重组人前列腺特异性抗原的原核表达、纯化与鉴定

目的:用分子克隆技术体外制备人前列腺特异性抗原(PSA)重组蛋白,并对其活性进行鉴定。方法:用分子克隆技术从前列腺癌cDNA文库中扩增PSAcDNA,再将cDNA和准备插入的质粒载体PET-12α分别用限制性内切酶NdeⅠ和BamHⅠ消化,然后用T4连接酶将两者连接,序列正确的阳性克隆转染BL21(DE3)大肠埃希菌,诱导表达重组人PSA蛋白,从细菌包涵体中纯化PSA蛋白,再用小剂量胰岛素激活PSA活性,观察活化的PSA是否分解其变色底物S-2586和天然底物精囊蛋白Semenogelin(Sg)。结果:利用原核表达技术得到了重组人PSA,在胰岛素作用下PSA被激活,活性PSA水解其天然底物Sg和变色底物S-2586。结论:用基因克隆方法体外获得的重组人PSA蛋白可表现与天然PSA同样的丝氨酸蛋白酶活性和功能。     

膀胱全切改良 Sigma 直肠膀胱术 10 例临床疗效分析

Objectives To discuss The clinical effect study of 10 cases modified Sigma rectum pouch after radical cystectomy.Methods 10 male patients had been performed modified Sigma rectum pouch from Jan.2006 to Jan.2008.A segment of Sigmoid colon was folded and a longitudinal incision about 25cm Was made on the Sigmoid wall and the incision was sutured so as to form a low pressure pouch.The ends of the 2 ureters were anastomosed to - gether to form a big nipple and Wag then drawn into the top of the pouch for 2～3cm and the ureteroSigmoidostomy was accomplished.Results The operative time of modified Signm rectum pouch took 60min.10 cases had been followed up for 5～24months with a mean of 16 months and good urinary continence without acid - base dysequilibri - um.A slight unilateral hydronephrosis occurred in 1 cage.Conclusions The method is the character of short time,a few complication good continence,as well as ,according with physiological requirement.The life quality of patients would be markedly improved.     

先天性双侧射精管缺如伴精囊囊肿1例并文献复习

目的:报告1例单纯先天性双侧射精管缺如(EDA)伴精囊囊肿的病例,并复习相关文献,提高对本病的诊治水平。方法:通过对1例先天性双侧EDA伴精囊囊肿诊断、治疗的回顾,结合国内外文献报道,综合分析先天性EDA的发生、诊断及治疗。结果:本例经精道造影等检查证实为双侧单纯先天性EDA,合并精囊囊肿,睾丸生精功能正常。结论:先天性EDA源于胚胎期中肾管发育缺陷,精道造影可确诊。双侧EDA患者可行经尿道射精管切开或附睾或睾丸取精行卵细胞胞质内单精子注射治疗。     

组织蛋白酶D在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

为探讨组织蛋白酶D（CD）的表达与膀胱移行细胞癌（BTCC）生物学行为间关系，应用免疫组织化学ABC法，对33例BTCC及12例正常膀胱组织中CD抗原进行检测。结果显示：正常膀胱移行细胞均呈弱阳性表达，BTCC组肿瘤细胞强阳性率显著高于正常对照组（P＜0．05），且在不同病理分级、临床分期、单发与多发、初发与复发之间差异显著（P＜0．05）。提示CD表达与BTCC生物学特性密切相关，CD通过降解天然屏障在肿瘤浸润转移过程中起重要作用。     

脱套固定法治疗隐匿性阴茎的效果

目的探讨阴茎脱套固定法治疗隐匿性阴茎的手术技巧及效果。方法26例隐匿性阴茎患者,年龄3‐21岁,其中成人2例。均采用阴茎脱套固定手术方式,术中腹侧包皮长度不足者3例,采用包皮“Z”字改型手术缝合。结果手术平均时间58 min ,术中出血量2‐5 ml ,术后平均住院5 d。术后随访1个月‐1年,26例患者阴茎显露均满意,平均延长2.3 cm ,2个月内包皮水肿均基本消退,1例因包皮长度不足采用包皮“Z”字改型手术缝合者,术后1年因包皮外观臃肿再次行包皮成形术,术后效果满意。结论阴茎脱套固定法治疗隐匿性阴茎手术操作简单,创伤小,术后恢复迅速,疗效良好。     

输尿管镜钬激光碎石术中输尿管狭窄的处理

目的探讨输尿管镜钬激光碎石术中输尿管狭窄的处理方法。方法 2008年4月至2009年12月,共行输尿管镜碎石术306例,其中75例合并输尿管狭窄,分别接受输尿管镜下狭窄扩张、钬激光内切开等治疗,回顾性总结处理方法、疗效及其并发症。结果 75例结石合并输尿管狭窄,9例直接开放手术,66例采用输尿管镜下扩张或内切开治疗,其中51例经腔内处理后成功碎石,2例出现术中并发症。出院前复查结石完全清除率84%(63/75),拔除双J管前结石清除率92%(69/75),拔管后1个月结石清除率97.2%(70/72),复查超声无肾积水加重者。结论输尿管结石合并其远端输尿管狭窄可通过输尿管镜腔内技术有效解决。     

前列腺癌患者外周血中巨噬细胞移动抑制因子基因-173位点单核苷酸多态性的研究

目的 探讨前列腺癌(PCa)患者外周血中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因-173位点单核苷酸多态性在PCa发生中的作用.方法采用病例对照研究方法提取259例PCa、301例非肿瘤非前列腺疾病患者外周血中基因组DNA,应用PCR-限制性片段长度多态性分析MIF基因-173位点的多态性,比较不同基因型与PCa易感性的关系,并分析基因多态性与年龄、吸烟情况、肿瘤家族史的关系.结果 PCa患者中携带*C等位基因比例为36%,显著高于对照组的15%;携带MIF-173*C等位基因的个体PCa发病风险为G/G基因型的2.96倍(OR=2.96,95%CI:1.92～4.57);年龄>70岁、浅吸烟、有肿瘤家族史人群携带MIF-173*C等位基因的个体PCa发病风险显著高于G/G基因型个体,校正OR值分别为3.66(95%CI:2.02～6.62),2.83(95%CI:1.07～7.45)和3.26(95%CI:1.24～8.55).结论 MIF-173*C等位基因可能与PCa发生有关,年龄、吸烟情况、肿瘤家族史是PCa发病中的重要影响因素.     

精囊蛋白Semenogelin抑制精子活动的活性片段分析

目的:制备重组Sem enogelin(Sg)及其不同的氨基酸片段,研究其对精子活动的影响。方法:设计特异性的引物,用分子克隆技术从精囊cDNA文库中扩增精囊蛋白Sg及其N端和C端片段的DNA,再将DNA插入质粒载体PET100,筛选序列正确的阳性克隆,转染BL21(DE3)大肠埃希菌,诱导表达重组人类Sg蛋白及其N端和C端片段,用50%N i-NTA纯化重组蛋白,用上游法筛选出的正常生育男性活动精子行抑制分析,研究重组Sg及其两片段在4种不同浓度(0、1、5、10)ng/μl下对精子活动的影响。结果:重组Sg及其N端片段在5、10 ng/μl浓度下明显抑制精子的运动(P<0.001),C端片段对精子运动无抑制作用(P>0.05)。结论:Sg分子中明显抑制精子运动的活性片段在氨基端,精液液化过程中,必须清除这端抑制片段,精子才能前向运动。     

鼻咽癌癌旁粘膜的p53蛋白免疫组织化学观察

我们曾报道过鼻咽癌（ＮＰＣ）组织中ｐ５３蛋白积聚的生物学特征和临床意义［１］，但是ｐ５３基因的突变发生在ＮＰＣ发生发展中的哪个阶段尚不清楚，为此我们以ＮＰＣ癌旁粘膜组织为材料，用免疫组化和图像定量分析的方法，观察癌旁粘膜上皮ｐ５３蛋白积聚的情况，以判...     

人工授精840例的操作和护理体会

我院从 1984年开始人工授精及人类精子库的研究 ,1985年 3月应用于临床 ,至今已有 14年 ,已完成人工授精840例 ,总结报告如下。1　临床资料1.1　一般资料1987年 4月至 1997年 6月对 840例男性不育症患者进行人工授精治疗 ,其中性交障碍 37例 ,男方有遗传病 2 4例 ,男性绝育术后复通失败 8例 ,无精症 733例 ,免疫因素致不孕症 2 1例 ,多胎畸形 7例 ,多次流产 10例。1.2　方法供精对象的选择及精液的采集 :本组采用“健康供精者”,即确认无遗传病、传染病、性病等病史 ,外貌端正、体格健壮、有生育史及一定的文化修养 ,经过体格检查合格者。要…