日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原诊断血吸虫病的初步探讨

用日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)作探针，采用ELISA和ELIB检测血吸虫病人血清抗体，对急慢性血吸虫病人的控出率分别为100％和98．2％，未出现假阳性及交叉阳性反应；治疗后3、6和12个月血清抗体的阴转率分别为32．3％、50．9％和64％。其中抗82，73，67，52，42，38，32，31，28，26．21，18kDa分子的血清抗体消失较快。结果表明，SIEA在血吸虫病的诊断中具有较高的敏感性、特异性和潜在的疗效考核价值。     

以课外科研工作为基础拓展医学生创新综合素质教育空间的探索

对近年来开展医学生课外科研实践进行了回顾性总结与展望,深刻认识到课外科研工作在医学生创新综合素质教育中的重要作用。要达到课外科研工作"扶助学生成才"的目的,就必须对带教老师进行精心的遴选;对学生进行严格的选拔,做到"因材施教",筛选的学生一定要"富有兴趣,学有余力,确有时间";然后针对学生综合情况与学生共同精心设计并实施周密的个性化的培养方案。从科研技能、科学思维、科学精神三方面对学生进行循序渐进的培养,拓宽学生视野,教育学生善于求索、勇于创新、诚于协作。     

中华按蚊防御素基因的克隆、原核表达及其重组产物生物活性的初步评价

目的 克隆、原核表达中华按蚊的防御素基因,并对其表达产物的生物学活性进行评价。方法 根据已发表的埃及伊蚊和冈比亚按蚊防御素基因序列设计合成两对引物,以中华按蚊成蚊cDNA为模板进行PCR扩增,将预期片段克隆测序并进行分析;根据表达质粒pET32a(+)上的克隆位点及测序结果设计PCR引物,将截短的基因片段重组入质粒pET32a(+)中进行表达,纯化表达产物并进行体外抑菌试验。结果 PCR扩增产物大小约270bp,目的基因的序列与冈比亚按蚊防御素基因同源性为85%;截取其保守功能区域序列(162bp),构建成功重组表达质粒pET32a(+)-tDEF,含重组质粒的转化菌用IPTG诱导表达后,于M_r26000处可见一预期的特异表达带,该蛋白与抗6-His抗体有特异性的反应;琼脂扩散法显示,纯化的重组防御素融合蛋白未出现抑菌环。结论 首次克隆了中华按蚊防御素基因,其截短片段在大肠杆菌中得到了高效可溶性表达,但重组融合蛋白不具备抑菌活性。     

医学寄生虫学教研网研制经验之我谈

近几年来，随着互联网技术的飞速发展，网络技术已经广泛应用于社会的方方面面，作为信息载体的网站的作用日益显，本总结了医学寄生虫学教研网开发过程中的一些经验，探讨了网页制作工具的比较和选择等方面的几点经验。     

基于TFF3、ERK/NF-κB信号通路探讨加味七方胃痛颗粒对人胃癌细胞株SGC7901增殖凋亡的影响

目的:探讨加味七方胃痛颗粒对人胃癌细胞株SGC7901肠三叶因子3(Trefoil Factor3,TFF3)的表达及其细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)/核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路的调控机制。方法:参照血清药理学方法制备加味七方胃痛颗粒含药血清,分别用不同剂量的含药血清、5-氟尿嘧啶(5-FU)和生理盐水对SGC 7901进行培养。分别采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法及流式细胞术检测细胞增殖及凋亡;采用western blot、RT-PCR检测细胞TFF3、NF-κB、ERK mRNA及蛋白表达水平。结果:与空白对照组相比,加味七方胃痛颗粒能抑制SGC 7901的增殖、促进其凋亡(P0.05),并呈浓度、时间依赖性;中药血清干预后人胃癌细胞株TFF3、ERK、NF-κB蛋白和mRNA表达降低,与空白对照组相比差异具有统计学意义(P0.05)。结论:在体外试验中,加味七方胃痛颗粒能抑制SGC 7901的增殖并促进其凋亡,可能通过下调胃癌细胞TFF3、ERK/NF-κB蛋白的表达水平,从而到达抗癌作用。     

抗肿瘤候选药物Gedatolisib在体外血浆和人工胃/肠液中的稳定性研究及其降解产物分析

目的:考察抗肿瘤候选药物Gedatolisib在体外血浆和人工胃/肠液中的稳定性,并分析其在体外血浆中可能的降解产物。方法:采用高效液相色谱法,以吲哚美辛为内标,分别检测Gedatolisib在SD大鼠(雄性)血浆中孵育0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 h和在空白人工胃液(pH 1.3,不含酶)、空白人工肠液(pH 6.8,不含酶)、人工胃液(pH 1.3,含胃蛋白酶)、人工肠液(pH 6.8,含胰蛋白酶)中孵育0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、6.0 h的含量变化,计算其剩余百分比;利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)技术分析空白血浆和血浆孵育样品的总离子流图,比较差异峰并通过MS图推测降解产物。结果:Gedatolisib在大鼠血浆中孵育2.0 h时的剩余百分比约为63%,继续孵育无明显变化;在空白人工肠液中孵育不同时间的剩余百分比均在(99.18±2.15)%～(103.20±3.41)%范围内;在人工肠液中孵育2.0 h的剩余百分比降至(88.76±1.53)%,在空白人工胃液中孵育2.0 h的剩余百分比降至(85.63±1....     

弓形虫多表位基因重组抗原在弓形虫免疫检测中的应用

目的评价弓形虫多表位基因重组抗原在弓形虫感染诊断中的效果，探索多表位抗原在弓形虫免疫检测中的应用前景。方法以Ni—NTAAgarose和割胶电渗两步纯化法。获取弓形虫多表位基因的原核表达纯化产物rMAG，以适宜浓度的rMAG包被ELISA微孔板，分别检测弓形虫急性和慢性感染血清，评价试剂盒检测的敏感性和特异性。结果经Ni—NTAAgarose和割胶纯化，得到了纯度为95．86％的弓形虫多表位重组可溶性抗原。以3μg／ml的抗原浓度包被ELISA微孔板，对兔和小鼠的急慢性弓形虫感染血清进行了检测。结果检测小鼠血清141份，其中慢性感染弓形虫小鼠血清117份、正常小鼠血清24份，检测体系的敏感性为88．88％，特异性为91．67％，一致性为89．36％。检测兔血清24份，其中急性感染弓形虫兔血清18份，正常兔血清6份，阳性血清检出率为94．4％，总一致性为91．5％。结论以弓形虫多表位重组抗原构建的ELISA试剂盒既可以检测弓形虫急性感染血清．又可以检测弓形虫慢性感染血清．具有一定的应用前景。     

基于网上资源利用的课程教学改革

以医学寄生虫学为依托开展网络教学 ,是基于网上资源利用的课程教学改革。本文主要介绍运用这一模式进行教学的具体实践 ,并对该教学模式的教学效果进行了评价和探讨     

一氧化氮在弓形虫感染中的作用

弓形虫 ( Toxoplasma gondii)是一种人畜共患、传播广泛、专门寄生在有核细胞内的机会性致病原虫。一般寄生于脑、肌肉等细胞中 ,可长期甚至终生寄生在宿主体内 ,是爱滋病患者、器官移植患者等免疫功能受累或受抑制宿主并发症甚至死亡的重要原因之一 ( Luftetal.,1 992 )。弓形虫速殖子和缓殖子的转换是其机会性致病的中心环节。目前对速殖子和缓殖子的转换机制还未完全了解 ,但已发现一些线索。其中一氧化氮 ( nitric oxide,NO)在弓形虫感染中被认为起着至关重要的作用。1　弓形虫感染时一氧化氮的产生机制NO是由氧分子和来自 L-精氨酸…     

NF-κB基因沉默对人胃癌SGC7901细胞增殖影响及机制探讨

目的:研究NF-κB基因沉默对人胃癌细胞SGC7901增殖及TFF3、ERK表达的影响。方法:应用脂质体法将靶向NF-κB的干扰RNA(si RNA)转染入胃癌细胞株SGC7901中。采用MTT法和流式细胞术法检测NF-κB基因沉默对SGC7901细胞的增殖抑制率和细胞凋亡情况,运用Real time PCR和Western blot免疫蛋白印迹法检测SGC7901细胞内TFF3、ERK的表达。结果:MTT法显示NF-κB基因沉默组癌细胞抑制率大于空白载体组和对照组(P0.01);流式细胞术法表明NF-κB基因沉默组细胞凋亡比例达12.60%,明显高于空白载体组和对照组(P0.01);RT-PCR和Western Blot检测示,经NF-κB基因沉默后,细胞内NF-κB、TFF3、ERK m RNA及蛋白表达量下降明显。结论:NF-κB基因沉默可抑制胃癌细胞的增殖并促进其凋亡。NF-κB基因作为胃癌治疗的分子靶点可能具有重要意义。