胆固醇衍生物阳离子脂质体复合EGFP—IL-1Ra质粒体外转染HELA细胞系的研究

目的研究胆固醇衍生物阳离子脂质体复合EGFP—IL—IRa质粒体外转染HELA细胞系的效率,为类风湿性关节炎治疗提供新的选择。方法制备新型胆固醇衍生物脂质体及EGFP—IL-1Ra质粒,两者结合转染HELA细胞系,通过体外凝胶阻滞试验检测阳离子脂质体与质粒DNA的最佳配比关系,MTT法检测脂质体细胞毒性,荧光免疫法检测HELA细胞的转染效率。结果实验中所用脂质体的IC50为650μg／mL,较对照组有更低的细胞毒性。脂质体／DNA质量比为50：1作为最适比例,荧光显微镜观测脂质体结合EGFP—IL-1Ra质粒转染HELA荧光强度高于单纯EGFP—IL-1Ra质粒转染组。结论胆固醇衍生物阳离子脂质体复合EGFP—IL-1Ra质粒可高效的转染HELA细胞系,有望成为类风湿性关节炎治疗的新方法。     

应用缝线锚钉修复跟腱断裂11例

<正>跟腱断裂是常见的运动损伤,多发生在平时很少活动,偶尔参加体育运动的30～50岁男性。由于跟腱及腱周组织的解剖生理特点,跟腱断裂后均需手术治疗。我院2005年6月～2008年9月将缝线锚钉     

喂养方式对6—12个月儿秋季腹泻的影响

目的；探讨不同喂养方式对婴儿秋季腹泻的影响。方法：研究75例6－12个月龄的秋季腹泻患儿的喂养方式对病情，病程和体重增长的影响。结果：病后断乳组较继续原喂养组病情重，病程长，体重增长慢；继续原喂养者中，乳类喂养优于非乳类喂养；乳类喂养的组间无统计学意义。结论：继续原有喂养，恢复期增加乳类等高蛋白食物，是适当的喂养方法。不宜在病后改变饮食结构，特别是停止乳类食品，这一习俗应该纠正。     

猫骨髓基质细胞诱导为神经干细胞的实验研究

目的观察猫骨髓基质细胞体外培养及诱导分化情况。方法从猫的骨髓中分离得到骨髓基质细胞(Bone Marrow Stromal cells．BMSC），在体外给予神经干细胞培养基培养，增殖后用分化诱导因子(维甲酸，Retinoic acid，RA)进行诱导分化．倒置相差显微镜下观察活细胞及免疫细胞化学染色情况。结果猫骨髓基质细胞在体外培养中胞体增大，镜下可见丰富的胞浆颗粒，继之出芽，贴壁生长，可形成克隆团，同时可传代培养。这些具有克隆能力的骨髓基质细胞能表达神经干细胞特异性抗原nestin，而且能分化出胶质细胞样细胞和神经元样细胞。结论猫骨髓基质细胞具有干细胞特征，在合适的条件下可扩增、形成克隆并诱导分化出神经胶质细胞和神经元特征细胞，它们可考虑作为神经系统功能缺失细胞移植治疗的种子细胞来源。     

Zürich大学妇科医院1978～1990年生殖器外肿瘤的卵巢转移

卵巢是生殖器外肿瘤转移最常见的部位,可能无临床表现,仅镜下在切除的附件中偶然发现。卵巢肿瘤中转移性占5％～40％。术前临床常不可能判断是原发性卵巢肿瘤或生殖器外肿瘤转移。应用影像学方法也难区分,因两者均呵显示实性、乳头状和囊性部分。至今也无肿瘤标记能加以鉴别。 1978～1990年Zrich大学妇科医院346例恶性卵巢肿瘤中,37例为生殖器外肿瘤转移至卵巢。     

结节性硬化症的皮肤特征1例

患者,女,17岁.于2006年4月23日,因癫痫发作12年伴面部丘疹10 年来本院皮肤科就诊.5岁出现癫痫部分性发作,平均每月4～10次,严重时每日发作4～6次,曾经口服苯妥英纳、苯巴比妥等,目前服用妥泰发作次数有所减少.     

饥饿诱导三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的自噬应答观察

目的观察饥饿诱导三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的自噬应答情况,并探讨其相关分子机制。方法将MDA-MB-231细胞分为四组,对照组加入DMEM培养液正常培养; Baf-A1组在DMEM培养液中加入100 n M的Baf-A1; EBSS(饥饿)组加入EBSS培养液; EBSS+Baf-A1(自噬阻断)组在EBSS培养液中加入100 n M的Baf-A1,四组均处理8 h后,分别采用实时荧光定量法和Western blotting法检测各组微管相关蛋白轻链3(LC3B)、自噬相关蛋白7(ATG7)和自噬相关蛋白4A(ATG4A)的mRNA及蛋白。结果与对照组比较,EBSS组LC3B、ATG7 mRNA相对表达量升高,ATG4A mRNA相对表达量降低;与EBSS组比较,EBSS+Baf-A1组LC3B mRNA相对表达量升高、ATG7 mRNA相对表达量降低,与Baf-A1组对比,EBSS+Baf-A1组中LC3B mRNA相对表达量增加,ATG7和ATG4A mRNA相对表达量降低。与对照组比较,EBSS组LC3BⅡ/LC3BⅠ升高,ATG4A蛋白表达降低;与EBSS组比较,E...     

基于网络药理学探讨清热活血方抗类风湿性关节炎的作用机制

目的:清热活血在治疗类风湿性关节炎(RA)中效果显著,但其成分多样,作用机制不明,通过网络药理学方法探讨清热活血方抗RA的作用机制。方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选药物成分并利用SwissTargetPrediction数据库预测药物靶点,同时通过药物数据库(Drugbank)和在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)收集疾病靶点。将药物靶点与疾病靶点取交集,拓展并拓扑获取关键靶点,利用DAVID数据库对关键靶点进行基因本体论(GO)分类富集分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,通过Centiscape计算获取hub节点。结果:从清热活血方中筛选出活性成分31个,预测靶点419个,数据库挖掘疾病靶点共430个。将药物靶点与疾病靶点取交集、拓扑分析获得清热活血方治疗类风湿性关节炎的关键靶点113个,GO分析共获得生物过程、分子功能、细胞组分共479个富集结果。KEGG富集表明清热活血方可能通过MAPK、Estrogen、PI3K-AKT、Thyroid hormone、Neurotrophin、HIF-1、ErbB、FoxO、B cell receptor等通路干预RA。拓扑得到CULI、EP300、HSP90AA1、TP53、HSPA8、CDC5L、UBC、RPS27A共8个干预RA的Hub节点。结论:清热活血方可能通过多靶点、多通路进行调控,达到治疗类风湿性关节炎的作用。     

MXRA5和MYC作为肥胖和骨关节炎的诊断标志物和免疫浸润特征

目的 利用生物信息学和机器学习鉴定肥胖和骨关节炎(osteoarthritis,OA)的关键基因与免疫浸润细胞的相关性。方法 从基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)中筛选GSE55235、GSE44000和GSE151839 3个数据集,通过R软件获得差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),并通过基因本体功能(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)信号通路富集分析,探索其潜在的生物学功能。采用最小绝对收缩和选择算子（least absolute shrinkage and selection operator,LASSO）回归算法结合（support vector machine,SVM）筛选特征基因,并利用受试者操作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线验证关键基因的诊断价值,并使用CIBERSORT算法评估免疫浸润,通过NetworkAnalyst数据库预测靶miRNA和Cytoscape软件构建mRNA-miRNA调控网络,分析关键基因与免疫浸润的相关性。结果 GO基因富集分析获得99个差异表达基因（differentially expressed genes,DEGs）。免疫系统和免疫应答中的细胞活化被大量富集。KEGG通路分析显示,白细胞介素（interleukin,IL）-17、核因子κB（nuclear factor-κB,NF-κB）、B细胞受体和趋化因子信号通路显著富集。基于机器学习鉴定出两个关键诊断基因(MXRA5和MYC)。免疫浸润分析显示MXRA5与静息和活化的CD4记忆T细胞、活化的NK细胞、静息和活化的肥大细胞、M0巨噬细胞有关。此外,MYC与静息和活化的CD4记忆T细胞、浆细胞、活化的NK细胞、静息和活化的肥大细胞、M2巨噬细胞和嗜酸性粒细胞有关。CD4+细胞、NK细胞和肥大细胞与这2个枢轴基因有显著相关性。结论 通过生物信息学分析鉴定出2个免疫相关的关键基因,可能为肥胖相关性OA的治疗提供新的靶点。