,连续5 d。水迷宫测试结束后检测小鼠海马组织超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量,用荧光实时定量PCR的方法观察小鼠海马bax mRNA和bcl-2 mRNA的表达,用免疫组化方法观察小鼠海马caspase-3蛋白的表达。结果: 与AD模型组比较,SYD中剂量组小鼠水迷宫学习成绩较好(P<0.05);SYD中、高剂量组小鼠海马组织内SOD活性增高,MDA含量降低(P<0.05);中剂量的SYD能下调小鼠海马bax mRNA的表达和caspase-3蛋白的表达(P<0.01),各剂量的SYD对bcl-2 mRNA的表达均未见明显影响(P>0.05)。结论: SYD可以改善拟AD小鼠学习记忆能力,其机制可能与SYD提高小鼠海马神经元的抗氧化能力(SOD活性升高, MDA含量降低)、下调bax mRNA和caspase-3蛋白的表达、进而减少小鼠海马神经元的凋亡有关。     

远志皂苷元对氧化应激损伤的视网膜神经节细胞的保护作用

目的: 观察远志皂苷元(senegenin,Sen)对氧化应激损伤的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)的影响并初步探讨其作用机制。方法: 采用上丘荧光金逆行标记RGCs后,体外原代RGCs混合细胞培养,随机分为control组、H₂O₂组、Sen+H₂O₂和Sen组。检测带荧光金荧光细胞的活力。同上述分组处理视网膜,用Hoechst 33258 染色后观察视网膜细胞核形态的变化,Western blotting检测视网膜细胞cleaved caspase-3、细胞色素C及Bcl-2蛋白的表达。结果: 与control组比较,Sen浓度在10、20和40 μmol/L时, RGCs活力无明显变化(P>0.05),但Sen浓度达到80和160 μmol/L时,RGCs活力明显下降,差异显著(P<0.01)。25、50、100和200 μmol/L H₂O₂明显降低RGCs活力(P<0.05)。Sen浓度在10、20和40 μmol/L时,对50 μmol/L H₂O₂损伤的RGCs有较好的保护作用(P<0.05),其中40 μmol/L Sen保护作用最为明显。Hoechst 33258染色表明Sen可以减少H₂O₂引起的视网膜细胞凋亡。Western blotting结果表明Sen促进Bcl-2蛋白的表达,降低线粒体细胞色素C的释放,下调cleaved caspase-3的表达。 结论: Sen保护RGCs对抗氧化应激引起的损伤,其机制可能与其增强Bcl-2蛋白表达和减少氧化应激引起的细胞凋亡有关。     

The cAMP-mediated protein kinase signal transduction pathway is involved in the pyrogenic effect of CRH in rats

Objective To determine whether the cyclic adenosine monophosphate (cAMP) mediated protei n kinase signal transduction pathway is involved in the pyrogenic action of cort icotropin releasing hormone (CRH) in rats.Methods Corticotropin releasing hormone, 2’,3’-dideoxy-adenosine (DDA) and adenosi ne-3’,5’-(cyclic) monophosphorothionate, Rp-Isomer (Rp-cAMPS), were administ ered intracerebroventricularly (i.c.v.). The colonic temperature was measure d using a thermistor, and the content of cAMP in the hypothalamus was determined by radioimmunoassay. Hypothalamic incubation was used to assess the effects of CRH on the content of cAMP in the hypothalamus in vitro. Results Microinjection (i.c.v.) of CRH (2.5 μg, 5.0 μg and 10 μg) caused incr eases in colonic temperature and the hypothalamus cAMP level in conscious rats. CRH increased hypothalamus cAMP level in vitro. The pyrogenic effects of CRH w ere abolished or markedly inhibited by prior injection (i.c.v.) of an adenyla te cyclase inhibitor, DDA (30 μg), or an inhibitor of cAMP-dependent protein kinase, Rp-cAMPS (15 μg). Conclusion cAMP mediates the pyrogenic action of centrally administered of CRH in rats, and protein kinase A may play an important role in the central CRH-induced fever. The cAMP-dependent protein kinase signal transduction pathway may be involved in the central mechanisms of the pyrogenic action of CRH in rats.     

不同进食量对小鼠功能活动和生化指标的影响

目的:探讨不同进食量在不同时间内对小鼠体重、记忆力、平衡耐力和相应生化指标的影响。方法:预先计算小鼠每天平均进食量,按照100%食量,75％食量、50％食量、25％食量及0％食量分为A、B、C、D、E组。实验过程中每3d测试记忆力、平衡耐力和体重1次,第10d取血检测相应生化指标。结果:实验第3d,E组体重、平衡耐力下降;实验第6d和第9d,A组、B组、C组体重明显上升,A组、D组动物的记忆力低于B组和C组;实验第10d,D组血糖显著下降,总胆固醇及甘油三酯随进食量的减少而显著下降。结论:适度减少进食量能维持正常体力和血糖水平,保持良好的记忆力,并有助于降低血中总胆固醇和甘油三酯。     

小檗碱抗小鼠脂多糖性肺损伤的作用机制

目的：探讨小檗碱(Ber)对抗脂多糖(LPS)性急性肺损伤(ALI)的作用机制。方法：雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、ALI组和Ber防治组，分别予以双蒸水、Ber(50 mg/kg)灌胃，1次/d，连续3 d，于实验第3 d灌胃后1 h，腹腔注射生理盐水或LPS (20 mg/kg)。测定各组12 h肺湿/干重比值(W/D)，肺泡灌洗液(BALF)中微量总蛋白含量、白细胞(WBC)和中性粒细胞(PMN)总数；观察肺组织病理改变及磷酸化胞浆型磷脂酶A₂(cPLA₂)在肺组织中的表达。进一步用酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF中血栓素B₂(TXB₂)的含量，并测定肺组织丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果：ALI组，LPS 攻击后12 h肺W/D、BALF中蛋白含量、WBC 及PMN总数显著高于对照组(P<0.05)；病理检查发现肺间质充血、水肿，大量炎性细胞浸润。免疫组织化学观察显示肺组织中磷酸化cPLA₂的表达明显增加；同时，BALF中TXB₂含量、肺组织MDA的含量显著高于对照组(P<0.05)。Ber防治组，肺W/D、BALF中蛋白含量、WBC及PMN总数均明显低于ALI组；与ALI组比较，Ber防治组肺组织病理损伤明显减轻(P<0.05)；而且，肺组织中磷酸化cPLA₂的表达明显减少 (P<0.05)； BALF中TXB₂含量和肺组织MDA的含量显著低于ALI组。结论：抑制肺组织cPLA₂的磷酸化并对抗脂质过氧化损伤可能是Ber防治小鼠脂多糖性肺损伤的重要机制。     

甘氨酸抗心肌损伤作用及机制研究

目的 :研究甘氨酸抗心肌损伤的作用及机制。方法 :(1)取体重为 (2 5 0± 30 )g的雄性健康SD大鼠 2 2只 ,随机分成 3组 :正常对照组 (n =7) ,内毒素组 (n =7) ,甘氨酸 +内毒素组 (n =8) ,在Langendorff装置上用Krebs -Henseleit(KH)液对大鼠离体心脏行主动脉逆灌。连续记录心肌细胞单相动作电位 (MAP)、心肌收缩张力曲线 ;(2 )取健康成年雄性SD大鼠心脏做冰冻切片 ,分为 4组 :脊髓阴性对照组 (不含任何抗体的PBS)、脊髓阳性对照组 (一抗为抗甘氨酸受体组 )、心肌细胞阴性对照组、心肌细胞抗甘氨酸受体组。冰冻切片进行免疫组化荧光染色…