大鼠肝再生氨基酸靶向代谢组学分析

目的 探讨氨基酸代谢对大鼠肝再生 (LR)的调控作用。 方法 大鼠随机分为10组,每组5只,包括9个部分肝切除组 (PH)和1个正常对照组。运用质谱选择反应检测扫描/多反应检测扫描 (SRM/MRM)对大鼠肝再生中10个时间点的20种氨基酸的含量进行靶向代谢组学鉴定,并对氨基酸含量变化进行聚类分析。 结果 丙氨酸在30、36和72 h上调;精氨酸在6和12 h上调;天冬氨酸在6、12和36 h上调;谷氨酸在6、12、30、36、72和120 h上调;组氨酸在12、24、30、36、72和120 h上调;谷氨酰胺在72 h上调;异亮氨酸在24 h下调。通过对氨基酸聚类分析发现,这些氨基酸可以聚为3类。 结论 肝再生过程中多种氨基酸发生了变化,且贯穿大鼠肝再生的全过程。氨基酸含量的变化,对肝再生中肝细胞增殖有重要作用。     

大鼠肝大部切除后热休克处理对热休克蛋白和磷酸酶的影响

目的　研究热休克蛋白 (Hsc70 /Hsp6 8)、酸性磷酸酶 (ACP)、碱性磷酸酶 (AKP)在肝再生过程中的生物学作用 ,检测这些大分子在大鼠肝大部切除后热休克处理下的动态变化。　方法　用组织化学、免疫组织化学、Western印迹、酶的原位复性电泳、体视学分析、比色分析等方法。　结果　肝切除和热休克联合处理 (PH - HS)后的0～ 144 h恢复期间 ,ACP有 3个高活性期 (12、36和 96 h) ,AKP有 2个高活性期 (12和 36 h) ,Hsc70 /Hsp6 8有 2个高表达期 (16和 48h) ;PH- HS后 ACP和 AKP活性增强与 140～ 180 k D的酶活性增加有关。与只进行热休克 (HS) (44℃ ,30 min)处理或与只进行 2 /3肝切除 (PH)后恢复期间 Hsc70 /Hsp6 8含量和磷酸酶活性动态变化的比较表明 ,PH- HS对 Hsc70 /Hsp6 8含量和磷酸酶活性的影响可持续 12 0 h;PH- HS中的 PH能略微降低 ACP和 AKP活性 ,减少 HS诱导肝细胞合成 Hsc70 /Hsp6 8的量 ;PH- HS中的 HS处理能抑制 PH诱导的 Hsc70 /Hsp6 8表达和推迟 ACP活性高峰出现的时间。　结论　 ACP、AKP和 Hsc70 /Hsp6 8均在肝细胞的 HS反应和肝再生中起作用 ,其中 ,ACP可能在启动肝再生中起重要作用 ,AKP和 Hsc70 /Hsp6 8可能在 DNA合成和细胞分裂中起重要作用     

Caspase信号通路调控大鼠再生肝肝细胞的凋亡

目的 从基因转录水平了解Caspase信号通路各途径对大鼠再生肝肝细胞凋亡的调节作用。方法 将114只大鼠随机分为19组,包括9个部分肝切除组,9个假手术组和1个正常对照组。于手术后10个不同时间点用常规的两步灌流法和Percoll密度梯度离心法分离大鼠肝细胞,用大鼠Genome 230 2.0芯片检测在大鼠肝再生（LR）中Caspase信号通路相关基因表达变化,用荧光定量PCR确定芯片结果的可靠性,用生物信息学和系统生物学等方法分析基因表达变化预示的Caspase信号通路在调控大鼠再生肝肝细胞凋亡中的作用。结果Caspase信号通路涉及38条途径和123个基因,大鼠Genome 230 2.0芯片含其中的106个基因,38个基因在大鼠肝再生中与肝细胞相关。Caspase信号通路抑制细胞凋亡的21条途径中,途径1、2和11在大鼠部分肝切除（PH）后的30h,途径27、29和31在72h,途径15和16在2h和30h,途径3和4在30h和72h抑制肝细胞凋亡。促进细胞凋亡的17条途径中,途径14在2h,途径34在6h,途径7在30h,途径13在2h和30h,途径36在6h和30h促进肝细胞凋亡。同时,尚未发现其他途径参与肝细胞增殖和（或）凋亡调控。结论 Caspase信号通路的15条途径和38个基因调控大鼠再生肝的肝细胞凋亡。     

灰鹤(Grus grus)消化系统各器官蛋白水解酶的种类和活性研究

目的 研究灰鹤(Grus grus)消化系统各器官蛋白水解酶的种类和性质,为探讨野生鸟类的分类地位、系统演化提供基础资料.方法 采用蛋白水解酶复性电泳(G-PAGE)技术.结果 1.灰鹤消化系统蛋白水解酶种类多,在各种pH条件下,共计有26种;2.灰鹤消化系统蛋白水解酶的活性受pH值的影响和制约,在中性条件下酶活性最强,酸性条件下最弱,总的酶活性表现为中性＞碱性＞酸性;3.同一器官在不同的pH条件下,蛋白水解酶的种类和活性有较大的变化,不同器官蛋白水解酶的最适pH条件各不相同;4.在各种pH条件下,19 kD酶带普遍存在于除腺胃以外的各器官中,在中性条件下,各消化器官都分布有66和22 kD两条酶带.结论 灰鹤消化系统蛋白水解酶的最适pH为7.0;66、22、19 kD酶带的分布、活性及pH依赖性特点是灰鹤消化系统蛋白水解酶的主要特征.     

核酸及其衍生物的代谢?加工?运输相关基因在大鼠肝再生中表达模式的分析

目的在基因转录水平了解核苷酸及其衍生物、DNA及RNA代谢、加工、运输相关基因在大鼠肝再生(LR)中的表达变化。方法用搜索网站资料和查阅相关论文等方法获得核苷酸及其衍生物、DNA及RNA代谢、加工、运输相关基因,用大鼠基因组230 2.0芯片检测它们在大鼠再生肝中的表达情况,用手术组和假手术组比较的方法确定肝再生相关基因。结果初步证实,上述基因中有240个基因与大鼠肝再生相关。肝再生早期[部分肝切除(PH)后0.5~4h]、前期(PH后6~12h)、中期(PH后16~66h)、后期(PH后72~168h)等4个时期起始表达的基因数分别为65、14、150和11,基因的总表达次数为133、87、627和169,它们的表达模式分别为6、5、22和9种,共表达上调768次,下调248次。肝再生前期和中期mRNA降解增强;前期、中期和后期DNA重组、修饰、转录及mRNA加工和运输增强;几乎整个肝再生中核苷酸及其衍生物代谢、DNA复制、包装和分解活动增强。结论肝再生相关基因主要在肝再生早期起始表达,在不同时期发挥作用。     

中国大鲵(Andrias davidianus)7种组织器官蛋白水解酶的种类和活性分析

目的 了解大鲵(Andrias davidianus)脑、心脏、肺、肾脏、眼球、皮肤和肌肉的蛋白水解酶种类和性质。方法 采用蛋白水解酶复性电泳(GPAGE)技术。结果 1．脑的蛋白水解酶在pH4．5时有较弱的活性，在其他pH条件下没有活性；2．心脏和肺的蛋白水解酶在pH4．5和pH7．0时有活性；3．肾脏的蛋白水解酶在pH4．5时有活性；在pH7．0时，蛋白水解酶的活性强、种类多；4．在pH4．5和pH9．5条件下，未检出眼球有蛋白水解酶活性；5．肌肉的蛋白水解酶在pH9．5时活性较强，在pH7．0时，蛋白水解酶活性最强、种类最多；6．皮肤的蛋白水解酶种类与肌肉相似，但活性比肌肉弱。结论 大鲵肾脏和肌肉的蛋白水解酶活性强、种类多；脑、心脏、肺、皮肤的蛋白水解酶活性弱、种类少；眼球几乎无蛋白水解酶活性。脑的蛋白水解酶活性的最适pH为酸性；心、肺和肾的蛋白水解酶活性的最适pH为中性偏酸；皮肤和肌肉的蛋白水解酶活性的最适pH为中性。     

胰岛再生源蛋白与肝脏疾病和肝再生

胰岛再生源蛋白 (Reg) 是相对分子质量为16kD的分泌型蛋白,属于C类凝集素超家族成员。Reg蛋白是1个多功能分子,主要参与调控胰腺、胃、肠和肝脏中细胞的生长和增殖,在消化性疾病及癌症的发展和预后中发挥重要作用。我们主要综述了Reg对肝脏疾病和肝再生调控的研究进展,包含其在消化性疾病中介导的信号通路,为开展Reg在相关疾病诊疗及促进肝再生中的应用研究提供重要理论基础。     

肝干细胞移植治疗肝损伤的研究进展

<正>肝脏是人体重要的器官,执行合成代谢、解毒和免疫防御等许多重要的功能。近年来,由于病毒性感染、毒性损伤、遗传缺陷及长期接触代谢金属铁和铜等造成肝功能紊乱和急、慢性肝损伤和肝硬化~([1]),使得肝脏相关疾病的发病率和死亡率不断上升。原位肝移植被认为是治疗终末期肝损伤最有效的方法之一,但由于缺乏合适的肝供体、手术风险、     

肝卵圆细胞的研究进展

肝卵圆细胞（OCs）是肝脏的干细胞,能够分化为肝细胞、胆管上皮细胞及其他细胞,亦与肝再生和肝脏疾病密切相关。本文简要地总结了近几年有关肝卵圆细胞的来源、定位、增殖、分化、凋亡、移植及在肝再生和肝脏疾病中作用等研究进展。