RFWD2调控小鼠大脑皮层神经元树突发育及树突棘形成的功能效应

目的 探讨环指和色氨酸-天冬氨酸重复序列结构域2（RFWD2）差异表达对小鼠大脑皮层神经元树突发育及树突棘形成的功能效应。方法 利用免疫荧光鉴定RFWD2在小鼠全脑的定位及表达谱,通过RFWD2与神经元突触蛋白的共定位,明确其在神经元的细胞定位。通过电转染RFWD2-Myc过表达与shRNA载体,分析其对体外培养小鼠大脑皮层神经元树突发育、树突棘形成与突触功能的影响及作用机制。结果 RFWD2在小鼠大脑皮层与海马区均高表达,与突触形成具有明显的正相关性。RFWD2在神经元的突触前膜及后膜均有表达,与神经元树突的长度、分支数量与复杂性呈正相关。与对照组相比,RFWD2 过表达显著降低了神经元突触蛋白数量［突触小泡蛋白（SYN）4.5±1.2 vs 17.2±2.4/10 μm,P<0.01;突触后致密蛋白（PSD95）：2.1±0.3 vs 8.5±1.3/10 μm,P<0.01］;而RFWD2抑制表达显著增加了突触蛋白数量（SYN：19.6±2.6/10 μm,P<0.05;PSD95：11.5±1.1/10 μm,P<0.05）。与对照组和RFWD2过表达相比,RFWD2抑制表达降低了树突棘的数量（4.3±0.2 vs 6.2±0.5/10 μm,P< 0.05;4.3±0.2 vs 6.9±1.1/10 μm,P<0.01）。结论 RFWD2可通过Pea3家族成员与c-Jun的泛素化影响突触蛋白的表达,调控小鼠大脑皮层神经元树突发育、树突棘形成与突触功能效应,为后期作为靶点开展神经系统疾病的治疗奠定基础。     

超声引导下甲状腺结节细针穿刺19例护理体会

<正>甲状腺是人体一个非常重要的内分泌器官,甲状腺结节是临床最多见的甲状腺疾病。在健康人群里,约3%~7%的人能触及到甲状腺结节,超声检查甲状腺结节发现率可高达20%~70%,在发现的甲状腺结节中恶性结节仅占5%左右~([1])。鉴别结节的性质,尤其是结节的良恶性,对于临床诊断和治疗具有重要意义,超声引导下甲状腺细针穿刺抽吸细胞学检查(FNAC)对甲状腺结节的诊断、鉴别诊断及指导治疗等具有十分重要的价值,有报道其诊断准确率可达95%左右,因而     

弥散张量成像评估终末期肾病继发甲状旁腺功能亢进症患者认知及脑白质损伤

目的 采用弥散张量成像(DTI)评估终末期肾病(ESRD)继发甲状旁腺功能亢进症(SHPT)患者认知及脑白质微结构损伤。方法 回顾性分析50例ESDR患者,以其中25例SHPT者为SHPT组,以25例非SHPT者为对照组,记录其简易精神状态检查(MMSE)评估结果及相关临床血清学指标;比较颅脑DTI所示组间各向异性分数(FA)、平均弥散率(MD)、轴向弥散率(AD)及径向弥散率(RD),分析SHPT组MMSE评分及血清学指标与上述指标组间存在差异脑区DTI参数的相关性。结果 相比对照组,SHPT组MMSE评分明显减低、血清钙水平略升高(P均＜0.05);包括大脑半球、小脑及脑干的多个脑区FA及AD减低,且大脑异常以右侧为主,部分脑区RD升高。SHPT组MMSE评分与全段甲状旁腺激素(iPTH)水平呈负相关(r=－0.800,P＜0.01);血清钙、磷酸盐及肌酐水平与部分脑区FA及AD呈负相关(r均＜0,P均＜0.05),血清磷酸盐水平与部分脑区RD呈正相关(r均＞0,P均＜0.05)。结论 ESRD SHPT患者存在认知功能障碍;其脑白质微结构广泛损伤并以轴突损伤为主,具有右侧大脑半球偏侧性,且与血清钙、磷酸盐及肌酐水平相关。     

Reg Ⅳ基因对5-FU干预结直肠癌LoVo细胞增殖、凋亡的影响

目的 观察Reg Ⅳ基因对5-FU干预结直肠癌LoVo细胞增殖、凋亡的影响.方法 构建重组质粒pcDNA3.1-RegⅣ并转染LoVo细胞,RT-PCR和细胞免疫组化检测转染前后细胞中Reg Ⅳ基因的mRNA和蛋白表达.终浓度80 μmol/L的5-FU干预细胞48 h后,MTT检测细胞的增殖活性.平板克隆实验观察细胞的克隆形成能力.FCM检测细胞凋亡.结果 LoVo细胞不表达Reg Ⅳ基因,转染后的LoVo/RegⅣ细胞高表达RegⅣ.5-FU干预后,未转染组(LoVo)和空转质粒组(LoVo/空载)细胞增殖活性、克隆形成能力较RegⅣ转染组(LoVo/RegⅣ)明显降低(P<0.05),细胞凋亡率较RegⅣ转染组明显升高(P<0.05).结论 RegⅣ基因表达可能降低5-FU抑制LoVo细胞的增殖活性及克隆形成能力,并能抑制5-FU诱导LoVo细胞凋亡的作用.Reg Ⅳ基因可能是患者对5-FU化疗产生抗药性的标志及导致临床化疗失败的原因之一.     

尿液pH值与2型糖尿病肾病的相关性研究

目的探讨2型糖尿病肾病患者尿液pH值检测的临床意义。方法选择2糖尿病患者301例和健康体检者131例,记录2糖尿病病程、测量患者血压、计算BMI指数,入院当天留取晨尿检测尿微量白蛋白、尿肌酐、尿液常规,采血检测血清生化指标、血常规指标,计算尿微量白蛋白/肌酐比值(UACR),并将2糖尿病患者分组:正常白蛋白尿(A组)160例、微量白蛋白尿(B组)70例、大量白蛋白尿(C组)71例,分析并比较不同组别各指标的差异,Spearman相关分析尿液pH值与其他指标之间的相关性。结果除了男女比例、HDL-C、LDL-C、PLT、ALT、AST、舒张压外,不同病情糖尿病患者基线指标的总体差异均有统计学意义(P均0.05)。不同病情2型糖尿病患者尿液pH值[A、B、C组分别为(5.64±0.59)、(5.72±0.71)、(5.86±0.75)]均显著低于正常对照组(6.18±0.34)(P均0.05)。随着糖尿病肾病病情进展,尿液pH值逐渐升高,但各组之间的检测值有重叠,其中A与B组、B与C组之间的差异均无统计学意义(P均0.05)。经Spearman相关分析,发现糖尿病患者尿液pH值与收缩压呈正相关(r=0.15,P0.05),而与血清TBIL、UA、ALB呈负相关(r分别为-0.17、-0.18、-0.14,P均0.05)。结论 2糖尿病患者的尿液pH值较正常人明显下降,但随着DN的病情进展,尿液pH值呈逐渐升高的趋势。     

2型糖尿病患者视网膜神经纤维层厚度与膳食脂肪的相关性

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者视网膜神经纤维层(RNFL)厚度与膳食脂肪的相关性。方法选取就诊于哈尔滨医科大学附属第一医院内分泌科的186例T2DM患者。收集入组患者的一般临床资料,包括年龄、性别、病程、既往史、吸烟饮酒史、入院血压、身高、体质量等,并计算体质量指数(BMI)等指标。记录糖化血红蛋白A1c、空腹C肽、血脂、肾功能等相关血化验结果,光学相干断层成像(OCT)测量RNFL厚度。入组人员填写半定量饮食频率问卷。采用SPSS 22.0软件进行统计学分析,Spearman秩相关分析各象限RNFL厚度与膳食脂肪量之间的相关关系;采用单元和多元线性回归分析双眼各象限RNFL厚度的独立影响因素。结果 (1)相关分析显示,畜禽肉及肉制品与视网膜上、下方RNFL厚度(上方:r=-0.192,P=0.009;下方:r=-0.286,P=0.000)显著负相关;软饮与眼睛上方及下方RNFL厚度(上方:r=-0.169,P=0.021;下方:r=-0.264,P=0.000)均显著负相关;血清甘油三酯与视网膜下方、鼻侧RNFL厚度(下方:r=-0.210,P=0.004;鼻侧:r=-0.150,P=0.041)均显著负相关;血清肌酐与视网膜上方及鼻侧RNFL厚度(上方:r=-0.159,P=0.032;鼻侧:r=-0.156,P=0.036)呈负相关;年龄也与眼睛上方及鼻侧RNFL厚度(上方:r=-0.169,P=0.021;鼻侧:r=-0.184,P=0.012)呈负相关关系。(2)单元线性回归分析表明,年龄、甘油三酯、血肌酐、畜禽肉及肉制品与T2DM患者RNFL厚度相关(P0.05)。在上述单元线性回归分析基础上,以T2DM患者各象限RNFL为因变量,以年龄、甘油三酯、血肌酐、禽畜肉及肉制品为自变量,行多元线性回归分析,结果显示甘油三酯(P=0.007)、禽畜肉及肉制品(P=0.021)是视网膜下方象限RNFL厚度的独立影响因素。年龄(P=0.013)、甘油三酯(P=0.044)为视网膜鼻侧象限RNFL厚度的独立影响因素。血肌酐(P=0.042)是眼睛颞侧象限RNFL厚度的独立影响因素。结论畜禽肉及肉制品的摄入量与T2DM患者RNFL厚度密切相关,饮食干预对预防T2DM视网膜病变有一定临床意义。     

Reg Ⅳ基因缺失CRD结构域片段获得及其表达载体的构建与转染

目的: 探讨应用基因重叠延伸拼接PCR (SOE-PCR)技术构建Reg Ⅳ基因缺失CRD 结构域表达载体,并转染Reg Ⅳ低表达结直肠癌细胞系.方法: 应用SOE-PCR法获得Reg Ⅳ缺失CRD 结构域片段,构建真核表达载体并转染Reg Ⅳ低表达结直肠癌LoVo细胞,G418筛选,RT-PCR检测鉴定.结果: 经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体构建成功,经pcDNA3.1-Reg Ⅳ-domain△转染的LoVo细胞Reg Ⅳ-domain △呈阳性表达.结论: 利用SOE-PCR技术可成功构建Reg Ⅳ基因缺失CRD 结构域的表达载体.     

枣味不同提取物镇静催眠作用研究

目的 研究枣味（酸枣仁、五味子）不同提取物的镇静催眠作用。方法分别制备枣味水提物、醇提物、醇水双提合并物,将小鼠随机分为空白组、对照组和实验组。观察各提取物对小鼠自主活动次数及睡眠时间的影响。结果与空白组相比,枣味醇提物高剂量组和醇水双提物中剂量组小鼠的自主活动次数明显减少;各组小鼠睡眠时间明显延长,其中醇提物和醇水双提物中、高剂量组催眠作用最显著。结论采用醇提或醇水双提方法所得的酸枣仁、五味子提取物具有明显的镇静催眠作用。