荧光定量PCR检测TCR VγI-Jγ基因重排标准品质粒及标准曲线的构建

目的：构建荧光定量PCR检测TCR VγI-Jγ基因标准品重组质粒和标准曲线，为建立实时荧光定量PCR准确检测淋巴系肿瘤微小残留病奠定基础。方法：对TCR VγI-Jγ基因进行序列分析，利用引物设计软件设计出一对引物和一条荧光探针。提取急性淋巴细胞白血病患者的DNA，经PCR扩增，产物纯化后与pMD 18-T Vector连接，转化到大肠杆菌DH5α，筛选得到标准品的质粒。结果：重组质粒进行荧光定量PCR扩增出现强烈的荧光值增长，表明TCR VγI-Jγ基因已成功克隆。以10^0～10^-5不同稀释水平的标准品进行荧光定量PCR扩增，Ct值分别为21．08、24．34、27．53、30．58和33．25。统计学分析显示Ct值与标准品浓度的对数存在良好线性关系，回归系数为0．998。结论：所构建的TCR VγI-Jγ基因荧光定量PCR检测标准品特异性和线性关系好，准确可靠，利于统一标准。     

肝脾T细胞淋巴瘤转变为淋巴瘤白血病1例临床观察及文献复习

目的:提高对肝脾T细胞淋巴瘤诊断和治疗的认识.方法:报道1例罕见肝脾T细胞淋巴瘤并胸膜浸润及转变为淋巴瘤白血病的全过程,并进行文献复习.结果:肝脾T细胞淋巴瘤属外周T细胞淋巴瘤的一种亚型,临床以发热、脾脏显著肿大、肝大为主要表现,淋巴结一般不受累.其病理特征是淋巴瘤细胞的增殖高度局限在肝脾和骨髓的窦内.PCR检测TCRγ或δ基因重排阳性.结论:本病进展快、疗效差,生存期短,可转变为白血病.PCR检测骨髓标本TCRγ基因重排对该病诊断有帮助.对于合并骨髓浸润的肝脾T细胞淋巴瘤应考虑应用白血病的化疗方案,可能会获得较好疗效.     

难治性复发性急性淋巴细胞白血病治疗进展

难治和复发是导致急性淋巴细胞白血病(ALL)治疗失败的根本原因,提高难治和复发ALL的疗效无疑将改善ALL的预后.     

急性髓细胞白血病M2型并发硬膜外占位性病变2例

急性髓细胞白血病 (ＡＭＬ)Ｍ2 型 ,最常见ｔ( 8;2 1)染色体异常。我们遇到ＡＭＬＭ2 型并发中枢神经系统硬膜外浸润 2例 ,现报道如下。1　临床资料病例 1.男 ,41岁 ,因咽痛发热 1个月 ,发现全血细胞减少 2 0ｄ ,于 1999- 10 - 11入我院。查体 :轻度贫血貌。血常规 :白细胞 5 1× 10 9/Ｌ ,血红蛋白 98 5ｇ/Ｌ ,血小板 41 6× 10 9/Ｌ。骨髓象示 :有核细胞增生极度活跃 ,原始粒细胞0 2 1,早幼粒细胞 0 15 ,中性中幼粒细胞 0 2 8。细胞化学染色 :过氧化物酶强阳性 ,非特异性脂酶强阳性且不能被ＮａＦ抑制 ,碱性磷酸酶阴性 ,ＦＡＢ分型诊…     

炎症分子核因子κB及骨桥蛋白在骨关节炎患者膝关节液中的表达及临床意义

目的 分析炎症分子核因子κB及骨桥蛋白在骨关节炎患者膝关节液中的表达及临床意义.方法 选取46例采取人工全膝关节置换术治疗的骨关节炎患者作为观察组,另选同期的46例外伤截肢、半月板损伤、交叉韧带断裂、盘状软骨损伤等行手术治疗的患者作为对照组,分别采用免疫组化法、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测观察组与对照组患者膝关节液中的炎症分子核因子κB及骨桥蛋白的表达水平,根据骨关节炎诊治指南(2007年版)对骨关节炎患者分为早期、中期、晚期,比较观察组与对照组、不同临床分期骨关节炎患者膝关节液中炎症分子核因子κB及骨桥蛋白的表达水平,采用Spearman相关分析炎症分子核因子κB及骨桥蛋白与骨关节炎临床分期、炎症分子核因子κB与骨桥蛋白的相关性.结果 观察组膝关节液中的炎症分子核因子κB及骨桥蛋白表达水平均高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05);不同临床分期骨关节炎患者膝关节液中炎症分子核因子κB及骨桥蛋白的表达水平差异有统计学意义(P＜0.05),炎症分子核因子κB及骨桥蛋白的表达水平随着临床分期增加而提高;经Spearman相关分析,炎症分子核因子κB及骨桥蛋白与骨关节炎临床分期均呈正相关(r =0.714、0.498,P＜0.05),炎症分子核因子κB与骨桥蛋白呈正相关(r=0.512,P＜0.05).结论 骨关节炎患者膝关节液中的炎症分子核因子κB及骨桥蛋白表达水平显著提高,骨桥蛋白可能通过炎症分子核因子κB信号转导途径参与骨关节炎的发生、发展,根据两者的表达水平来判断病情的严重程度具有积极作用.     

真方白丸子汤治疗缺血性中风急性期风痰入络型疗效观察

目的：观察真方白丸子汤治疗缺血性中风急性期风痰入络型患者的临床疗效。方法：将60例住院患者随机分为治疗组30例和对照组30例,治疗组在常规脑血管病治疗基础上加服真方白丸子汤,7d为1个疗程,治疗2个疗程。结果：患者入院第7天、第14天临床疗效明显优于对照组,差异有统计学意义,2组患者平均住院时间与治疗费用差异也有统计学意义。结论：真方白丸子汤治疗缺血性中风急性期风痰入络型具有很好的临床疗效。     

基因扫描分析维持性血液透析患者外周血T细胞克隆性分布的特点

目的:了解慢性肾功能衰竭进行维持性血液透析(MHD)患者的外周血T细胞克隆性增殖的特性和意义. 方法:通过RT-PCR方法扩增11例膜性肾病(MGN)3例、膜增殖性肾炎(MPGN)3例、IgA肾病(IgAN)4例、局灶节段性肾小球硬化症(FSGS)1例.MHD患者外周血单核细胞T细胞受体(TCR)Vβ24个亚家族基因的CDR3,阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描的方法分析产物CDR3的长度及序列,了解T细胞的克隆性.结果:11例MHD患者中仅表达1～10个TCRVβ的亚家族,其中2例只表达Vβ3一个亚家族,分别为寡克隆及双克隆性.最常见的TCR Vβ亚家族是Vβ3,其次Vβ8、Vβ19、Vβ22,再次为Vβ10、Vβ23.11例患者的透析时间与TCR Vβ表达呈显著负相关(r=-0.646,ρ=0.044);用协方差分析MGN、MPGN、IgAN三个病种的TCR Vβ表达差别:不同透析时间的TCR Vβ表达的数量不同(F=10.193,P=0.019),而MGN、MPGN、IgAN三个病种之间的表达量没有显著的差异(F=1.772,P=0.249).结论:MHD患者外周血存在着TCR Vβ亚家族T细胞倾斜分布的现象,并有克隆性增殖的特征,提示大部分MHD患者存在某些细胞免疫功能低下和有相同的免疫刺激原.透析时间愈长,TCR Vβ表达的数量愈少,提示长期血液透析可能是MHD患者的细胞免疫功能低下的一个原因;而 MGN、MPGN、IgAN三个病种之间TCRVβ的表达量没有显著差异.     

静脉应用胺碘酮转复术后高龄患者心房颤动21例治疗体会

目的 观察静脉应用胺碘酮转复术后高龄患者心房颤动的疗效及不良反应。方法 选择2001年1月至2003年6月手术后一周内发生心室率过速的心房颤动的高龄患者21例,给予静脉胺碘酮负荷量3mg/kg,10-15min静脉注射,继以维持量1.0-1.5mg/kg静脉滴人,15-30min未转复的且心室率快者追加一次胺碘酮1.5mg/kg。转复窦性心律后改用口服胺碘酮维持治疗。结果 21例患者静脉注射胺碘酮负荷量内均未转复窦性心率,继续静脉点滴维持量达250mg-450mg 17例患者(80.95％)转复为窦性心律,达450-700mg 4例患者(19.05％)为窦性心律,总有效率100％。治疗中无1例出现血压明显下降及心功能恶化,转复为窦性心律后无缓慢心律及房室传导阻滞出现。2例发生轻度静脉炎,不影响疗效。结论静脉应用胺碘酮的方法,转复高龄患者手术后急性快室率心房颤动迅速有效,未发生心脏毒性作用,可作为首选药物。     

全膝关节置换术后小腿急性蜂窝织炎分析

目的 总结全膝关节置换术后并发小腿急性蜂窝织炎的临床特点及治疗经验。 方法 回顾性分析2008年1月－2013年1月收治的5例全膝关节置换术后并发迟发性小腿急性蜂窝织炎患者的病历资料,分析其临床特征、治疗方法及转归。 结果 全膝关节置换术后并发小腿急性蜂窝织炎多由足癣皮肤破损导致细菌入侵扩散所致,主要表现为膝关节周围及小腿红肿、疼痛,实验室检查C反应蛋白、血沉、白细胞总数及中性粒细胞百分比增高,2例血培养查见溶血性链球菌,所有患者经治疗后均顺利出院,无假体周围感染病例。 结论 全膝关节置换术后并发小腿急性蜂窝织炎依靠典型的临床表现和实验室检查诊断并不困难,治疗上强调及时综合治疗,并且注意寻找原发病灶进行彻底根治,如足癣,皮肤浅表疽、痈等感染。     

β-1,3-葡聚糖的结构与功能

β-1,3-葡聚糖是一类具有抗癌及免疫调节等生物活性的生物大分子,其高级结构为单股和(或)3股(超)螺旋体,它的生物活性、理化特性与其分子结构有一定对应关系。