甘氨酸受体在大鼠心肌细胞的表达

目的：检测成年大鼠心肌组织和新生大鼠心 肌细胞是否有甘氨酸受体（GlyR）mRNA和蛋白的表达。方法：选用成年 雄性SD大鼠心肌组织和新生SD大鼠培养心肌细胞，提取总RNA和膜蛋白，用逆转录－巢式聚 合酶链反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹（Western blotting）检测GlyRα1和β亚基的mRNA 和蛋白表达。结果：成年大鼠心肌组织和新生大鼠培养心肌细胞均有与 脊髓组织GlyRβ亚基极为相似的mRNA和蛋白的表达；对于GlyRα1亚基，仅在新生SD大鼠培 养心肌细胞发现有mRNA的表达。结论：本研究证实在成年大鼠心肌组织 和新生大鼠心肌细胞中有与脊髓组织相似的GlyR亚基的表达，提示大鼠心肌细胞的膜上有Gl yR的存在。     

四毒清对脂多糖攻击小鼠多器官功能障碍和生存率的影响

目的:观察中药复方四毒清对脂多糖(LPS)攻击小鼠生存率和器官功能的影响,寻找有效中药防治LPS性多器官功能衰竭。方法:将中药四毒清按常规方法煎制成1kg/L药液,以小鼠为实验对象,灌胃给药,3d后腹腔注射LPS(60mg/kg),观察小鼠生存率。另分批进行同样实验,观察小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)活性、血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)含量及肺、肝、肾、肠的病理变化。结果:LPS注射后96h,LPS组小鼠的死亡率为73%(n=34),而四毒清防治组小鼠的死亡率为35%(n=31),两组死亡率有明显差别(P<0.05)。同时,LPS组小鼠的血清ALT活性、Cr和BUN含量明显高于对照组,而四毒清防治组小鼠血清ALT活性、Cr和BUN含量明显低于LPS组。病理学检查发现四毒清防治组小鼠肺、肾及小肠病变明显轻于LPS组。结论:中药四毒清能防治LPS性多器官功能障碍,提高LPS攻击小鼠的生存率。     

甘氨酸/多粘菌素B合剂对内毒素诱导

目的:探讨甘氨酸和多粘菌素B在体内对内毒素诱导的家兔急性期反应的影响。方法:复制内毒素诱导急性期反应模型,其中实验组预先给予半剂量的甘氨酸/多粘菌素B合剂,当家兔的体温上升至高峰后1h采血,进行白细胞计数、血清C-反应蛋白、微量元素(Cu²⁺、Fe²⁺、Zn²⁺)的测定。结果:预先给予半剂量的甘氨酸/多粘菌素B合剂可以显著抑制内毒素诱导急性期反应,包括对家兔体温、C-反应蛋白以及微量元素(Cu²⁺、Fｅ²⁺、Zｎ²⁺)的变化的抑制等(P＜0.05),并且其效果与预先给予全剂量多粘菌素B无显著性差异(P＞0.05)。结论:在内毒素性疾病治疗中,选择分别作用于内毒素不同结构部位的两种拮抗剂组成合剂,可以利用某些拮抗剂的不同特点相互取长补短,从多个环节上拮抗内毒素的生物学作用,降低单一药物的剂量,减轻毒副反应。     

甘氨酸与多粘菌素B在拮抗内毒素的协同效应研究

在本室发现甘氨酸具有拮抗内毒素（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ,ＬＰＳ）作用的基础上,本研究从以下三个方面观察甘氨酸和多粘菌素Ｂ联合应用对内毒素的拮抗作用：第一部分观察甘氨酸、多粘菌素Ｂ联合用药在体外与内毒素作用后,静脉注入体内引起的致热性变化,观察指标包括平均体温反应曲线、最大体温反应幅度、体温反应指数;第二部分观察甘氨酸和多粘菌素Ｂ联合拮抗内毒素最佳组合比例;第三部分观察甘氨酸、多粘菌素Ｂ联合用药对小鼠的毒性。结果如下：１－多粘菌素Ｂ、甘氨酸在拮抗内毒素时有明显协同作用（Ｐ＜０－０５）…     

不同复方中药对内毒素血症小鼠生存率和器官功能障碍的影响

目的 :寻找有效的中药复方防治内毒素性多器官功能衰竭。方法 :将不同复方中药按常规方法煎制成 1kg/L药液 ,以小鼠为实验对象 ,灌胃给药 ,3d后腹腔注射内毒素 ,观察小鼠生存率和心、肺、肝、肾、肠的病理变化 ,测定血清肌酐、尿素氮、乳酸含量和ALT活性。结果 :与正常对照组比较 ,腹腔注射内毒素组小鼠 72h生存率 (43 5 % ,n =30 )明显降低 ;血清肌酐、尿素氮含量和ALT活性明显升高 ;光镜观察发现肺、肝、肾、肠出现明显的病理改变。人参四逆汤、黄连解毒汤、参附青均不能提高内毒素血症小鼠生存率 ,而参附青加丹参反而降低内毒素血症小…     

中药四毒清抑制LPS性肾脏损伤的机制研究

目的：研究中药复方四毒清防治内毒素性肾功能衰竭的作用机制。 方法： 将小鼠随机分成对照组、LPS组、四毒清防治组和四毒清组，用水（0.2 mL/10 g BW）或四毒清（1 000 g/L, 0.2 mL/10 g BW）灌胃3 d，每天2次, 第3 d灌胃后2 h，腹腔注射LPS(30 mg/kg，0.2 mL/10 g BW)或生理盐水（0.2 mL/10 g BW），腹腔注射后2 h，再用水或四毒清（0.2 mL/10 g）灌胃1次。测定各组小鼠血清肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）的含量，观察肾脏超微结构，肾组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化， 并用半定量RT-PCR方法测定肾组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1) mRNA的表达。 结果： LPS引起小鼠血清Cr和BUN含量明显升高，肾脏近曲小管出现明显病理改变。四毒清有效降低LPS攻击小鼠血清Cr和BUN的含量，明显减轻近曲小管的损伤。LPS组小鼠肾组织MDA含量和ICAM-1 mRNA的表达显著高于对照组，而四毒清防治组肾组织MDA含量和ICAM-1 mRNA的表达明显低于LPS组，四毒清处理能显著升高肾组织SOD的活性。 结论： 中药四毒清防治内毒素性肾功能衰竭的作用机制与其升高肾组织SOD的活性、减轻肾组织氧化损伤并抑制肾脏ICAM-1 mRNA的表达有关。     

芍药苷减轻小鼠LPS性急性肺损伤的作用机制研究

目的: 观察芍药苷(Pae)对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的影响及其作用机制。方法: 雄性 BALB/c小鼠随机分为对照组、脂多糖组(LPS)、芍药苷防治组(Pae+LPS)和芍药苷对照组(Pae),予以双蒸水或Pae(20 mg/kg)灌胃,1次/d,连续3 d,于实验第3 d灌胃后1 h,腹腔注射生理盐水或LPS (20 mg/kg)。观察各组小鼠肺组织形态学改变并进行肺损伤评分;用Western blotting检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)、胞浆型磷脂酶A₂(cPLA₂)及磷酸化cPLA₂的含量。结果: 小鼠腹腔注射LPS后12 h,肺组织损伤明显,肺泡间隔增厚,大量炎症细胞浸润,可见明显肺出血及肺水肿;肺组织MPO含量、磷酸化cPLA₂水平显著升高。芍药苷防治组与LPS组相比,肺组织损伤明显减轻,炎症细胞浸润减少,肺出血、肺水肿显著减轻;肺MPO含量、磷酸化cPLA₂水平明显降低。芍药苷对照组与正常对照组相比,小鼠肺组织结构,MPO含量及磷酸化cPLA₂水平未见明显差别。结论: 芍药苷通过抑制肺组织中性粒细胞浸润、降低MPO含量和cPLA₂活性,减轻小鼠内毒素性肺损伤。     

新生期孤养对成年大鼠行为与5-羟色胺转运体表达的影响

目的:探讨新生期孤养(neonatal isolation,NI)对成年大鼠行为与5-羟色胺转运体(5-HTT)表达的影响。方法:新生的SD大鼠随机分为正常对照(non-handled,NH)组与新生期孤养组,新生期孤养组在出生后2-14d每天孤养4h,断乳后常规饲养。12w龄时,进行旷场、高架十字迷宫和强迫游泳试验,酶联免疫法检测血浆促肾上腺皮质激素与皮质酮、海马与下丘脑5-HT的含量,原位杂交法观察中缝核5-HTTmRNA的表达。结果:高架十字迷宫试验中新生期孤养组大鼠出入开放臂的总次数与进入开放臂的比率显著减少;强迫游泳试验中新生期孤养组大鼠悬浮时间显著增多(P0.05)。新生期孤养组大鼠血浆促肾上腺皮质激素与皮质酮显著升高,海马中5-HT含量显著减少,中缝核5-HTTmRNA表达显著增强(P0.05或P0.01)。结论:新生期孤养可导致大鼠在成年时出现抑郁和焦虑样行为,可能与下丘脑-垂体-肾上腺轴功能亢进、中枢5-HT功能低下有关。     

七氟醚预处理对LPS诱导的小鼠心功能障碍的影响

目的:观察七氟醚(Sevo)预处理对脂多糖(LPS)诱导的心功能障碍的影响并初步探讨其作用机制。方法:40只雄性BALB/c小鼠随机分为4组:对照组(control)、LPS组、Sevo组和Sevo+LPS组。分别用2%Sevo(以纯氧为载气)或纯氧预处理30min,洗脱10min后,腹腔注射LPS18mg/kg或等量生理盐水。于腹腔注射后12h,通过高分辨小动物超声系统检测心功能,结束后立即采血并处死小鼠,用生化分析仪检测血清乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性;留取小鼠心脏标本,制备石蜡切片,进行HE染色后在光学显微镜上观察各组小鼠心脏的组织结构变化,分别用硝酸还原酶法和比色法检测小鼠心肌组织中一氧化氮(NO)的含量和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性。结果:LPS腹腔注射后12h,超声检测显示LPS组小鼠左心室舒张末期容积(LVEDV)增大(P＜0.05),每搏输出量(SV)、心输出量(CO)和射血分数(EF)降低(P＜0.05);血清LDH和CK-MB水平升高(P＜0.05);病理切片见心肌明显病变。Sevo+LPS组与LPS组比较,LVEDV减小(P＜0.05),SV、CO和EF增加(P＜0.05),LDH和CK-MB水平显著降低(P＜0.05),心肌组织的病理损伤减轻。LPS引起心肌组织中NO含量和iNOS活性升高(P＜0.05),Sevo对此有抑制作用(P＜0.05)。结论:Sevo预处理减轻LPS引起的心肌损伤和心功能障碍,其机制可能与其抑制心肌iNOS活性,减少NO的生成有关。     

甘氨酰谷氨酰胺在大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤中的保护作用研究

目的： 研究甘氨酰谷氨酰胺对缺血再灌注大鼠离体心脏的保护作用。方法：应用Langendorff离体心脏灌注系统建立心肌缺血再灌注模型。30只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(control)、甘氨酰谷氨酰胺对照组(Gly-Gln)、缺血再灌注组(I/R)、缺血/再灌注+甘氨酰谷氨酰胺组(I/R+ Gly-Gln)。I/R组及I/R+ Gly-Gln组分别灌注30 min后,全心停灌20 min,再灌注40 min,I/R+ Gly-Gln组于再灌注时在灌流液中加入Gly-Gln;正常对照组连续灌流90 min,Gly-Gln对照组灌流液中加入Gly-Gln。记录各组灌注时,左室舒张末压(LVEDP)、左室发展压(LVDP)、左室压力最大变化速率(±dp/dtmax)、心率(HR)及心肌细胞单相动作电位(MAP);同时在相应的时点分别测定冠脉流出液中的乳酸脱氢酶（LDH)、肌酸激酶(CK)活性。结果：离体大鼠心脏缺血20min,再灌注40 min,导致严重的心功能抑制,表现为LVEDP升高,LVDP、±dp/dtmax降低;再灌注液中加入Gly-Gln后,LVEDP降低,LVDP、±dp/dtmax明显升高（P<0.01)。I/R+ Gly-Gln组冠脉流出液中LDH、CK活性明显低于I/R组(均P<0.01)。结论： Gly-Gln能有效减轻缺血再灌注引起的左室功能下降,减少心肌细胞LDH、CK的释出,表明Gly-Gln对缺血再灌注损伤的大鼠离体心脏具有保护作用。