后腹腔镜在肾脏恶性肿瘤治疗中的应用

目的探讨后腹腔镜在肾癌、肾盂癌治疗中的手术方法及疗效。方法回顾性分析2004年1月至2009年4月间我院应用后腹腔镜技术行肾癌根治术和肾盂癌根治术的患者共254例,进行手术时间、出血量、中转开放情况、术中及术后并发症、住院时间、下床活动时间、术后肿瘤复发及转移例数等数据的统计,对术中操作步骤及手术经验进行总结。结果平均手术时间为（146±64）min,平均出血量为（230±120）ml,中转开放患者为29例（11.4%）,术中出现并发症的患者24例（9.4%）,术后出现并发症的患者14例（5.5%）,平均住院时间（8±2）d,下床活动时间（3.0±1.2）d。术后随访4～46个月,在随访期内肿瘤复发及转移者19例（7.5%）。结论后腹腔镜在上尿路肿瘤的治疗中具有创伤小、解剖层次清晰、术中出血少、术后恢复快等优势,治疗效果与开放手术相似。     

严重急性呼吸综合征患者肾内免疫细胞的免疫组织化学观察

目的探讨严重急性呼吸综合征(SARS)患者肾内免疫细胞的免疫组织化学变化并对其作用进行分析。方法应用免疫组织化学方法显示6例SARS死亡患者和3例意外死亡者肾内免疫细胞,进行其形态观察,并采用图像分析系统进行定量分析。结果6例SARS患者肾内CD68 单核/巨噬细胞显著增多(P<0.05),CD3 T细胞、CD20 B细胞和S-100 树突状细胞与对照组无差别(P>0.05)。结论SARS患者肾内单核/巨噬细胞为主要免疫应答细胞,提示单核/巨噬细胞在SARS肾病变中起着重要作用。而T细胞、B细胞以及树突状细胞可能受到SARS冠状病毒的攻击,其功能可能遭到破坏。     

宫高腹围法预测巨大儿准确性的影响因素分析

目的探讨影响宫高腹围法预测巨大胎儿准确性的因素。方法选择2000～2006年在我院剖宫产出生的巨大儿1090例,产前测量宫高、腹围,以9种方法分别估算胎儿体重,与其出生体重相比较,计算符合率,同时观察胎儿孕龄、性别及孕母身高等因素对预测准确性的影响。结果经验法、罗来敏算法等5种方法对巨大儿的预测符合率超过50%,其中罗来敏算法的预测符合率达66.1%,而颜贞淑法的符合率最低,仅13.8%。胎儿孕龄和性别对预测准确性影响不大。罗来敏算法、袁冬生法等5种方法预测巨大儿体重的误差随孕母身高的增加逐渐减小。结论罗来敏算法、经验法等预测巨大儿准确性较高,颜贞淑法用于预测巨大儿准确性较差,建议不予采用,孕母身高可影响巨大儿体重预测的误差。     

凋亡及免疫激活相关基因在先兆子痫胎盘中的表达

目的：探讨细胞凋亡相关基因在先兆子痫胎盘组织中的表达谱及其影响机制。方法：采用分别包含220余种人类细胞因子相关基因或人类环境激素相关基因cDNA片段的基因芯片，检测严格配伍的先兆子痫和正常胎盘组织中基因表达谱的差异。结果：先兆子痫胎盘中与细胞增殖周期调控及凋亡相关的多种基因表达发生了变化，且大多数呈现表达增强。此外，与免疫系统激活有关的多条基因在先兆子痫胎盘中的表达也比正常胎盘高。结论：胎盘组织中多种与细胞凋亡调节有关的基因表达异常与先兆子痫的病理发生有关，而免疫系统激活也可能是其原因之一。     

SARS患者脾淋巴细胞免疫组织化学的定量分析

目的对严重急性呼吸综合征（SARS）患者脾淋巴细胞进行定量分析,为SARS的病理变化和发病机制的探讨提供证据。方法通过免疫组织化学技术对6例SARS死亡患者脾和6例意外死亡者正常脾CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T细胞及CD20^＋B细胞的分布进行观察,并进行图像分析。结果SARS患者脾内的脾小体及动脉周围淋巴鞘（白髓）均遭到严重损害。动脉周围淋巴鞘的数量减少90．39％;脾小体减少80％左右,有的甚至完全消失;脾红髓广泛出血坏死。红髓内的CD3^＋T细胞平均数较正常减少71．76％,有的甚至完全消失,CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞分别平均减少86％和84％。CD20^＋B细胞减少80％以上。结论定量分析显示,SARS死亡患者脾中T细胞和B细胞普遍严重减少,提示SARS患者免疫系统遭到严重破坏,并可能是疾病的原发性损伤。     

树突状细胞电转染的优化条件及影响因素

目的 探讨树突状细胞(DC)电转染的方法、优化条件以及影响DC电转染率和存活率的主要因素.方法 提取人肝癌细胞(Bel 7402) RNA,利用淋巴细胞分离液密度梯度法分离人外周血单个核细胞(PBMC),并通过贴壁法获取单核细胞作为树突状细胞前体(pDC).将pDC置含rhGM-CSF和rIL-4的RPMI-1640培养液内联合培养诱导7d,使之充分分化为未成熟的DC (imDC).应用电穿孔仪(electroporation apparatus)分别将人肝癌细胞总RNA和绿色荧光蛋白(GFP)电转染至imDC,并设定不同的电压、脉冲时间、细胞浓度、温度和电转染缓冲液等条件.荧光镜下和光镜下分别计算绿色荧光阳性细胞数和总细胞数.电转染1d后,用0.4%锥虫蓝染色分别计算其电转染率和存活率.结果 当imDC浓度为5×106/ml与40μg的人肝癌细胞总RNA混合,设定电转染仪电压为300V、脉冲时间为500μs时,其电转染率达到最高值,imDC存活率约49.07%.结论 电转染提供了一种使人肝癌细胞RNA电转染至imDC的可行技术.影响imDC电转染率的最主要因素是受体细胞imDC的生长状况、电转染的电压及脉冲时间.     

微囊化NGF基因修饰NIH3T3细胞对体外培养的组织工程皮肤功能的影响

神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)能促进周围神经再生,还能加速创面收缩和再上皮化。本实验采用微囊和组织工程研究技术,探讨构建微囊化转NGF基因NIH3T3细胞复合组织工程真皮的可行性及其生物效应。我们将NGF基因修饰的NIH3T3细胞包裹在海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊内体外培养,夹心ELISA法测定其上清NGF含量,将此微囊与人表皮细胞、成纤维细胞共培养一周后行MTT、羟脯氨酸(HP)测定、超微结构及组织形态学观察。用组织工程皮肤培养系统构建复合微囊的组织工程真皮,HE染色、羟脯氨酸测定和扫描电镜观察其生物功能及活性。我们发现:转NGF基因微囊体外培养8周,仍稳定分泌NGF,能促进人表皮细胞增殖,促进人成纤维细胞分泌胶原,复合组织工程真皮后仍保持此功能。因此,将微囊和转基因技术结合构建组织工程皮肤是可行的。     

云芝多糖增强巨噬细胞M—CSF的表达与分泌

为揭示云芝多糖作用与巨噬细胞Ｍ－ＣＳＦ表达与分泌的关系,采用活性测定,斑点杂交等方法,将云芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞Ｍ－ＣＳＦ表达及分泌的影响进行了探讨。结果显示,腹腔注射云芝多糖可以提高小鼠腹腔巨噬细胞培养上清中的Ｍ－ＣＳＦ活性,并使巨噬细胞Ｍ－ＣＳＦ ｍＲＮＡ的含量增加;应用ｍＲＮＡ合成抑制剂及蛋白合成抑制剂的研究发现,ａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ Ｄ及ｃｙｃｌｏｈｅｘｉｍｉｄｅｆ均能阻断云芝多糖对小