用PCR-SSP技术检测弱D型RHD基因1例

RhD抗原(ISBT004.001;RH1)是一种由RhD蛋白携带的非常重要的血型抗原,是引起新生儿溶血病的最主要原因［1］。极少数人红细胞的D抗原表达数目减少,被称之为弱D(以前叫作DＵ),在白种人中的比例为0.2%～1%,在黄种人中的比例则更低。一部分弱D被解释为RhD蛋白的质的变化,称之为部分D,通常是由RHD／RHCE杂化基因引起,另一部分弱D是由Cde单倍体反式位置的抑制作用引起,这些弱D可能有正常的RHD基因,其RhD抗原表达只是微量减少,被宽松地称之为高级DＵ,现在常被定为正常的RhD。最近笔者发现1名供血者红细胞为弱D型,且实验结果显示弱D型具有独特的基因结构,现报告如下。 1 对象与方法 1.1 研究对象献血者,男,21岁,汉族,在校学生,来本中心献血时被确定为弱D;阴阳性对照血样亦均取自本中心献血者,民族为汉族。 1.2 序列特异性引物针对RHD和RHCE基因之间最具差异的区段设计多对不同引物,特异性地扩增RHD基因的第2～7,9,10外显子和RHCE基因的第1,2,4,5外显子,以及RHD和RHCE基因的第4内含子(表1)。另以人类生长激素(HGH)基因序列特异性引物作为内对照引物,扩增片段为429bp(以上引物均由美国G&T公司合成、纯化及鉴定)。 1.3 基因组DNA的制备使用美国G&T公司基因组DNA抽提试剂盒,采用盐析法从供血者外周血分离获得。0.3ml EDTA抗凝外周血加入1 ml红细胞裂解液,离心弃上清,沉淀加入170μl核裂解液及4μl SDS,剧烈振荡,再加入72μl NaCl溶液,10000r/min离心5min,取上清加入210μl异丙醇沉淀DNA,将DNA溶于100μl TE溶液中,保存待用。 1.4 特异性PCR扩增反应体系11μl,含1μl DNA,8μl引物混合物,1U Taq酶。扩增条件为95℃预变性5min,95℃变性30s,60℃退火30℃s,72℃延伸90s,30循环。PCR产物用2%的琼脂糖凝胶电泳检测,电泳时间为25min。     

RhD阴性患者输注“亚洲型”DEL型红细胞短期内引起高效价抗-D的同种免疫研究

目的 通过对1例RhD阴性患者输注“亚洲型”DEL红细胞后诱发同种抗-D免疫的研究分析,探讨RhD阴性患者输注DEL型策略。方法 采用血清学方法进行ABO及Rh系统血型抗原检测、不规则抗体筛查及鉴定,高分辨熔解曲线和基因测序分析检测DEL型的RHD基因分型。结果 受血者为O型,RhD阴性。供血者为RHD 1227G>A突变的“亚洲型”DEL,R h表型为Ccee。受血者输血后抗体筛查阳性,并鉴定为抗D和抗C,抗D效价512,抗C效价128。结论 RhD阴性患者输注“亚洲型”DEL红细胞会引起抗-D同种免疫。因此对于RhD阴性献血者应加强DEL型的筛查,必要时可以增加RHD基因检测以保障输血安全。     

托吡酯对局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用

背景：近年来研究发现托吡酯能阻断电压依赖性钠通道；增强γ氨基丁酸(Gamma-aminobutyric acid．GABA)能的活性；阻滞α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸／海人藻酸(α-amino-3-hydroxy-5-methy-lisoxazole-4-propionic acid／kainic acid．AMPA／KA)型谷氨酸受体的作用，从而推测其有神经保护作用。目的：观察托吡酯对大鼠局灶脑缺血的神经保护作用。设计：完全随机设计、对照实验研究。地点与材料：地点为上海第二医科大学附属仁济医院神经生物实验室。健康雄性大鼠50只Sprague-Dawley，体质量280～350g，随机分为3组，购自中科院上海实验动物中心。干预：以腔内线栓法制作大鼠局灶脑缺血模型，将50只Sprague-Dawley大鼠单纯随机分为对照组(10只)、40mg／kg治疗组(20只)、80mg／kg治疗组(20只)，在缺血30min后一次腹腔注射托吡酯，对照组注射生理盐水。主要观察指标：分别在4，24h后观察神经功能评分，24h后干／湿重法测定脑组织含湿量、氯化三苯基四氮唑(2，3，5-triphenyl tetrazolium chloride，TTC)染色观察测定梗死体积百分比．结果：①24h后神经功能评分显示，无论是40mg／kg组(3．20&;#177;0．52)还是80mg／kg组(2．70&;#177;047)，分别与4h(40mg／k，3．90&;#177;0．31；80mg／k，3．80&;#177;0．41)相比有非常显著(P&;lt;0．01)的差异，两治疗组24h的评分与对照组的评分(3．80&;#177;0．63)相比也有显著(P&;lt;0．05)和差异有非常显著的意义(P&;lt;0．01)。②托吡酯治疗40mg／kg、80mg／kg两组大鼠梗死侧大脑半球的含水量分别为(81．98&;#177;0.78)％，(80．38&;#177;0．80)％较对照组(83．05&;#177;0．56)％有显著的(P&;lt;0．05)和非常显著的(P&;lt;0．01)减少.③40mg／kg托吡酯治疗组观察的梗死体积百分比(38．00&;#177;4．26)％比对照组(41．40&;#177;3．36)％小(P=0．1686)；而80mg／kg治疗组的脑梗死体积百分比(34．50&;#177;6．52)％则较对照组显著减少(P&;lt;0．05)。结论：托吡酯能减轻线栓法大鼠急性局灶脑缺血模型神经功能损害，减轻脑组织水肿程度，大剂量托吡酯还能减小梗死体积，托吡酯对大鼠脑缺血有一定的神经保护作用。     

冷凝集素、抗-K、抗-E、抗-Jk~b同种抗体1例

为确保输血安全,对产生不规则抗体的患者有必要提前进行抗体鉴定及配血.但对严重贫血时才人院的患者,尤其不规则抗体情况复杂时,做到紧急供血非常困难.我们检测1名溶血性贫血患者标本,在筛血同时,临床迫于病情为患者输注了随机O型洗涤红细胞,后经详细检测证实患者体内除冷凝集素外,同时存在抗-K、抗-E和抗-Jkb同种抗体,现报告如下.     

内窥镜下桥脑小脑角三叉神经手术的护理干预

目的探讨内窥镜下,桥脑小脑角三叉神经微血管减压及神经梳理手术的围手术期护理干预对病人的影响。方法对1999~2005年34例单侧原发性三叉神经痛患者按入院顺序随机分为两组,1999~2003年的17例为对照组;2004~2005年的17例为干预组,对照组采用常规治疗护理,干预组除常规治疗护理外,还制定了系统的护理干预措施,对病人进行个性化护理。结果两组病人在住院时间和手术并发症等方面差异都有极显著意义(P<0.01)。结论系统的护理干预,对防治病人术后并发症有积极的意义。     

亲水性蛋白和多肽固体脂质纳米粒的制备方法

目的近年来,随着生物技术和基因工程的进步,许多新的具有药用活性的蛋白和多肽得到了发展。然而,由于蛋白和多肽的亲水性和不稳定性,需要选择特殊的载体和制备工艺,以克服药物本身的缺陷。方法本综述描述了在优化的制备方法下,固体脂质纳米粒（SLN）作为亲水性的蛋白和多肽药物的可选择载体,用来包封亲水性蛋白和多肽。结果 SLN作为载体可以改善蛋白的稳定性,避免其水解,并能够实现药物分子的持续释放。结论因此,许多重要的多肽和蛋白已被包封进SLN或正在研究当中。     

女性性满意度影响因素的调查分析

《女性性功能和性活动状况调查报告》已在本刊2000年第2期发表,现将有关女性性满意度影响因素的调查结果报告分析如下。     

重症母儿血型不合溶血病428例孕期监测及处理

目的：探讨重症母儿血型不合溶血病的孕期监测及处理。方法：回顾性分析428例重症母儿血型不合溶血病的产科临床资料。结果：428例孕妇,治疗前获存活儿158个,经孕期和新生儿期监测和治疗后获存活儿416个。结论：对于高危人群应早期诊断、早期治疗,加强孕期及新生儿期监测及处理,可明显改善围生儿结局。     

渗出性多形红斑的护理体会

渗出性多形红斑是与免疫有关的急性非化脓性炎症 ,以皮肤、粘膜多样化表现为特征 ,好发于过敏体质的患儿 ,反应原为支原体、病毒、细菌、真菌感染 ,药物 (磺胺药 ,抗惊厥药 ,抗生素 ,镇静剂 )及食物过敏。 1998年至今我们收治了 3例 ,经治疗护理 ,疗效满意 ,现报道如下。1　病例简介3例渗出性多形红斑患儿中男 2例 ,女 1例 ,4～ 9岁。患儿起病急 ,先有发热、咽痛、头痛 ,继而出现双耳、面部皮疹 ,后逐渐蔓延至全身 ,融合成大小不等的片状红斑 ,红斑扩大后中心逐渐出现青紫 ,与周围的鲜红形成对照 ,同时可有斑疹 ,丘疹 ,荨麻疹和大小疱疹 ,以…