关节炎大鼠脊髓背角内脑源性神经营养因子和促肾上腺皮质激素释放因子表达增加

研究表明,外周感染可导致脑源性神经营养因子(BDNF)的过度表达,BDNF可影响其他神经递质的合成.采用免疫组化和原位杂交的方法观察了完全福氏佐剂所致的关节炎大鼠脊髓内BDNF及其功能性受体酪氨酸蛋白激酶B(trkB)的表达和促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)mRNA的水平.实验发现,在皮下注射完全福氏佐剂后4 h,脊髓腰膨大同侧背角中的BDNF免疫活性神经元和CRF mRNA阳性神经元数升高,在24 h时达到峰值,在7 d时仍维持在较高水平.实验提示,关节炎大鼠脊髓内的BDNF和CRF可能参与了慢性痛反应.     

低剂量索曼对大鼠空间记忆及脑乙酰胆碱酯酶活力的影响

目的 研究慢性低剂量索曼（soman）染毒对大鼠空间学习记忆及脑组织胆碱酯酶（AChE）活力的影响，初步探讨慢性低剂量神经毒剂中毒的神经机制，为生化战争、武器消减意外事故和恐怖袭击情况下低剂量索曼中毒的临床预防和治疗提供理论依据。方法 以皮下注射索曼（2-40μg/kg,s.c,sig&;#215;14）为大鼠染毒模型，采用Morris水迷宫试验进行行为检测，比色法测脑组织AChE活力。结果 Morris水迷宫试验中，10μg/kg组和40μg/kg组大鼠逃避潜伏期分别为（9.1&;#177;2.1)s和（15.6&;#177;3.1)s，明显长于对照组（3.3&;#177;0.5)s(F=30.042,P&;lt;0.05)；撤除平台后跨越原平台位置次数分别为（6.0&;#177;1.58)和（5.0&;#177;1.41)，与对照组（11.2&;#177;1.5）相比明显减少；在原平台象限游泳时间百分比分别为（37.8&;#177;3.1)%和（34.0&;#177;2.6)%，明显低于对照组（52.6&;#177;3.6)%（P&;lt;0.01）。索曼组大鼠海马和前额叶皮质胆碱酯酶活力均明显低于对照组（F=107.054,51.858,P&;lt;0.01），且胆碱酯酶活性力的降低呈剂量依赖性。10μg/kg组和40μg/kg组大鼠海马和前额叶皮质AChE活力抑制率均达30%以上。结论 2μg/（kg&;#183;d）小剂量索曼慢性染毒对大鼠空间学习记忆能力无显著影响；10μg/（kg&;#183;d）和40μg/（kg&;#183;d）低剂量慢性索曼染毒降低大鼠空间学习记忆能力，这可能与乙酰胆碱过度堆积引起神经中枢胆碱能系统功能紊乱有关。     

海人酸致癫痫大鼠海马结构中noggin表达变化

目的:研究海人酸(kainic acid,KA)侧脑室注射并诱发癫痫持续状态(status epilepticus,SE)后大鼠海马结构中noggin基因在大鼠海马的表达变化。方法:大鼠在侧脑室注射KA后1、3、7、14、30和60d等不同时间,采用RT-PCR研究noggin mRNA含量变化,采用免疫组化观察noggin蛋白表达变化。结果:在正常大鼠海马结构中noggin mRNA有少量表达。noggin阳性细胞主要位于齿状回及CA3、CA1区,数量较少。侧脑室注射KA诱发SE后,noggin表达持续升高,3d达到高峰;7d在脑内的表达开始降低;注射后2个月,noggin表达降至术前水平,仅见散在的阳性细胞。结论:侧脑室注射KA并诱发SE后,大鼠海马结构中noggin表达明显增加。     

学生评教与高校青年教师课堂教学问题的分析

学生评教是高校课堂教学质量自我监控的重要环节之一,根据学校近期学生评教结果,分析青年教师在教学过程中存在的问题,并提出整改意见,为进一步完善和提高青年教师的教学质量提供借鉴。     

脉冲电磁场诱导小鼠胚胎干细胞向成骨细胞分化

目的 观察脉冲电磁场对小鼠胚胎干细胞向成骨细胞分化的影响.方法 将小鼠4 d龄胚胎干细胞(embry-onic stem cells,ESCs)衍生的胚胎体单细胞按5×104ml-1接种到细胞培养板,在DMEM基础培养液中使胚胎体单细胞贴壁培养.于第14～21天时,分别给予脉冲电磁场、化学诱导剂以及联合刺激.采用茜素红染色、骨钙素免疫组织化学染色、成骨分化关键因子Osterix和Cbfa-1/Runx-2的相对定量RT-PCR检测等方法观测成骨分化情况.结果 茜素红染色和RT-PCR结果均显示:脉冲电磁场组、化学诱导组以及联合培养组的成骨诱导效果均比空白对照组显著增加,其中又以联合培养组成骨诱导效果最明显.骨钙素免疫组化染色也显示:联合培养组中骨钙素分泌最多.结论 脉冲电磁场可以促进小鼠胚胎干细胞向成骨细胞分化,而且脉冲电磁场和常规化学诱导剂联合应用会产生协同效应,其成骨诱导效果优于两者单独应用.     

C57BL/6.NOD-Aec1Aec2干燥综合征模型小鼠干眼表型及性别差异研究

目的 探讨C57BL/6.NOD-Aec1Aec2干燥综合征模型小鼠干眼体征严重程度及泪腺炎症反应与性别的关系.方法 C57BL/6.NOD-Aec1Aec2小鼠雌性和雄性组各45只,在生后第4、8、12、16、20周龄时进行泪液分泌实验(Schirmer's test Ⅰ)、角膜荧光素染色及评分和泪腺组织HE染色、炎症细胞浸润计数评估及角膜上皮细胞表面微绒毛扫描电镜观察.结果 第4周龄时,C57BL/6.NOD-Aec1Aec2雌、雄性小鼠均未出现明显的干眼体征.从第8周龄开始,随着周龄增加,2组小鼠泪液分泌值均逐渐减少;角膜荧光素染色及评分值均明显加重;HE染色显示泪腺组织腺管、腺泡等结构破坏及炎症细胞浸润程度逐渐加重;扫描电镜观察显示角膜上皮细胞脱落增多,微绒毛减少,细胞紧密连接减少或中断.第16周龄时,雌性小鼠组较同龄雄性小鼠组的泪液分泌值显著减少(P =0.035),角膜荧光素染色评分高(P =0.028),雌性小鼠泪腺组织破坏及炎症细胞浸润程度更严重(P=0.017).结论 雌性C57BL/6.NOD-Aec1Aec2干燥综合征模型成年小鼠干眼体征较雄性更为严重,推测可能与雌激素水平变化有关.     

APP695和绿色荧光蛋白在PC12细胞中的共表达及对细胞的影响

目的 构建绿色荧光蛋白和瑞典突变型APP695共表达载体，将重组质粒转染PC12细胞获得高表达APP的PC12细胞克隆。观察基因转染后PC12细胞的细胞周期，超微结构和β淀粉样蛋白的分泌情况。方法 激光共聚焦显微镜挑选高表达绿色荧光蛋白的PC12细胞克隆。放射免疫方法测定β淀粉样蛋白，流式细胞仪检测细胞周期，电镜观察细胞超微结构。结果 瑞典突变型APP转染能使PC12细胞体积增大，形态变长，微绒毛增多，分泌Aβ增多，细胞周期中G0和G1期细胞比例增多。结论 绿色荧光蛋白和瑞典突变型APP695共表达载体转染的PC12细胞可作为AD发病机制和治疗研究的细胞模型。     

Mel—la,Mel—lb褪黑素受体在大鼠海马分布的原位杂交研究

Mel-la,Mel-1b为分别从人大脑和视网膜克隆的两种褪黑素膜受体。随着褪黑素的各种重要生理作用的不断发现，对其受体的研究也日益广泛和深入，本文采用原位杂交技术研究了Mel-1a,Mel-1b两种褪黑素膜受体mRNA在海马中的表达和分布，结果表明此两种受体mRNA在成年大鼠海马各区神经元中均有表达。由于褪黑素是通过细胞膜上与G蛋白耦联的Mel-1a,Mel-1b受体而发挥作用的，而海马又是与老化密切相关的脑区，提示褪黑素对海马的老化有调节作用。     

AD大鼠模型的制备及行为学和超微结构研究

目的 观察大鼠皮下长期间断性注射叠氮钠后的学习记忆、中枢神经系统β—淀粉样蛋白(Aβ)含量和神经元超微结构的改变。方法 采用Morris水迷宫、放射免疫和透射电镜的方法。结果 注射氮钠后4周，大鼠Morris水迷宫试验逃逸潜伏期明显延长，海马和额叶大脑皮层内Aβ含量显著升高，神经元内出现脂褐素沉积、髓鞘样变等迟行性变，线粒体肿胀、嵴断裂、数目减少，突触小泡数目减少。结论 长期皮下注射叠氮钠可以制备AD氧化应激大鼠模型，并导致中枢Aβ的升高，神经元内出现退行性变和线粒体的损伤。     

孤啡肽对大鼠急性吗啡耐受形成的影响

目的：探讨孤啡肽在急性吗啡耐受形成中的作用。方法：本实验采用热 甩尾观察和反转录多聚酶链式反（RT－PCR）等方法，对大鼠急性吗啡耐受形成中痛行为，海马孤啡肽（OFQ）mRNA表达进行检测，并通过侧脑室注射孤啡肽受体反义寡聚核苷酸，以抑制OFQ作用，来观察其对急性吗啡耐受形成的影响。结果：伴随急性吗啡耐受的形成，海马中OFQ mRNA呈现高趋势。预先以孤啡肽受体反义寡聚核苷酸处理，AMT形成受抑制。结论：OFQ的升高是大鼠AMT形成的重要原因之一。